红鳍东方鲀国内主要养殖区养殖群体遗传多样性研究及与性别相关微卫星标记筛选

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1、学校代码：10264研究生学号：M090101105上海海洋大学硕士学位论文红鳍东方鲀国内主要养殖区养殖群题目：体遗传多样性研究及与性别相关微卫星标记筛选PolymorphismsanalyzingofthemainfarmingregionsofTakifugurubripes英文题目：andisolationofgender‐specificmicrosatellitemarkers专业：水产养殖研究方向：海水鱼类遗传改良研究姓名：陆丽君指导教师：马爱军研究员二0一二年四月六日红鳍东方鲀国内主要养殖区

2、养殖群体遗传多样性研究及与性别相关微卫星标记筛选学位论文完成日期：指导教师签字：答辩委员会成员签字：上海海洋大学学位论文原创性声明本人郑重声明：我恪守学术道德，崇尚严谨学风。所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经明确注明和引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品及成果的内容。论文为本人亲自撰写，我对所写的内容负责，并完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名：日期：年月日上海海洋大学学位论文版权使用授权书学位论文作者完全了解学

3、校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅或借阅。本人授权上海海洋大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。保密□，在年解密后适用本版权书。本学位论文属于不保密□学位论文作者签名：指导教师签名：日期：年月日日期：年月日红鳍东方鲀国内主要养殖区养殖群体遗传多样性研究及与性别相关微卫星标记筛选摘要红鳍东方鲀（Takifugurubripes）是目前我国海水养殖鱼类的主导优良

4、鱼种之一，具有较高营养价值和经济价值。近年来，养殖群体红鳍东方鲀种质存在退化现象，遗传改良工作迫在眉睫。本研究首先对东方鲀属主要经济鱼种繁育养殖、育种和基因研究现状，东方鲀属鱼类分子标记及基因研究现状，河鲀毒素相关研究进展作了概述。其次，本研究对主要养殖区域的红鳍东方鲀群体进行遗传多样性研究，对国内主要养殖区域红鳍东方鲀种质资源状况进行初步了解，为开展选择育种，培育高产、优质的红鳍东方鲀新品种提供了基础。另外，本研究开展了红鳍东方鲀性别相关微卫星标记的筛选，为研究红鳍东方鲀性别控制技术及全雄培育研究奠定了

5、基础。本研究获得的主要结果如下：为了对中国国内主要养殖区养殖红鳍东方鲀资源进行调查，以确定目前的资源状况，本研究采用微卫星标记分析技术，选用20对微卫星引物，对国内来自不同养殖区的5个群体（文登群体：WD；莱州群体：LZ；2009年日本群体：J1；2011年日本群体：J2；唐海亲鱼群体：THQ）红鳍东方鲀种群进行遗传多样性分析。实验结果显示，12对引物具有多态性。结果表明，五个群体的等位基因数为2~8个不等；平均观测杂合度分别为0.27、0.26、0.18、0.25、0.20；平均期望杂合度分别为0.55

6、、0.57、0.69、0.71、0.62；平均多态信息含量排列顺序为J2(0.65)＞J1(0.63)＞THQ(0.55)＞LZ(0.51)＞WD(0.48)。分析结果表明，(1)WD和LZ群体间遗传距离最小，为0.2336；LZ与J1群体间遗传距离大，为0.6242。(2)WD群体遗传多样性为中度多态(0.25＜PIC＜0.5)，LZ、J1、J2以及THQ群体遗传多样性均为高度多态(PIC≥0.5)。分析结果表明目前国内主要养殖区域红鳍东方鲀具有较高的遗传多样性，有较好的遗传改良潜力。另外，本文对红鳍东

7、方鲀70对微卫星引物的多态性进行了筛选，筛选得到有稳定扩增产物的引物62对，比率为88.6%。同时，筛选得到44对具有多态性的引物，比率为62.8%。利用62对具有稳定扩增产物的引物，筛选红鳍东方鲀与性别相关的微卫星标记。采用SSR结合BSA技术对红鳍东方鲀雌雄群体进行性别差异标记的筛选。构建雌雄基因池（各22个个体），用合成的70对微卫星引物对基因池进行扫描，统计结果得出4对引物(Fms42、70、89、134)在雌雄基因池间扩增出差异条带。用构建基因池的44个雌雄个体对4对引物进行单个个体检验，结果发

8、现，4对引物在雌雄个体中的扩增没有明显差异性。利用雌雄各22个个体检测70对微卫星引物的多态性，共获得44对具有多态性的引物，比率为62.8%。对雌雄群体进行多样性分析，结果表明，雌雄两个群体PIC多态信息含量分别为0.56、0.61，均呈现高度多态（PIC≥0.5），说明两个群体的遗传多样性较高，有较好的遗传潜力。关键词红鳍东方鲀，微卫星标记，遗传多样性，分离群体分析法，性别差异研究生期间其他研究工作：云纹石斑鱼早期发育阶段