环境胁迫对欧洲花楸悬浮细胞生物量及次生代谢产物积累的影响

《环境胁迫对欧洲花楸悬浮细胞生物量及次生代谢产物积累的影响》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、中国中医科学院硕士学位论文环境胁迫对欧洲花楸悬浮细胞生物量及次生代谢产物积累的影响姓名：肖文娟申请学位级别：硕士专业：中药学指导教师：郭兰萍20120526中国中医科学院二00九级硕士研究生学位论文中文摘要药用植物次生代谢产物的合成受到各种环境因子的调控，有研究表明环境胁迫能促进次生代谢产物的积累。但是，植物本身是一个复杂的系统，存在多种环境反应或调控机制，所以用植株进行次生代谢产物研究存在一定困难。药用植物的细胞培养在一定程度上解决了这个问题，起到了降阶降维的作用。欧洲花楸悬浮细胞因其生长迅速、反

2、应灵敏，常用于研究联苯类次生代谢产物。本课题以欧洲花楸SorbusaucupariaL．的悬浮细胞为研究对象，通过测定细胞生物量及次生代谢产物的变化趋势，就非生物诱导子重金属及生物诱导子酵母提取物对欧洲花楸悬浮细胞的影响进行研究。主要研究内容包括：1、欧洲花楸悬浮细胞生长曲线培养研究2、非生物诱导子重金属对欧洲花楸悬浮细胞生物量及次生代谢产物合成和积累的影响研究3、生物诱导子酵母提取物对欧洲花楸悬浮细胞的影响研究4、复合诱导子重金属及酵母提取物对欧洲花楸悬浮细胞的影响研究结果：1、本实验测定了欧洲花

3、楸悬浮细胞在正常培养条件下的生长20d的生长周期及细胞悬浮液的pH值，确定了欧洲花楸悬浮细胞的生长周期。欧洲花楸悬浮细胞在培养至14d时，细胞鲜重达到最大值，在培养的1．5d内，细胞处于延滞生长期；5．14d内，细胞处于指数生长期；14．20d内，细胞处于生长平台期。在正常培养条件下，细胞悬浮液的pH值的变化趋势是越来越大。利用细胞的鲜重和干重分别对欧洲花楸悬浮细胞的进行生长曲线的拟合，结果表明Logistic函数的R2值最大，为0．969，表明该函数拟合度很高，能够描述欧洲花楸悬浮细胞生长曲线的变

4、化。拟合得到的函数是f(x)=5．044／(1+23．34*exp(-0．3887木x))。对该函数求一阶及二阶导数，得到了欧洲花楸悬浮细胞在8d时，细胞的生长速率最大；在5d时，生长加速度最大。细胞生长至第5d时，是细胞指数生长的前期，在此时期可对细胞进行诱导子处理。2、用重金属来诱导欧洲花楸悬浮细胞，考察细胞在处理后生物量及次生代谢产物的变化情况。结果表明，镧、铜、铅诱导子对细胞生物量都有不同程度的影响。当镧诱导子浓度在1甥几一10mg／L之问时，对细胞生物量表现为刺激作用，6环境胁迫对欧洲花楸

5、悬浮细胞生物量及次生代谢产物积累的影响刺激作用的大小呈现出中间浓度高，两端浓度低的变化趋势，镧对细胞生物量刺激作用最大的浓度为10嵋几口

6、量表现为刺激作用(P

7、性蛋白质含量高于对照组，在诱导时间<96h时，其含量是对照的50％，当诱导时间>96h时，其含量是对照的144％(P<0．05)。4、在镧+YE的复合诱导子处理下，镧诱导子的低浓度和高浓度对细胞总生物量是有增加的刺激作用，浓度为O．1岭几、20mg／L的镧和10mg／L的铜对Ⅶ诱导子对细胞生物量的抑制有拮抗作用。镧+YE、铜+YE、铅+YE影响联苯类物质的方式和程度与的浓度密切相关，其影响方式为：刺激或抑制次生代谢物的合成含量；使处理细胞合成某种化合物的最大值显著高于YE单独诱导；提前在YE诱导时合

8、成某一化合物的峰值时间。其中，铜+YE处理细胞内化合物合成的浓度表现出和铜诱导子浓度相关，随着铜浓度升高而升高或下降，这种相关且和诱导时间有关；铅+YE处理细胞内化合物合成的浓度表现出和铅诱导子浓度相关，其中是呈现出V字形变化趋势，最低点是YE+O．5mg／L；另外是随着铅浓度增大，化合物的浓度也随之增大。结论：1、通过对欧洲花楸悬浮细胞生长特性的研究，得到了欧洲花楸悬浮细胞的生长函数符合logistic曲线，该函数为f(x)=5．044／(1+23．34术exp(一