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1、华北农学报·2008,23(增刊):2892291绵羊肺炎支原体的分离与鉴定1211付 琦,赵宝华,朱子杰,孙继国(1.河北农业大学动物科技学院,河北保定 071000;2.河北师范大学生命科学学院,河北石家庄 050010) 摘要:对疑似为患有绵羊肺炎支原体的刚死病羊无菌采取病料,经直接培养与间接培养后分离到可疑绵羊肺炎支原体。然后对培养生长的支原体分别进行形态学观察、各种生化试验、血清学试验以及药物敏感性试验,最后确诊为绵羊支原体肺炎,并分离得到绵羊肺炎支原体。关键词:绵羊肺炎支原体;分离;鉴定中图分类号:S858.26文献标识码:A 文章编号:1000-7091(2008)增刊
2、-0289-03IsolationandIdentificationofMycoplasmaOvipneumonia1211FUQi,ZHAOBao2hua,ZHUZi2jie,SUNJi2guo(1.TheCollegeofAnimalScienceandTechnologyofAgriculturalUniversityofHebei,Baoding071000,China;2.TheCollegeofLifeScienceofHebeiNormalUniversity,Shijiazhuang050010,China)Abstract:Intheenvironmentwhereha
3、venogerm,pathologicalmaterialwascollectedfromthesheepmaybediedinMycoplasmaOvipneumonia(MO).Thepathogenywasisolatedfromthesheepofseveresymptomsanddevelopedindi2rectmethodandindirectmethod.Thentheculturewasresearchedbyserology,susceptivityofmedication,conformationandvariousbiochemistry.Alltheresult
4、swerepositiveandshowedthepathogenywasMO.Themorphology,characteris2ticsandpropertyoftheMOweregeneralized.Keywords:Mycoplasmaovinpneumoniae;Isolation;Identificatio 绵羊支原体肺炎,又称绵羊传染性胸膜肺炎,是将研磨好的乳剂进行离心并取上清过滤除菌后由绵羊肺炎支原体(Mycoplasmaovipneumoniae,MO)进行以下培养。引起的一种以咳嗽、喘气、渐进性消瘦以及肺间质的直接培养:取100μL乳化液直接接种于改良的增生性炎症
5、为特征的慢性呼吸道传染病。在河北石Hayflick固体培养基上,置37℃密闭罐中培养;间接家庄地区近年来出现这种疾病,患羊临床上主要表培养:取0.2mL乳化液接种于含有415mL改良的-10现为咳嗽、流鼻汁、消瘦、贫血、生长发育迟缓,病程Hayflick液体培养基中,以10倍递减稀释到10置可达数月至数年,致使出栏率、毛质、毛量下降,并造37℃培养,每隔48h盲传1代,每代在接种液体培养成饲料和人力的大量浪费。从石家庄某羊场疑似该基的同时,也接种固体培养基,培养3～5d后在低病病羊分离到一株分离物,本研究通过初步鉴定认倍镜下每天观察有无菌落生长。将有支原休生长的为是绵羊肺炎支原体。液体培
6、养物立即进行冻干保存。1.3 高免血清的制备1 材料和方法免疫共分4次:第1次,每兔分多点皮内注射弗1.1 病料的采集与处理氏完全佐剂抗原,总量115mL;第2次,相隔7d,注用无菌方法采集疑似该病的刚死病羊的肺脏及射方法、剂量同前;第3次,与第2次相隔7天,每兔肺门淋巴结,将采集的病料剪成小米粒大小,然后按多点皮下和肌肉注射弗氏不完全佐剂抗原,总量31∶10加入液体培养基,无菌研磨成乳剂。mL;第4次,与前次相隔15d,每兔静脉注射浓缩抗1.2 分离培养原115mL。于最后一次注射后14d测试血清效价收稿日期:2008-01-07基金项目:河北省自然基金项目(2006000507)作者
7、简介:付 琦(1981-),女,河北石家庄人,在读硕士,主要从事动物医学预防兽医学相关研究。通讯作者:孙继国(1956-),男,河北保定人,教授,主要从事动物医学预防兽医学研究工作。290华 北 农 学 报23卷合格后,采血,分离血清,置-20℃冰箱保存备用。1.5.7 菌落吸附红细胞试验 在生长菌落的固体1.4 形态学观察培养基表面,加入2mL0125%鸡红细胞生理盐水悬1.4.1 菌体形态特征观察 取1mL生长旺盛的菌液,室温作
