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《血小板hla配合性输注的临床观察》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、血小板HLA配合性输注的临床观察吴强张建伟许飞（常州市中心血站213004）【摘要】目的探讨解决血小板输注无效的有效途径，改善血小板输注的临床效果。方法对42例各类血小板输注无效患者进行HLA抗体特异性分析。采用FCXM技术对20例各类血小板输注无效患者进行配合试验，选择HLA-I类位点3个以上抗原相合，输注适合的血小板并与22例各类血小板输注无效患者随机血小板输注进行临床观察。结果42例各类血小板输注无效患者中34例HLA・l抗体阳性，阳性率为80.9%。配合性血小板输注患者的24小时血小板上
2、升均值高于随机血小板输注患者（PV0.05）。结论反复随机输注血小板易发生同种免疫反应，产牛HLA抗体，导致血小板输注无效，建立者血小板供者资料库，采用FCXM技术交叉配型选择HLA相合或相容单一供体进行血小板输注，实现提高血小板输注治疗效果，是解决PTR的有效途径。【关键词】血小板输注无效HLA抗体HLAFCXM【中图分类号】R457【文献标识码】A【文章编号］2095-1752（2012）03-0162-021材料与方法1.1观察对象1.1.1血小板输注无效患者42例，另性18例，女性24例
3、年龄最小6岁,最大66岁，平均年龄40.26岁，分为两组：1.1.2实验组：配合性血小板输血患者20例，其中急性粒细胞性白血病6例，慢性粒细胞性白血病4例，急性淋巴细胞性白血病5例，再牛障碍性贫血3例，直肠癌2例，血小板计数最低10×109/L,最高60×109/L,平均计数33.1×109/Lo对照组：随机血小板输注无效患者22例,其中5例急性粒细胞性白血病，5例慢性粒细胞性白血病，5例胆道感染，4例急性淋巴细胞性白血病，3例多发性骨髓瘤。血小板计数最低为2
4、2×109/L,最高80×109/L,平均计数42.3×109Lo1.2观察方法1.2.1HLA-I类抗原分型HLA基因分型参照TBGSSP说明操作。1.2.2HLA抗体检测按照GTIQIDHLA-I类抗体确定试剂盒说明操作。1.2.3FCXM⑶交叉试验1.2.3.1供者淋巴细胞的分离用Ficoll-Hypaque分离供者外周血淋巴细胞，溶血，PBS洗两次，于10%二甲基亚枫内一80°C保存待用。1.2.3.2实验前所有血清于56°C环境孵育30min以灭活补
5、体取3x105供者淋巴细胞与未稀释的受者血清30ul于37C0孵育30min,PBS洗3次，加鼠抗人CD3—Per—CP、鼠抗人CD19—PE,羊抗人lgGF(ab*)2-FTFC抗体各10ul,对照管以AB血型男性未免疫血清(未输过血及其他自身免疫性疾病的健康男性)代替受者血清，室温下避光孵育15min,PBS洗两次，重新悬浮于500ulPBS中上机待测。1.2.3.3流式细胞仪检测置EPICS—AITRA按常规进行分析，激发波长488nm,以相应荧光标记的同型对照IgGl染色细胞为阴性对照，
6、设置各通道之间的荧光补偿后，EXPO32软件收集FSCSSC,荧光信号通过线性放大，分别对CD3阳性细胞及CD19阳性能够细胞设门,用直方图分析CD3阳性细胞仃细胞)，CD19阳性细胞(B细胞)荧光1(FL-1)(羊抗人lgGF(ab*)2FITC)几何平均荧光强度。如欲测抗单核细胞抗体，可用CD14作单核细胞的标记，如测IgGM或IgA,用羊抗人lgAF(ab')2、羊抗人lgMF(ab*)2抗体代替羊抗人IgGF(ab')。计数5000个细胞,阴性对照用6份男性未输过血的正常人血清，超过对照
7、组5%-10%视为阳性。1.2.4对20例实验组患者行流式细胞术淋巴细胞毒性交叉试验(FCXM),结果阴性方可输注。1.2.5采用美国HEMONETICSMCS採+血液成分离机进行单采血小板，42名患者总共用血小板悬液420u,每例以输注10uo1.2.6HLA配合分级［4］：A、B位点四个抗原完全一致为A级；A、B位点2・3个抗原一致，余为空白位点为B级；A、B2・3个位点抗原一致，余为交叉反应性位点为C级；A、B位点1个抗原一-致为D级；A、B位点4个抗原完全不一致为E级。1.2.7对两组血
8、小板输血前后血小板计数变化，血小板24h上升值以及临床止血效果进行观察分析。2结果与分析42例患者HLA・A/B基因频率分别为A*02(0.319)>A*ll(0.261)>A*24(0.096)、A*33(0.073);HLA-B基因频率分别为B*46(0.159)>B*60(0.161)、B*13(0.082)>B*58(0.076)、B*62(0.04刀、B*75(0.058)o与我们建立的健康捐血员血小板HLA基因资料库频率分布相符。42例各类血小板输注无效患者中34例HLA・I抗体阳性
