绵羊肺炎支原体内蒙古地方株的分离鉴定及交叉反应性的测定

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1、分类号S852.62学校代码10129UDC636学号2009201101绵羊肺炎支原体内蒙古地方株的分离鉴定及交叉反应性的测定IsolationandidentificationofMycoplasmaovipneumoniaeInnerMongolialocalstrainandcrossreactivitymeasurement申请人：孙喜安学科门类：农学学科专业：临床兽医学研究方向：家畜内科学指导教师：韩敏教授论文提交日期：二〇一二年六月摘要从病羊病变肺组织中分离到支原体后，利用支原体液体培养基和支原体固体培养基及0.45μm微孔滤器对其进行纯化以得到纯培养物。对分离纯化的支

2、原体分离株进行瑞士染色和常规负染色后置于显微镜下观察支原体支原体形态；将支原体分离株、绵羊肺炎支原体标准株Y98和丝状支原体山羊亚种标准株PG3接种于固体培养基培养，当出现菌落后置于显微镜下观察其菌落形态，同时对支原体分离株菌落进行Dienes染色以观察染色结果；通过分解葡萄糖试验、分解麦芽糖试验、分解尿素试验、分解精氨酸试验、亚甲蓝着色试验、胆固醇需要试验、氯化四氮唑还原试验、红细胞吸附试验和溶血试验9个生化试验鉴定支原体分离株；利用Y98标准阳/阴性血清与PG3标准阳/阴性血清进行生长抑制试验和代谢抑制试验，以确定支原体分离株的种属；测定绵羊肺炎支原体病临床治疗时常用药物的MIC

3、值和MBC值，以便于为临床治疗绵羊传染性胸膜肺炎选择最佳药物和为联合用药的研究提供依据；将经过鞣酸和戊二醛处理的绵羊红细胞致敏绵羊肺炎支原体分离株抗原，以制备成试验用抗原，与通过攻毒获取的几种血清进行间接血凝试验来以检测其交叉反应性。结果显示：通过对分离株的瑞士染色结果和Dienes染色结果观察、分离株菌落形态与Y98及PG3的对比，确定支原体分离株为绵羊肺炎支原体；支原体分离株的生化鉴定结果与Y98一致；生长抑制试验和代谢抑制试验表明支原体分离株与Y98同种；药敏试验显示，环丙沙星、泰妙菌素、氟苯尼考和阿奇霉素最适于绵羊肺炎支原体病的临床治疗；交叉反应表明，绵羊肺炎支原体分离株同无

4、乳支原体等检测的菌种均无交叉反应性。关键词：绵羊肺炎支原体分离株；分离和鉴定；药敏试验；交叉反应性IsolationandidentificationofMycoplasmaovipneumoniaeInnerMongolialocalstrainandcrossreactivitymeasurementAbstractAftertheMycoplasmapneumoniaewasseparatedfromthelesionslungtissueofdiseasesheep，usingmycoplasmaliquidmediumandmycoplasmasolidculturemed

5、iumand0.45μmmicroporousfilterthepurificationtogetpuretrainingcontent.SwissdyeingandconventionalnegativedyeingtheMycoplasmaisolatestoobservethethallusofMycoplasmaisolatesundermicroscope.WilltheMycoplasmaisolatesandthestandardofMycoplasmaovineumoniaeandthestandardstrainsofMycoplasmamycoidessubsp.

6、caprivaccinationinsolidculturemediumandthenobservethecolonymorphologywhencoloniesappearonsolidculturemedium.AtthesametimeforDienesdyeingtoobservethecolonydyeingresults.thistestthroughninebiochemicalidentificationtestformycoplasmaisolatesidentification，includedecompositionofglucosetestanddecompo

7、sitionofmaltosetestanddecompositionofureatestanddecompositionofargininetestandmethylenebluestainingtestandcholesterolneedtestandchlorinatedtetrazoliumreductiontestanderythrocyteadsorptiontestandhemolysistest.thistestusethestandard