邯郸市2009~2011年手足口病流行特征及肠道病毒71型vp1区基因特征分析

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1、河北医科大学硕士学位论文邯郸市2009～2011年手足口病流行特征及肠道病毒71型VP1区基因特征分析姓名：李建坡申请学位级别：硕士专业：流行病与卫生统计学指导教师：朱会宾201203中文摘要邯郸市2009-2011年手足口病流行特征及肠道病毒7l型VPI区基因特征分析摘要目的；1通过对邯郸市2009-2011年手足I：I病(HFMD)的流行病学特征的分析，明确HFMD的流行规律，为HFMD的预防控制措施和策略的制定提供科学依据。2明确邯郸市2009-2011年EV71流行株的基因型别及其与其他地区EV71流行株的关系，探索其基因型的遗传变异情况。方法：l

2、通过中国疾病监测信息系统，收集2009～2011年邯郸市报告的HFMD病例信息，通过SPSSl3．0分析比较三年中HFMD病例的三间分布。2采集HFMD病例的临床标本，针对肠道病毒(EV)5’端非编码区保守基因序列以及EV71VPl区基因序列设计EV通用引物、EV71型和CoxAl6型特异引物，．进行荧光定量PCR检测。3将检测为EV71阳性的HFMD实验室诊断病例标本分年度按采集时间编号，随机抽取接种RD细胞进行病毒分离培养。4设计并合成针对EV71型VPl基因片段的引物，对经检测EV71核酸阳性的培养物进行RT-PCR扩增，并测定其序列，用DNASTA

3、R软件进行核苷酸和氨基酸序列同源性分析，构建系统进化树，对邯郸市2009,-,2011年EV7l流行株基因亚型进行分析。结果：1流行强度。2009～2011年邯郸市HFMD发病率为218．01／10万、122．54／10万，和34．90／10万呈连续下降趋势。2时间分布。2009年HFMD疫情发生时间早且上升快，来势猛，下降快，无拖尾；2010年HFMD疫情上升比2009年延后两周，疫情上升趋势缓慢，达高峰后，与2009年流行曲线重合略低，下降缓慢，32周后高于2009年同期水平，有明显的拖尾现象；2011年有两个发病高峰，一个在春末夏初，与前两年高峰基本

4、一致，另一个出现在冬季，有冬季小高峰或翘尾现象。中文摘要3地区分布2009～2011年邯郸市19个县市、区)均有病例报告，但发病率区域间差异很大，且高发和低发县区相对固定。三年中发病率均较低的县区有峰峰矿区、邱县和魏县，发病率均较高的是邯山区、邯郸县和曲周县。4人群分布2009～2011年邯郸市HFMD男女性别比例在1．67～1．73之间，男性病例多于女性病例(P

5、中的趋势；散居儿童发病构成呈上升趋势，而幼托儿童和学生里下降趋势。5病原学检测结果2009--,2011年共检测1267例HFMD标本，阳性896例，阳性率为70．72％。阳性标本中，EV71、CoxAl6和其他肠道病毒的构成分别为65．51％、15．63％和18．86％。EV71、CoxAl6和其它肠道病毒在各年的构成比例不一致(X2=106．063，P<0．00I)，但均以EV71为主。6EV71的VPl区基因特征分析邯郸市13株EV7l代表株之间VPl区核苷酸同源性在96．4％-,-100％之间，与台湾分离株VPl区同源性为92．4％-93．2％，与

6、2008年阜阳、2009年河南、2010年河北、2010年云南和2011年陕西分离的EV71代表株核苷酸同源性在96．6％-099．1％之间，与A、B基因型代表株VPI区同源性差异较大，在82．0％～82．7％与83．6％-84．5％之间。已知基因型C1、C2、C3、C4代表株的同源性分别在89．8％-．90．3％、89．3％-90．O％、87．9％---88．7％和96．0％-96．9％之间。基于VPl区构建的EV71系统进化树显示，这13株邯郸市分离到的EV71毒株均为C4a亚型。结论：1邯郸市2008-2010年连续三年HFMD呈高流行状态，2009

7、年为发病高峰年，2011年转入低流行状态。HFMD发病具有区域特征。2不同年份HFMD流行曲线有所不同，2009年和2010年春夏高峰明显。2009年HFMD疫情上升迅猛，下降快，无拖尾现象；2010年疫情上升平缓，下降缓慢，有拖尾现象；2011年呈现两个发病小高峰，一个在春末夏初，一个在冬季。中文摘要3HFMD发病男性儿童高于女性儿童，以3岁以下散居儿童为主，发病年龄近年有向低年龄集中的趋势。4邯郸市2009---2011年HFMD的病原谱构成不同，CoxAl6和EV71及其它型别致HFMD肠道病毒交替变化，但仍主要以EV71为主。5EV71毒株VPl基

8、因分型及系统进化树分析表明，邯郸市2009---2011年EV71