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《氯霉素的高效毛细管电泳分离2电导检测》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、第24卷第9期分析试验室Vol.24.No.92005年9月ChineseJournalofAnalysisLaboratory2005-9氯霉素的高效毛细管电泳分离2电导检测X曾暖茜,谢玉璇,谢天尧(中山大学化学与化学工程学院,广州510275)摘要:在熔融石英毛细管(50μmi.d×50cm)中,以6mmolPLH3BO3+2mmolPL硼砂+体积分数0.02%TEPA(四乙烯五胺)为电泳运行介质,分离电压-15.0kV,采用毛细管电泳2电导检测法在4min内实现了氯霉素的分离检测。讨论了电渗流
2、抑制剂的浓度、缓冲体系的组成和浓度等因素对检测结果的影响。线性检测范围为1～120mgPL,检出限为0.3mgPL。对市售氯霉素滴眼液和注射液中的氯霉素进行分析,加标回收率为93.8%～106.8%。关键词:氯霉素;毛细管电泳;电导检测;四乙烯五胺中图分类号:O657.1文献标识码:A文章编号:100020720(2005)0920009203[1][2]氯霉素(chloramphenicol)是一类12苯基22氨基2出”。目前,测定方法有微生物法、酶联免疫[3][2][4]1丙醇的二氯乙酰胺衍生物
3、,分子式是C11H12法、薄层色谱法、高效液相色谱法等。最近Cl2N2O5,其结构式为:有文献报道采用毛细管电泳正高压分离2紫外检测[5]氯霉素,但分析时间较长。本文报道采用毛细管电泳2电导检测法(CE2CD),以6mmolPLH3BO3+2mmolPL硼砂+体积分数0.02%TEPA(四乙烯五胺)为电泳运行液,分离电压-15kV,在4min内实现了氯霉素的分离检测,应用于市售药品氯霉素滴氯霉素是一类广谱抗生素。对大多革兰氏阴眼液和氯霉素注射液中氯霉素的测定。性和阳性菌有效。但氯霉素具有严重抑制骨髓
4、造1实验部分1.1仪器与试剂血系统功能,可致再生障碍性贫血;另外长期用药CES2003毛细管电泳仪(高压电源,电导检测还会促发视神经炎,严重时可导致失明。因此氯霉器,毛细管电泳数据工作站,中山大学化学与化工素只在对其他抗生素耐药或不得不使用的严重病学院研制);石英毛细管(50cm×50μmi.d.,河北例中选用。氯霉素也用于家畜和家禽疾病的预防永年光导纤维厂);CQ22B型超声波清洗器(明珠电和治疗,但由于其在动物体内的残留对人体的危害器有限公司)。性,中国农业部已将氯霉素从2000年版《中国兽药硼
5、酸(H3BO3)、硼砂(Na2B4O7·10H2O)、三羟甲典》中删除列为禁药。国家质检总局禁止在出口水基氨基甲烷(Tris)、磷酸二氢钾(KH2PO4)、邻苯二产品的饲料、养殖(包括环境、器械等的消毒)、加工、保鲜、包装和运输等生产环节使用氯霉素。甲酸氢钾(KHC8H4O4)、四乙烯五胺。氯霉素标准2002年1月,美国食品与药品管理局(FDA)公布了品(中国药物生物制品检定所),氯霉素滴眼液(8禁止在进口动物源性食品中使用氯霉素,欧盟的进mL:20mg,芜湖三益制药有限公司),氯霉素注射液口食品卫
6、生标准规定“氯霉素含量标准为不得检(2mL:25g,天津药业集团新郑股份有限公司)。X收稿日期:2004206210;修订日期:2004208226基金项目:中山大学“学生科技计划基金”和化学学院“创新实验”基金资助作者简介:曾暖茜(1981-),女,硕士研究生—9—第24卷第9期分析试验室Vol.24.No.92005年9月ChineseJournalofAnalysisLaboratory2005-9所用试剂为分析纯;水为去离子石英重蒸水。1.2缓冲溶液和样品溶液的配制硼酸,硼砂各配成0.1mo
7、lPL溶液;四乙烯五胺配成体积分数2%水溶液备用。实验时,按比例各取适量以配得不同浓度电泳运行缓冲液。氯霉素标准品配成200mgPL储备液。1.3实验方法[6]连接好毛细管电泳仪和检测装置,毛细管柱在使用前依次用0.1molPLNaOH溶液,蒸馏水和运行液各冲洗约5min。更换运行液后也需按上述步骤清洗毛细管。检测电极用超声波进行冲洗。图1四乙烯五胺浓度对氯霉素迁移时间的影响采用电动进样方式,进样电压-9.0kV,进样时间5Fig.1EffectoftheconcentrionofTEPAonthe
8、migrationtimeofchloramphenicols,分离电压-15.0kV。实验在室温(25℃),湿度电泳运行缓冲溶液:6mmolPLH3BO3+2mmolPL硼砂+<75%的条件下进行。0102%四乙烯五胺,分离电压:-15kV,电动进样:-9kV2结果与讨论×5s,电导检测2.1电渗流抑制剂的选择采用未涂层毛细管为分离通道,负高压分离,2.3进样方式阳极端检测。由于电渗的方向与阴离子的电泳方比较重力进样和电动进样两种方式,电动进样向相反,且常大于阴离子
