复方双苓止泻散对大鼠溃疡性结肠炎的治疗作用及对pept1表达的影响

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1、河北医科大学硕士学位论文复方双苓止泻散对大鼠溃疡性结肠炎的治疗作用及对PepT1表达的影响姓名：张晓静申请学位级别：硕士专业：人体解剖与组织胚胎学指导教师：李陈莉201203中文摘要复方双苓止泻散对大鼠溃疡性结肠炎的治疗作用及对PepTl表达的影响摘要溃疡性结肠炎(UC)，也称作非特异性溃疡性结肠炎，以慢性、复发性结肠粘膜炎症为特点，还没有明确的病因和有效的治疗措施直接阻断．UC的病生理过程。UC的临床特征包括黏液脓血便，血便，腹泻，腹痛，里急后重等。细胞因子，粘附分子，炎症介质，氧自由基等参与UC的发病。寡肽转运蛋白PepTl

2、属于肽转运蛋白家族(PTR)是生物体内细胞吸收二肽、三肽的必不可少的膜蛋白。正常情况下PepTl表达在近端小肠细胞纹状缘膜上，而结肠很少或几乎不表达。寡肽转运蛋白PepTl是质子依赖性的转运蛋白。小肽转运到细胞内，主要水解成游离氨基酸，并经门静脉入血。因此，PepTl在营养供需调节方面起到关键性作用。另外，PepTl还负责吸收和分配大量有药理学活性的重要化合物，包括13．内酰胺类抗生素，血管紧张素转化酶抑制剂，抗肿瘤和抗病毒药物。发现二肽、三肽转运蛋白PepTl在炎症结肠表达，但诱因和基本机制仍不清楚。目的：研究PepTl在葡聚

3、糖硫酸钠(DSS)诱导的大鼠结肠炎中的表达及病理学机制。观察纯中药制剂复方双苓止泻散的治疗机制，及在UC中抗炎，抑菌，调节免疫功能，治疗腹痛和腹泻的效果。方法：将SD大鼠随机分为9组，每组10只，包括正常对照组(Ngroup)、其它建立模型后，分为腹泻模型3天、6天组(3dDM，6dDMgroup)，分别自由饮水3天、6天；阴性对照3天、6天组(3dNC，6dNCgroup)，分别灌胃给予生理盐水3天、6天；复方双苓止泻散3天、6天组(3dD，6dDgroup)，分别灌胃给予复方双苓止泻散3天、6天，0．31g／kg，每天2次；

4、阳性对照3天、6天组(3dPC，6dPCgroup)，分别灌胃给予万鑫母仔快康3天、6天，O．31g／kg，每天2次。取末端结肠组织样本，HE染色观察病理改变。评价DAI和HI评分。用免疫组化和免疫印记技术检测PepTl的蛋白表达情况，RT-PCR技术检测PepTlmRNA表达水平，并比较分析不同组之间的差异。结果：模型组大鼠结肠病理改变接近人类UC病变。大鼠出现严重的中文摘要腹泻，甚至血便，黏液脓血便。一般状况低下，体重减轻。HE染色结果表明，结肠结构发生典型的炎症改变，像粘膜充血，结肠增厚，上皮缺失，腺体破坏，溃疡，腺窝扩大

5、，杯状细胞减少，以及大量巨噬细胞，淋巴细胞，浆细胞等炎症细胞浸润。给予复方双苓止泻散和万鑫母仔快康后能明显改善结肠炎症状。N，3dDM，6dDM，3dNC，6dNC，3dD，6dD，3dPC，6dPC各组DAI评分分别为0-J：0，3．734+0．263，3．635+0．191，3．702+0．189，3．568+0．164，2．297：￡-0．104，1．199士0．233，2．365+0．191，1．232+0．225。模型组DAI评分明显高于对照组(PO．

6、05)；D(3天、6天)组DAI评分明显降低，差异有统计学意义(PO．05)。6dD和6dPC组没有明显统计学差异(P>O．05)。N，3dDM，6dDM，3dNC，6dNC，3dD，6dD，3dPC，6dPC各组HI评分分别为0：1-4-0．316，7．5+1．179，7．2--1：0．919，7．6i0．843，7

7、．1士0．994，4．9士0．994，2．5+0．707，5．2--L0．919，2．6+0．699。模型组HI评分明显高于对照组(PO．05)；D(3天、6天)组HI评分明显降低，差异有统计学意义(PO．05)。6dD和6dPC组没有明显统计学差异(P

8、>O．05)。免疫组化结果表明除了对照组无表达外，其它各组PepTl主要表达在结肠上皮细胞胞质内。免疫印记和RT-PCR结果显示，对照组无PepTl表达；DM和NC组PepTl表达水平明显高于药物干预组(P