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时间:2018-11-18
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1、茉莉酸甲酯胁迫处理对薄荷次生代谢产物的影响论文朱金荣,黄宝康,吴锦忠,秦路平【摘要】目的研究用胁迫激素茉莉酸甲酯(MJ)喷施薄荷后,其用药组与对照组之间次生代谢产物中各成分相对含量的变化。方法用固相微萃取技术提取样品,后用气-质联用方法(GC-MS)测定各样品化学成分及其相对含量。喷施MJ后,薄荷单体成分相对含量随MJ浓度未能出现规律性变化,但相同类型组成的相对含量出现规律性变化;另外,喷施MJ后.freeloneMJ.MethodsThesecondpoundsfromM.haplocalyxicro-extraction(SPME)andtherelativeco
2、ntentsinedbygaschromatography-massspectrometry(GC-MS).ResultsTherelativecontentinM.haplocalyxdidnothaveregularchangeeclassontheconstituenthadregularchange.Besides,accordingtotherelativecontent,theresultsshoostofmonoterpeneisomerinM.haplocalyxmighttransformtoeachotheraftersprayingostpone
3、ntsinM.haplocalyxhaschangedaftersprayingpliesthatthepositionsandtherelativecontentofthesecondpoundsinM.haplocalyxmaybechangebysprayingonate;Secondarymetabolite薄荷为唇形科植物薄荷MenthahaplocalyxBriq.的干燥地上部分,《中国药典》有收载,是一味常用解表中药,具有宣散风热、清利头目、透疹等功能,多用于风热感冒、风温初起、头痛、目赤、喉痹、口疮、风疹、麻疹、胸胁胀闷[1]治疗。现代药理研究发现薄荷
4、具有多种药理活性,如利胆作用,抗早孕、抗着床作用,祛痰作用,促透作用,对平滑肌的作用,抗炎镇痛作用以及抗病原体等作用[2]。茉莉酸类(JAs)广泛存在于自然界,是许多植物体内产生的天然化合物,现已发现了三十多种。茉莉酸(jasmonicacid,JA)和茉莉酸甲酯(methyljasmonate,MJ)是其中最重要的代表。其中JA是植物体内最丰富的形式,而MJ挥发性好且不被离子化,易透过细胞膜,因而MJ形式在外源施用时活性较强,是首选的形式。研究发现微量JAs在代谢过程中发挥作用,并且由于浓度不同,JAs可起诱导、促进或抑制作用,与其它植物激素所起作用的特征相似。因此
5、,有关JAs作为内源信号分子参与生物因子(如昆虫、真菌激发子等)防御和非生物因子(如干旱、渗透胁迫、低温等)胁迫逆境应答的信号传递研究进展很快[3~4]。根MJ能诱导或抑制植物次生代谢产物积累,本文考察对药用植物薄荷进行MJ喷雾处理后,薄荷次生代谢产物相对含量变化的影响。1材料和方法1.1试材与仪器薄荷为第二军医大学药用植物园栽培种。气-质联用分析仪为美国ThenmoFocusDSQ气相色谱-质谱联用仪。MJ购于Sigma公司(美国);所用试剂均为分析纯。1.2MJ处理分别用浓度为0.412mg/L(C1)和4.12mg/L(C2)的MJ喷雾处理薄荷,同时设对照组(喷
6、清水),于喷施MJ10d后分别取植物叶片进行分析。1.3样品处理及测定条件1.3.1固相微萃取(SPME)方法称取5g样品于15ml顶空瓶中,加热到20℃,顶空固相微萃取(75μmCAR/PDMS萃取头)20min后,进样口脱附3min进样分析。1.3.2气相色谱分析条件VF-5MS石英毛细管色谱柱(30mm×0.25mm,0.25μm);进样口温度250℃;高纯氦气作载气,载气流速为1.0ml/min;分流比为15∶1;色谱柱程序升温条件:初始温度50℃,保持2min后,以10℃/min的速率升温至250℃并保持10min。1.3.3质谱分析条件电离方式为EI;电离
7、能量70eV;电离源温度200℃;传输线温度250℃;质量扫描范围29~450amu。获取的质谱数据用美国NIST标准谱库检索。2结果按上述GC-MS条件对薄荷进行分析,可以得其总离子流图(见图1)。对总离子流图中的各峰经质谱扫描后得质谱图,经过质谱计算机数据系统检索,人工谱图解析,并查对有关质谱资料,从基峰、相对度等几个方面进行直观比较,综合各项分析鉴定,可确定出各薄荷样品中的主要化学成分,将其进行归纳可知喷施MJ后其成分的相对含量变化(见表1)。表1喷施MJ对薄荷各成分相对含量的变化比较(略)3讨论由表1可见,喷施MJ后,薄荷单体成分相对含量随M
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