高效毛细管电泳分离核苷酸类化合物及其应用研究

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1、西南大学硕士学位论文高效毛细管电泳分离核苷酸类化合物及其应用研究姓名：冯子杰申请学位级别：硕士专业：药物分析学指导教师：黄承志201206摘要高效毛细管电泳分离核苷酸类化合物及应用研究药物分析专业硕士研究生：冯子杰指导老师：黄承志教授摘要核苷酸类化合物是生物体内一类非常重要的含氮有机小分子。核苷酸是核酸的基本结构单位与前身物质，与诸多生命活动息息相关；核苷酸类化合物是生物体内重要的能量载体与生理调节物质，是生物正常生长、发育、繁殖以及应对不良环境过程中至关重要的调控因子，其代谢、分布过程与诸多生化反应息息相关；核苷酸类化合物还是生物体内某些

2、合成反应中重要的中间代谢物，其代谢紊乱会引起一系列的连锁反应，继而影响生物体的正常生理机能甚至导致死亡。当前核苷酸类化合物的分析检测方法主要包括分光光度法、荧光法、电化学法、免疫法、高效液相色谱法、毛细管电泳法等。高效液相色谱法因其良好的分离效率及自动化程度高的优势，近年来逐渐成为核苷酸类化合物检测中最常用的定性定量分析方法。高效毛细管电泳法是近几十年来兴起的另一种分离分析方法，其具有分析速度快、分离效率高、样品用量少、应用范围广、分离模式多、自动化程度高、环境污染小等诸多优点，近年来作为一种高效液相色谱法的补充与替代方法得到了越来越广泛的

3、应用。本文建立了高效毛细管电泳法用于定性定量检测核苷酸类化合物分离分析方法，并将其应用于天然产物分析及药品质量控制中，主要内容如下：1．高效毛细管电泳法分离分析严紧激素(ppGpp)研究。建立了同时分离测定细菌严紧反应信号分子ppGpp及其它严紧反应相关核苷酸的高效毛细管电泳分析方法。对于影响分离过程的毛细管规格、缓冲溶液组成、分离电压等因素进行了考察与优化并进行了方法验证。实验中还考察了生物样本中核苷酸类化合物提取常用方法对于高效毛细管电泳分析测试体系的适用性，选择了最为合适的样品预处理方法。在O．05．o．60nⅡ110l／L浓度范围内

4、，ppGpp浓度与峰面积线性关系良好，线性方程为y=113．6x+21920，r2=0．9943。方法分析时间短、分离效率高、操作简便，能够与常用的高效液相色谱法互为补充。两南大学硕士学位论文2．毛细管区带电泳法用于单磷酸阿糖腺苷质量控制研究。针对国标分光光度法中存在的无法有效区分单磷酸阿糖腺苷合成原料阿糖腺苷假阳性信号的问题，建立了基于毛细管区带电泳法的单磷酸阿糖腺苷原料药定量分析方法并对于影响分离测定效果的各因素进行了考察与优化，实现了目标药物与干扰物质的分离与含量测定。基于准确度、线性、稳定性、精密度、灵敏度等指标对所建立的分析方法进

5、行了验证，结果表明方法快速、灵敏、有效、可靠，可用于单磷酸阿糖腺苷原料药及注射用粉针剂质量控制过程中。关键词：毛细管电泳、核苷酸、定量分析lIADStraCtlJetermlnatlon0lnUCleotldeSDVCaDnlal了1h●J●nlJ●1■●■1eleCtr0DnoreSlSannltSaDDllCanonln●J●1●J●●J●■pharmaceuticalanalVsiSM萄or：Chemicalandbiologicalpha咖aceutical舭alysisPost

6、固陋duate：ZiJieFengSuperviso

7、r：ProfessorChengZhiHuangAbstractNucleotidesandnucleotided面VatiVesareVe巧iIllpon习mtni仃09en-contailliIlgo玛aIlicmoleculesforo唱aIlisms．Nudeotides钺ethebasics仃ucturaluIlitof加cleicaCidDNAandRN气w11ichisfoulldiIlabulldanceiIlaLllliViI培t11ings，mlef．ethey舢∞tioninencodin舀tran锄jtting锄de

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