茶叶下脚料中表没食子儿茶素没食子酸酯分离纯化工艺研究

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1、湖北中医药大学硕士学位论文茶叶下脚料中表没食子儿茶素没食子酸酯分离纯化工艺研究姓名：黄思勇申请学位级别：硕士专业：中药学指导教师：干国平20120527中文摘要茶为山茶科植物茶(Camelliasinensis(L．)O．Ktze．var．sinensis)的干燥叶，始载于《神农本草经》，药用历史悠久。茶叶中有多种活性成分，其中酯型儿茶素表没食子儿茶素没食子酸酯(简称EGCG)具有抗癌、抗突变、抗肿瘤形成、抗炎症、抗病毒、清除自由基和抗氧化等作用而极具开发价值。恩施州近年来茶业产业发展迅速，在十二五期间将新建茶园20万亩，每年改造老茶园4万亩，建成高标准无性

2、系良种茶园100万亩。在茶园新建和改造过程中，会产生大量的茶叶下脚料，这些下脚料可以用来生产高纯度的EGCG。因此，本论文对恩施州产茶叶下脚料中EGC6的提取纯化工艺进行了研究。采用HPLC法建立茶叶下脚料中EGCG的含量以及EGCG产品的含量测定方法。色谱条件为：C18柱(250ram×4．6mm，5¨m)，流动相为乙腈一水一冰醋酸(14：84：2)，流速1．0ml·min～，检测波长276nm。结果，EGCG在1．66—8．30ug范围内线性关系良好，平均加样回收率为100．26％(RSD=I．41％)。方法简便，准确，重复性好，为原材料和产品的质量控制

3、提供了依据。以EGCG的浸出量为指标，采用溶剂热浸法对茶叶下脚料中EGCG的提取工艺条件进行研究。在单因素实验的基础上，采用L，(34)正交实验法优选了提取工艺。结果表明，选定的提取工艺参数可靠，条件稳定。采用大孔吸附树脂色谱与凝胶色谱相结合的方法，对茶叶下脚料提取物中的EGCG进行了分离纯化。采用静态吸附和动态吸附相结合的方法对大孔树脂纯化工艺进行了研究，采用所研究的工艺条件，得到EGCG粗品的纯度达6o％；采用葡聚糖凝胶SephadexLH-20对得到的EGCG粗品进行了进一步纯化，以EGCG纯度和回收率为指标，在单因素实验的基础上，采用L，(34)正交

4、实验法优选了提取工艺，最佳纯化工艺条件为：采用径高比为1：20的凝胶树脂柱，以浓度为10％且含有2％冰醋酸的乙醇溶液以0．8ml·min。1洗脱。该工艺条件下，EGCG的纯度和回收率均达到95％以上。本研究所选工艺中，所用溶剂安全无毒，符合绿色化学的要求。该工艺具有安全无毒、操作简便、提取效率高，节省溶剂等特点，适合于大规模的工业生产。主题词：茶叶下脚料；表没食子儿茶素没食子酸酯；大孔吸附树脂；SephadexLH-20；纯化工艺StudyOREpigallocatechin-3一gaIateextractionand●一●●■一●purltIcat10np

5、rocessInteaheel8SpeciaIity：ChineseTraditionalMedicineAuthor：SiyongHuangTutor：GuopingGanABSTRACTTeaiSdryproductofthetenderleafofCamel1iaSinensiS．IthasalonghiStoryofmedicina1，theear1iestdocumentedwaScontainedin”ShenNon97SMateriaMedican．Teacontainsavarietyofbioactiresubstances，epigall

6、ocatechin一3一gal1ate(EGCG)oftheestercatechinhasgreatdevelopmentvalue，becauseitcanexhibitaseriesofpharmacologyfunctions，includinganti-cancer，anti-mutagenic，antitumorformation，anti—inflammatory，antiviraI，freeradicalscavengingandantioxidanteffects．TheteaindustrywiiIdeveloperapidlyinEns

7、hiautonomousprefectureinrecentyears．In12thFive-YearP1anperiod，twohundredthousandmusnewteagardenwi1lbebui1t，fortythousandmusoldteagardenwi1bereformedeveryyear，onehundredthousandmushighStandardsofclona1improvedvarletlosteagardenwil1bebui1t．Thatwi1lproducealargenumberofteaheelSinbuild

8、ingandthereformingteagarde