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时间:2019-02-16
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1、湖北中医药大学硕士学位论文健脾理肺方对哮喘大鼠的免疫调节作用姓名:刘金环申请学位级别:硕士专业:中西医结合临床指导教师:向希雄20120523中文摘要目的:支气管哮喘是一种慢性气道炎症性疾病,目前认为气道炎症、气道高反应性、气道重构、Thl/Th2失衡等在支气管哮喘的发病机制中起着重要作用。健脾理肺方为中医大师倪珠英治疗小儿哮喘缓解期的经验方,有健脾益气调肺之功。本课题采用卵蛋白(OVA)诱导建立SD大鼠哮喘模型进行实验研究,通过ELISA和Real-time.PCR实验技术,观察健脾理肺方对哮喘
2、大鼠血清IgE、ICAM.1、VCAM.1、IFN-Y、IL-4和肺组织IL.5mRNA、GR-13mRNA的影响,以评价健脾理肺方对哮喘大鼠气道炎症、气道高反应性、气道重构及Thl/Th2失衡的影响,探讨健脾理肺方防治支气管哮喘的作用机制,为提高健脾理肺方治疗小儿哮喘的临床疗效提供依据,为中医药治疗小儿支气管哮喘提供可靠的实验和理论依据。方法:将50只大鼠按体重随机分为五组,每组10只,A组为正常对照组(即空白组);B组为哮喘模型组(即模型组);C组为中成药玉屏风散对照组(即玉屏风组);D组为西
3、药地塞米松对照组(即激素组);E组为中药健脾理肺方治疗组(即治疗组)。哮喘大鼠动物模型的建立采用卵蛋白致敏激发法。指标:主要通过ELISA试剂盒测定实验大鼠血清IgE、ICAM.1、VCAM.1、IFNmY和IL.4的含量,通过实时定量一聚合酶链式反应(Real.time.PCPO检测实验大鼠肺组织IL.5mRNA、GR-13mRNA的表达水平,观察大鼠肺组织病理形态学方面的改变。结果:1.对哮喘大鼠血清IgE的影响模型组-9空白组比较,]gE水平明显增高,统计学有显著差别(P<0.01);治疗组
4、和地塞米松组IgE水平-9模型组相比明显降低,差别有显著意义(P<0.01),与玉屏风组相比亦有显著差异(P<0.01);治疗组与地塞米松组相比无显著差异(p=-o.58)。2.对哮喘大鼠血清IL-4和I脚的调节作用模型组的IL.4较空白组明显增高,而IFN吖明显降低,差异有显著意义(P<0.05);与模型组相比,治疗组和地塞米松组的几.4水平明显降低、IFN吖水平明显升高,有显著差别(P<0.05);治疗组与地塞米松组比较几.4和IFN吖的平均值均相差不大,无显著差异(P--0.63,P--0.
5、26);治疗组与玉屏风组相比,IL.4明显偏低,IFN-q,明显偏高,且差别有显著意义(P<0.05)。3.对哮喘大鼠血清ICAM.1和VCAM.1的影响模型组与空白组相比大鼠血清ICAM一1和VCAM—l的水平明显增高,差异有显著意义(P<0.05);与模型组相比,治疗组、地塞米松组和玉屏风组的ICAM.1和VCAM.1水平明显降低,有显著差别(P<0.05);治疗组与地米组相比无显著差异(P=-0.28,P=-0.87);治疗组与玉屏风组相比,ICAM.1和VCAM.1的水平明显偏低,差别有显
6、著意义(P<0.05)。4.对哮喘大鼠肺组织IL一5mRNA的影响模型组大鼠肺组织的IL.5mRNA较空白组明显增高,差异有显著意义(P<0.05);与模型组相比,治疗组和地塞米松组的IL.5mRNA水平明显降低,有显著差别(P<0.05);治疗组的IL.5mRNA表达水平较地塞米松组更低,差别有显著意义(P<0.05);治疗组与玉屏风组相比,IL一5mRNA偏低,但差别无显著意义(P=0.46)。5.对哮喘大鼠肺组织GR.IjmRNA的影响模型组的GR—13mRNA较空白组明显降低,差异有显著意
7、义(P<0.05);与模型组相比,治疗组的GR-13mRNA水平明显升高,有显著差别(P<0.05);与地塞米松组、玉屏风组相比,治疗组GR-flmRNA表达水平更高,差别有统计学意义(P<0.05).6.对哮喘大鼠肺组织病理形态的改变经健脾理肺方干预的哮喘大鼠肺组织病理形态图与模型组相比,气管管壁结构逐渐恢复,炎症减轻,水肿明显消失,管腔炎性渗出物明显减少,n黏膜上皮逐渐修复,豁膜下层水肿明显减轻,管腔基本恢复正常。结论:1.采取卵蛋白致敏激发法可以成功建立哮喘大鼠模型。2.健脾理肺方可能有调节
8、哮喘大鼠Thl/Th2平衡的作用,同时可以缓解气道炎症、抑制嗜酸性粒细胞的聚集,并可抑制气道高反应性及气道重构,还可以促进GR与糖皮质激素结合的能力。关键词:支气管哮喘;缓解期;健脾理肺方IIISpeciaIity:IntheWesterncombinationofPediatriCSAuthor:LiuJinhuanTutor:Prpfessor.XiangXiXiongTheImmunoreguIationofAsthmaRatwithLifeiJianpiRecipeAbst
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