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时间:2018-07-09
《增殖细胞核抗原和p53在肺癌组织中的表达及临床意义》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、增殖细胞核抗原和p53在肺癌组织中的表达及临床意义摘要:目的研究增殖细胞核抗原(PA)和p53在肺癌组织中的表达及其临床意义.方法应用免疫组织化学SABC法检测肺癌患者肿瘤组织中PA和p53的表达,并探讨其与肿瘤发生及恶性行为之间的关系.结果肺癌组织中p53蛋白阳性表达率为70%,较正常组有显著差异(P<0.01),p53蛋白阳性表达率在淋巴结转移者显著高于无淋巴结转移者(P<0.01),在不同组织学分级和病理分期的肺癌组织间p53的表达无差异性.肺癌组织PA标记指数随组织学分级和病理分期的增高而增高
2、(P<0.01),有淋巴结转移者较无淋巴结转移者显著增高(P<0.01).p53阳性表达者PA标记指数显著高于p53表达阴性者(P<0.01).结论p53蛋白表达与肺癌的发生和淋巴结转移密切相关;PA与肺癌的生长及恶性行为有关. Keys Abstract:AIMTostudytheexpressionsandclinicalsignifi-canceofproliferatingcellnuclearantigen(PA)andp53inlungcancertissue.METHODSIm
3、munohistochemicalstrep-tavidinbiotinperoxidaseplex(SABC)methodallungtissue(P<0.01).Positiverateofp53expressioninthepatientsphnodemetastasisetastasis(P<0.01).Thereorhistologicgradeandpathologicalphaseoflungcancer(P<0.01).PA-LIofpatientsphnodemetastasi
4、setastasis(P<0.01).PA-LIinp53positivelungcancertissuephnodemetastasisoflungcancer.TheexpressionofPAisrelatedtothegroalignantbehavioroflungcancer. 0引言 近年来,肺癌的发病率和死亡率呈上升趋势,严重地威胁着人类的健康和生命.寻找肿瘤的早期诊断指标和正确估计其预后具有重要的临床意义.p53是一种重要的肿瘤抑制基因,野生型p53蛋白具有调节细胞增殖和凋亡的双重作用
5、.p53基因突变则产生突变型p53蛋白,与肿瘤的发生和预后密切相关,目前研究中所检测的p53蛋白均为突变型p53.增殖细胞核抗原(proliferatingcellnuclearantigen,PA)是真核细胞DNA聚合酶的辅助蛋白,在DNA复制中起重要作用,可作为细胞增殖状态的指标.有研究表明,p53蛋白和PA阳性表达与乳腺癌[1]、肝胰管壶腹肿瘤[2]的生长、转移和预后密切相关.我们采用免疫组织化学技术检测PA和p53蛋白在肺癌组织中的表达,探讨其与肺癌发生、组织学分型、病理分期和淋巴结转移的关系,可为肺癌的
6、早期诊断、预后评价及基因治疗提供理论依据. 1材料和方法 1.1材料2001-6/2001-10我院肺癌住院患者50(男41,女9)例,年龄42~72岁,均经手术切除后病理证实为非小细胞肺癌,手术前均未做过化疗或放疗.按UICC(1997年)分期标准,ⅠA期3例,ⅠB期5例,ⅡA期11例,ⅡB期15例,ⅢA期13例,ⅢB期3例,淋巴结转移43例,对照组为随肿瘤切除的正常肺组织10例.PA、抗p53抗体和免疫组织化学SABC试剂盒购于武汉博士德生物工程有限公司. 1.2方法 1.2.1免疫组织化学染色石蜡切
7、片经二甲苯及梯度乙醇脱蜡至水,30mL・L-1H2O2溶液30min以阻断内源性过氧化物酶活性.正常山羊血清封闭30min.依次加1∶100PA和抗p53抗体、生物素化山羊抗兔IgG及链酶亲和素-生物素-过氧化物酶复合物(SABC)37℃30min,DAB显色,苏木精轻度复染,脱水透明后以中性树胶封片. 1.2.2结果判定PA和p53阳性染色者为细胞核着色,核呈棕色或棕褐色颗粒状着色均为阳性.选择PA标记良好的区域在400倍显微镜下任选5个高倍视野,计数100~200个肿瘤细胞.PA标记指数(PA
8、-LI)=阳性细胞数/计数肿瘤细胞总数×100%. 1.2.3统计学方法PA标记指数以x±s表示,相互比较用t检验;p53蛋白表达用阳性百分率,相互之间的比较用χ2检验.2结果 2.1p53阳性表达结果p53阳性染色者细胞核呈棕色或棕褐色颗粒(Fig1).10例正常肺组织中p53蛋白表达为阴性,50例肺癌组织中有35例p53蛋白呈阳性,其阳性表达率为70%,较正常组有
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