干扰素体外释放酶联免疫法在结核潜伏感染诊断研究

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1、干扰素体外释放酶联免疫法在结核潜伏感染诊断研究摘要：目的探讨干扰素体外释放酶联免疫法(TB-IGRA)在结核潜伏感染中的诊断分析。方法对接受调查的140例健康者资料进行分析，这些健康者在调查前对其进行结核菌素皮试，并采用不同的方法进行IFN-Y平行检测。结果140例健康者中，WT试剂阳性率为25.7%(36/140)；QFT试剂阳性率为21.4%(30/140)均高于PPD3+〜4+(阳性率为14.3%(20/140))；28例密接者中，PPD3+〜4+阳性率为39.3%(11/28)低于WT试剂和QFT试剂阳性率(46.4%(13/28)、67.8%(19/28))o结论干

2、扰素体外释放酶联免疫法(TB-IGRA)在结核潜伏感染中检测效果较好，诊断价值要比PPD皮试高，值得推广使用。关键词：干扰素体外释放酶联免疫法；结核潜伏感染调查者；诊断分析当前，我国大约130万人为结核病调查者，位居世界第2位。人体感染结核分枝杆菌后，病菌会潜伏在人体中。当人体免疫力降低时，则会导致结核分枝杆菌大量增殖，引发疾病。临床上对于这种疾病的检测主要以的Y-干扰素检测试剂盒(体外释放酶联免疫法)(简称WT试剂)检测为主。为了探讨干扰素体外释放酶联免疫法(TB-IGRA)在结核潜伏感染中的诊断分析。1资料与方法1.1一般资料对接收调查的140例健康者资料进行分析，调查中

3、，有15例男性，65例女性，健康者年龄在39〜84岁，他们的平均年龄为（49.4±1.3）岁。两组调查者年龄、入院时间等资料经分析指标间没有统计学意义（P>0.05）o1.2方法调查中，对调查者进行体检，必要时对调查者进行辅助检查，如调查者的结核功能、体温等。首先，在对这些健康者检查过程中，使用美国BD公司肝素锂抗凝采血管抽取超过55mL静脉血，然后将抽取的样本颠倒混匀3次以上，每种培养管分装ImL,分装前需要颠倒混匀3次以上并立刻于37*培养箱中静置培养（22±2）ho然后将样本培养（22±2）h后取出，并进行离心，收集上清液。最后使用双抗体夹心法定量检测上清液中IFN-Y

4、的含量，并根据结果判定是否为结核分枝杆菌感染阳性。QFT试剂新鲜全血标本采集，利用抽取的3种不同的采血管，按照灰盖（本底对照培养管）、红盖（结核特异性抗原测试培养管）、紫盖（非特异刺激原阳性对照培养管）的顺序分别采集1mL静脉血，并立即颠倒混匀3次以上，使抗凝剂充分溶解。新鲜全血经刺激培养（22±2）h后，3离心10min（000〜5000rpm）,取上清放于新的EP管中。PPD检测：医护人员在健康者前臂皮内注射标准PPDO.1mL。待72h后，观察调查者的反应结果，并详细记录硬结平均直径(mm)。PPDO.05,见表2。3讨论目前，国内对于结核潜伏感染调查者的诊断主要是根据

5、结核菌素皮试的结果判定的，普遍认为PPD强阳性或在短期内阴性转为阳性者即为结核菌潜伏感染者。但是，P这种方法却不能区分BCG接种产生的免疫应答反应与潜伏感染产生的应答反应。肖松生等人曾经提出：利用ELISPOT法能够有效地诊断出结核潜伏感染调查者，并且这种方法目前已经被广泛使用。首先，在检测健康人群中，WT和QFT试剂IGRA阳性率高于PPD皮试法。其阳性率分别为25.7%,21.4%和14.3%。而在密接者中，三种方法的阳性率分别为46.4%,67.8%和39.3%o由于调查范围属于体外免疫科的实验室，实验室中存放了大量的痰标本，在平时的工作中不可避免的会接触结核杆菌。即使

6、这样，实验结果还表明，IGRA和PPD两种测试对结核潜伏感染都有用处。其次PPD结果与IGRA结果之间有相关性，当PPD检测结果为3+〜4+,WT试剂阳性率60%(12/20)OPPD检测结果为阴性时,WT阳性率为18.2%(2/ll)o相关研究显示，筛查结核潜伏感染可用先PPD,后IGRA的两步策略，但IGRA须在PPD检测之后的3d内进行。此次调查中，二者检测时的原理一样，但是两种试剂结果还是有差别。实验中，总体人群中阳性率WT试剂高于QFT试剂，在密接者中QFT试剂高于WT试剂。但总的来说，WT试剂与QFT试剂符合率良好达86.7%oQFT试剂已被国外验证在诊断结核感染

7、及结核病方面的特异性和敏感性都很好，在本实验中选用QFT作为对照，比较其与WT试剂的差异(P>0.05)o综述，干扰素体外释放酶联免疫法(TB-IGRA)在结核潜伏感染中检测效果较好，诊断价值要比PPD皮试高，值得推广使用[1-5]o参考文献：[1]肖松生，杨倩婷，蔡雄茂，等•外周血IFN-Y的检测在结核分枝杆菌潜伏感染诊断中的价值[J]•临床肺科杂志，2008,(10).[2]李晓非，赵勤，汪亚玲，等.两种结核分枝杆菌相关丫-干扰素定量检测试剂盒检测结核分枝杆菌感染结果比较研究[J].中国防廃杂志，2