聚乙二醇对溶菌酶淀粉样纤维形成的作用

《聚乙二醇对溶菌酶淀粉样纤维形成的作用》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、聚乙二醇对溶菌酶淀粉样纤维形成的作张帅洲曾成鸣陕西师范大学化学化工学院摘要：目的探索在聚乙二醇（PEG）存在的条件下，溶菌酶淀粉样纤维化及由此生成的聚集体对细胞的毒性作用。方法溶菌酶溶液中分别加入不同相对分子质量的PEG,在pH值为2.0、55°C的条件下孵育。采用硫黄素荧光监测溶菌酶淀粉样纤维化，透射电子显微镜观察聚集体形态，以诱导人红细胞聚集和溶血为指标评估溶菌酶聚集体对细胞膜的损害作用。结果在实验条件下，溶菌酶可形成淀粉样纤维，所有PEG均能够抑制溶菌酶的淀粉样纤维化，改变溶菌酶聚集体的形态，降低聚

2、集体的表而疏水性和聚集体对细胞的损害作用。结论PEG能够抑制溶菌酶的淀粉样纤维化，并使溶菌酶聚集体的细胞毒性减弱。关键词：聚乙二醇;溶菌酶;淀粉样纤维化;细胞毒性;红细胞;作者简介：张帅洲，男，硕士研究生作者简介：曾成鸣，男，博士，教授，博士生导师收稿日期：2017-02-15EffectsofpolyethyleneglycolonamyloidfibrillationoflysozymeZHANGShuaizhouZENGChengmingSchoolofChemistryandChemicalEng

3、ineering,ShaanxiNormalUniversity;Abstract：ObjectiveToinvestigateamyloidfibrillationandfibrillarcytotoxicityoflysozymeinthepresenceofpolyethyleneglycols(PEG).MethodsPEGwasmixedwithlysozymepriortoincubationatpH2.0and55°C.Thegrowthcurveof1ysozymefibrilwasmon

4、itoredbythioflavinTfluorescence,andmorphologyoflysozymeaggregateswasvisualizedundortremsmissionelectronmicroscopy.Thecytotoxicityoflysozymeaggregateswasevaluatedbymeasuringhemolysisandaggregationofhumanredbloodcells.ResultsIncubationoflysozymeunderthecond

5、itionofthisstudyresultedintheformationofamyloidfibri1s.Al1thePEGstestedhereinwereabletoinhibitlysozymefibrillation，andalterthemorphologylysozymeaggregates.UponincubationwithPEG,thesurfacehydrophobicityandcytotoxicityofresultantaggregatesoftheproteinwerede

6、creased.ConelusionPEGisabletoinhibitamyloidformationoflysozyme,anddecreasecytotoxicityoftheresultantaggregates.Keyword：polyethyleneglycol;lysozyme;amyloidfibrillation;cytotoxicity;redbloodcells;Received：2017-02-15蛋白质淀粉样变性以及由此引发的多种人类疾病日益受到关注，现已知20多种人类疾病与蛋白

7、质因错误折叠形成淀粉样纤维相关II丄。这些由蛋白质形成的淀粉样纤维沉积于细胞膜，造成细胞损害，最终导致细胞凋亡［2-3］。减少相关蛋白表达，增加其稳定性，抑制纤维化，解聚淀粉样纤维结构是探索相关疾病治疗方法的重要途径。亲水性聚合物，包括聚乙二醇（polyethyleneglycol,PEG）、右旋糖酹及白蛋白等，可提供增加蛋白稳定性的物理化学环境。经PEG修饰过的药物蛋白不仅可以维持药物的生物活性，还可以降低药物蛋白的免疫性和毒性££。溶菌酶是一种相对分子质量较小的碱性蛋白，在一定条件下可形成淀粉样沉积，

8、人类遗传性系统淀粉样变性疾病与此有关隹1。溶菌酶蛋白家族具有高度的序列保守性，鸡卵清溶菌酶与人类溶菌酶的氨基酸序列具有很高的相似性，在体外条件下形成的淀粉样纤维与病理组织提取的纤维具有相同的结构、理化性质和细胞毒性回。本文采用鸡卵清溶菌酶淀粉样纤维作为体外实验模型，探索不同相对分子质量PEG对蛋白质淀粉样纤维化的作用。1仪器与材料1.1仪器LS-55型荧光分光光度计（美国PerkinElmer公司）；JEM-1400透射电镜（