增殖细胞核抗原和p53在肺癌组织中的表达及临床意义

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1、增殖细胞核抗原和p53在肺癌组织中的表达及临床意义摘要:目的研究增殖细胞核抗原（PA）和p53在肺癌组织中的表达及其临床意义.方法应用免疫组织化学SABC法检测肺癌患者肿瘤组织中PA和p53的表达，并探讨其与肿瘤发生及恶性行为之间的关系.结果肺癌组织中p53蛋白阳性表达率为70%，较正常组有显著差异（P<0.01），p53蛋白阳性表达率在淋巴结转移者显著高于无淋巴结转移者（P<0.01），在不同组织学分级和病理分期的肺癌组织间p53的表达无差异性.肺癌组织PA标记指数随组织学分级和病理分期的增高而增高

2、（P<0.01），有淋巴结转移者较无淋巴结转移者显著增高（P<0.01）.p53阳性表达者PA标记指数显著高于p53表达阴性者（P<0.01）.结论p53蛋白表达与肺癌的发生和淋巴结转移密切相关;PA与肺癌的生长及恶性行为有关.　　Keys　　Abstract:AIMTostudytheexpressionsandclinicalsignifi-canceofproliferatingcellnuclearantigen（PA）andp53inlungcancertissue.METHODSIm

3、munohistochemicalstrep-tavidinbiotinperoxidaseplex（SABC）methodallungtissue（P<0.01）.Positiverateofp53expressioninthepatientsphnodemetastasisetastasis（P<0.01）.Thereorhistologicgradeandpathologicalphaseoflungcancer（P<0.01）.PA-LIofpatientsphnodemetastasi

4、setastasis（P<0.01）.PA-LIinp53positivelungcancertissuephnodemetastasisoflungcancer.TheexpressionofPAisrelatedtothegroalignantbehavioroflungcancer.　　0引言　　近年来，肺癌的发病率和死亡率呈上升趋势，严重地威胁着人类的健康和生命.寻找肿瘤的早期诊断指标和正确估计其预后具有重要的临床意义.p53是一种重要的肿瘤抑制基因，野生型p53蛋白具有调节细胞增殖和凋亡的双重作用

5、.p53基因突变则产生突变型p53蛋白，与肿瘤的发生和预后密切相关，目前研究中所检测的p53蛋白均为突变型p53.增殖细胞核抗原（proliferatingcellnuclearantigen，PA）是真核细胞DNA聚合酶的辅助蛋白，在DNA复制中起重要作用，可作为细胞增殖状态的指标.有研究表明，p53蛋白和PA阳性表达与乳腺癌［1］、肝胰管壶腹肿瘤［2］的生长、转移和预后密切相关.我们采用免疫组织化学技术检测PA和p53蛋白在肺癌组织中的表达，探讨其与肺癌发生、组织学分型、病理分期和淋巴结转移的关系，可为肺癌的

6、早期诊断、预后评价及基因治疗提供理论依据.　　1材料和方法　　1.1材料2001-6/2001-10我院肺癌住院患者50（男41，女9）例，年龄42～72岁，均经手术切除后病理证实为非小细胞肺癌，手术前均未做过化疗或放疗.按UICC（1997年）分期标准，ⅠA期3例，ⅠB期5例，ⅡA期11例，ⅡB期15例，ⅢA期13例，ⅢB期3例，淋巴结转移43例，对照组为随肿瘤切除的正常肺组织10例.PA、抗p53抗体和免疫组织化学SABC试剂盒购于武汉博士德生物工程有限公司.　　1.2方法　　1.2.1免疫组织化学染色石蜡切

7、片经二甲苯及梯度乙醇脱蜡至水，30mL・L-1H2O2溶液30min以阻断内源性过氧化物酶活性.正常山羊血清封闭30min.依次加1∶100PA和抗p53抗体、生物素化山羊抗兔IgG及链酶亲和素-生物素-过氧化物酶复合物（SABC）37℃30min，DAB显色，苏木精轻度复染，脱水透明后以中性树胶封片.　　1.2.2结果判定PA和p53阳性染色者为细胞核着色，核呈棕色或棕褐色颗粒状着色均为阳性.选择PA标记良好的区域在400倍显微镜下任选5个高倍视野，计数100～200个肿瘤细胞.PA标记指数（PA

8、-LI）=阳性细胞数/计数肿瘤细胞总数×100%.　　1.2.3统计学方法PA标记指数以x±s表示，相互比较用t检验;p53蛋白表达用阳性百分率，相互之间的比较用χ2检验.2结果　　2.1p53阳性表达结果p53阳性染色者细胞核呈棕色或棕褐色颗粒（Fig1）.10例正常肺组织中p53蛋白表达为阴性，50例肺癌组织中有35例p53蛋白呈阳性，其阳性表达率为70%，较正常组有