转化生长因子、增殖细胞核抗原和bcl-2在皮肤混合瘤中的表达及意义

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1、转化生长因子、增殖细胞核抗原和bcl-2在皮肤混合瘤中的表达及意义阎凯(四川省医学科学院/四川省人民医院皮肤病性病研究所四川成都610031)【摘要】冃的检测转化生长因子(TGF)・、增殖细胞核抗原(PCNA)和bcl・2在皮肤混合瘤屮的表达及意义。方法采用免疫组化法检测18例皮肤混合瘤的石蜡包埋组织及10例正常皮肤组织中TGF・、PCNA和bcl-2的表达。结果TGF-在皮肤混合瘤组织屮阳性率高于正常皮肤对照组，两者差异有统计学意义(P<0.05)；PCNA在皮肤混合瘤组织屮阳性率高于正常皮肤对照组，两者差异有统计学意义(P<0.

2、05)；bcl・2在皮肤混合瘤组织屮阳性率高于正常皮肤对照组,两者差异有统计学意义(P<0.05)o结论TGF-、PCNA和bcl・2在皮肤混合瘤组织屮均呈高表达，其与皮肤混合瘤的发生关系密切。【关键词】转化生长因子增殖细胞核抗原bcl-2皮肤混合瘤【中图分类号】R730【文献标识码】A【文章编号】2095-1752(2012)33-0087-02皮肤混合瘤(mixedtumoroftheskin,MTS)是一种少见的良性皮肤附属器肿瘤，关于此病的研究较少，其发生机制尚不清楚。本研究采用了免疫组化法，检测转化生长因子(TGF)■、增殖细胞

3、核抗原(PCNA)和bcl・2在皮肤混合瘤中的表达，探讨它们在皮肤混合瘤的发生、发展中的意义和价值。1资料与方法1.1研究对象：18例标本均來自四川省人民医院皮肤病性病研究所病理科1990年至2010年存档的石蜡包埋组织块，另设10例在我院行C02激光包皮环切术的正常包皮组织为对照组。1.2试齐IJ：TGF・α、PCNA和bcl-2单克隆抗体均为丹麦Dako公司产品，购于迈新生物试剂公司。1.3实验方法：采用免疫组化Envision法染色和DAB显色，用已知阳性的组织切片作实验阳性对照，相同切片以PBS代替一抗作空白对照。石蜡切片常

4、规脱蜡至水,抗原热修复后,分别滴加TGF-α>PCNA和bcl-2—抗工作液，孵育1小时后再以Envision/HRP（即用型试剂）室温孵育30至45minoDAB显色，显色充分后用自来水终止。苏木精复染lmin,常规梯度脫水至封片。1.4结果判断：显微镜下随机检测5个独立高倍视野（×400）。染色强度评分：0分为无色，1分为细胞染色呈浅黄色（轻度），2分为细胞染色呈黄色（中度），3分为细胞染色呈棕褐色（重度）。着色范围以阳性细胞百分比来判定，无阳性细胞表达为0,阳性细胞数为1%〜25%为1分，阳性细胞数为26%〜50%

5、为2分，阳性细胞数为51%〜75%为3分，阳性细胞数为75%〜100%为4分。上面两项相加为分级标准：阴性计0〜1分，弱阳性（+）计2〜3分，阳性（++）计4〜5分，强阳性（+++）计6〜7分。1.5统计学方法：应用SPSS15.0统计软件包统计，各组样本间的比较采用χ2检验，以P<0.05为显著性差异。2结果2.1TGF-α免疫组化染色结果：TGF-α阳性反应定位于细胞浆，阳性着色呈棕黄色至棕褐色。10份正常皮肤组织中有1份在胞浆中可见TGF-α表达为阳性，其余均为阴性。TGF-α

6、在皮肤混合瘤组织中阳性表达高于正常皮肤对照组，差异有统计学意义（P<0.05）,见表表1TGF-α免疫组化染色结果（n）2.2PCNA免疫组化染色结果：PCNA阳性反应定位于细胞核，阳性着色呈棕黄色至棕褐色。10份正常皮肤组织中有2份在胞浆中可见PCNA表达为阳性，其余均为阴性。PCNA蛋白在皮肤混合瘤组织中阳性表达高于正常皮肤对照组，差异有统计学意义（P<0.05）,见表2。表2PCNA免疫组化染色结果（n）2.1bcl・2免疫组化染色结果：bcl・2阳性反应定位于细胞浆，阳性着色呈棕黄色至棕褐色。10份正常皮肤组织中

7、有1份在胞浆中可见bcl-2表达为阳性，其余均为阴性。bcl・2在皮肤混合瘤组织中阳性表达高于正常皮肤对照组，差异有统计学意义(P<0.05),见表3。表3bcl-2免疫组化染色结果(n)3讨论皮肤混合瘤是一种少见的皮肤肿瘤。常发生于中年以上男性，好发于头颈部，以鼻、上唇及面颊多见。一般为单个皮下结节，少有破溃。病理组织学检查可见肿瘤细胞巢内有大小不等的导管样及囊腔样结构，间质由软骨样、黏液样或纤维性物质构成，其间可见散在的肿瘤细胞，成巢或条索状⑴。TGF-α是表皮生长因子家族的一个重要成员，许多细胞尤其是外胚层组织都可产生T

8、GF-α,其作用是刺激上皮细胞的增生，并诱导其分化[2]。在不同的皮肤肿瘤中TGF-α的表达差异较大。在关于17种皮肤附属器肿