罗汉果甜苷干预棕榈酸致胰岛β细胞氧化应激相关损伤的机制初探

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1、分类号R363.1+3学校代码10601密级公开编号Y0901012硕士学位论文罗汉果甜苷干预棕榈酸致胰岛β细胞氧化应激相关损伤的机制初探学科专业:病理学与病理生理学研究方向:糖尿病病理生理学研究生姓名:陈善源学号:0901012学位类型科学学位导师姓名:徐勤教授二O一二年四月独创声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含未获得（（注：如没有其他需要特别声明的，

2、本栏可空）或其他教育机构的学位或证书使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：签字日期：年月日-------------------------------------------------------------学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解桂林医学院有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权桂林医学院可以将学位论文的全部或部分内容编入有关

3、数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同时授权中国学术期刊（光盘版）电子杂志社、中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到《中国优秀博硕士学位论文全文数据库》、《中国学位论文全文数据库》，并通过网络向社会公众提供信息服务。（保密的学位论文在解密后适用本授权书）学位论文作者签名：导师签字：签字日期：年月日签字日期：年月日目录罗汉果甜苷干预棕榈酸致胰岛β细胞氧化应激相关损伤的机制初探……1中文摘要………………………………………………………………………1ABSTRACT…

4、…………………………………………………………………3英汉缩略词对照表……………………………………………………………5前言……………………………………………………………………………61材料与方法…………………………………………………………………81.2实验材料与仪器…………………………………………………………101.2实验方法…………………………………………………………………122实验结果……………………………………………………………………172.1NIT-1小鼠胰岛β细胞瘤培养………………………

5、……………………172.2罗汉果甜苷对高脂环境中β细胞内活性氧自由基浓度的影响………172.3罗汉果甜苷对高脂环境中β细胞糖代谢关键基因表达水平的影响…202.4罗汉果甜苷对NIT-1细胞群落凋亡率的影响……………………………223讨论…………………………………………………………………………243.1游离脂肪酸致胰岛β细胞氧化应激损伤细胞模型的建立……………243.2罗汉果甜苷的抗氧化作用对NIT-1细胞内活性氧自由基含量和调亡的影响……253.3罗汉果甜苷对糖代谢相关重要基因表达水平的影响……

6、……………263.4罗汉果甜苷对NIT-1细胞的作用总结和讨论……………………………264结论…………………………………………………………………………28参考文献………………………………………………………………………29综述……………………………………………………………………………32攻读学位期间发表的学术论文目录…………………………………………46致谢……………………………………………………………………………47罗汉果甜苷干预棕榈酸致胰岛β细胞氧化应激相关损伤的机制初探中文摘要目的：胰岛β细胞

7、氧化应激损伤是2型糖尿病发病机制中的重要一环。胰岛素抵抗导致内环境自由脂肪酸和甘油三酯等脂类物质增加，高于生理水平的自由脂肪酸通过多种代谢途径导致胰岛β细胞内活性氧自由基含量增加和氧化应激，激活细胞内与氧化应激相关的信号转导途径，削弱胰岛β细胞的葡萄糖代谢和胰岛素分泌能力，最终导致胰岛β细胞的死亡。本研究通过使用棕榈酸处理NIT-1胰岛素分泌细胞，制作高脂环境中胰岛β细胞氧化应激损伤细胞模型，使用在动物实验中已证明对糖尿病动物模型有控制血糖和抗氧化作用的罗汉果甜苷对棕榈酸造成的损伤效应进行干预，

8、初步探讨罗汉果甜苷干预棕榈酸致胰岛β细胞氧化应激相关损伤的作用与机制。方法：以小鼠胰岛瘤传代细胞系NIT-1作为研究胰岛β细胞氧化应激相关损伤的细胞模型，设空白对照组、罗汉果甜苷对照组、棕榈酸处理组和罗汉果甜苷干预组，使用流式细胞术测定细胞内活性氧自由基含量和细胞凋亡率，半定量逆转录PCR测定葡萄糖转运受体-2和丙酮酸激酶编码基因表达水平。结果：和棕榈酸处理组比较，罗汉果甜苷可显著降低NIT-1细胞内活性氧自由基含量，提高葡萄糖转运受体-2和丙酮酸激酶编码基因的表达水平（P均<0.05），但对棕