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《参苓白术散对脾虚湿困型溃疡性结肠炎大鼠结肠组织erk、p38 mapk蛋白表达的影响》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、第36卷第6期云南中医学院学报Vo1.36No.62013年12月JournalofYunnanUniversityofTraditionalChineseMedicine12.2013参苓白术散对脾虚湿困型溃疡性结肠炎大鼠结肠组织.ERK、p38MAPK蛋白表达的影响李姿慧,王键,蔡荣林z,孙娟t,叶铭刚-(1.安徽中医药大学中医临床学院,安徽合肥230038;2.安徽中医药大学针灸经络研究所,安徽合肥230038)摘要:目的探讨脾虚湿困型溃疡性结肠炎(UlcerativeColitis,uc)大鼠结肠组织中ERK,p38MAPK蛋白表达的变化及参苓白术散的干预作用。方法40只Wistar大
2、鼠随机分为正常对照组、模型对照组、柳氮磺吡啶组、参苓白术散组,每组10只。采用环境与饮食干预结合TNBS/乙醇灌肠法复制脾虚湿困型uc大鼠模型,应用免疫组织化学法检测各组大鼠结肠组织中ERK、p38MAPK蛋白表达情况。结果模型对照组大鼠结肠组织ERK、p38MAPK表达明显增多,与正常对照组比较具有显著性差异(P<0.05)。柳氮磺嘧啶组和参苓白术散组大鼠结肠组织ERK、p38MAPK的表达与模型对照组比较差异有统计学意义(P3、K、p38MAPK表达明显增强,参苓白术散治疗可显著降低其ERK、p38MAPK的表达水平。关键词:脾虚湿困证;参苓白术散;ERK;p38MAPK;溃疡性结肠炎中图分类号:R285.5文献标志码:A文章编号:1000—2723(2013)06—0007—04目前,细胞外信号调节激酶(extracellularsig—格证号:SCXK(苏)20080004)。将大鼠随机分为正nal—regulatedproteinkinases,ERK)和p38丝裂原活常对照组、模型对照组、柳氮磺吡啶组、参苓白术散化蛋白激酶(p38mitogen—activatedproteinkinases,组,每组1O只。4、动物房温度保持l825℃,大鼠适应p38MAPK)是MAPK信号通路中研究较为成熟的两性常规喂养3d。个位点蛋白。现认为,MAPK信号通路与炎症反应1.2药品与试剂的调控密切相关,近年来其在溃疡性结肠炎的研究参苓白术散水煎液组方为:人参15g,茯苓15g,中的重要意义日益引起医学界的广泛关注[1-3]。本实薏苡仁9g,白术15g,桔梗6g,莲子肉9g,缩砂仁验采用免疫组织化学法测定ERK、p38MAPK蛋白6g,陈皮9g,甘草(炒)9g,白扁豆(姜汁浸,去皮)在脾虚湿困型UC大鼠结肠组织中的表达情况,并12g,山药15g;均购自安徽中医药大学门诊部,由安探讨参苓白术散对脾虚湿困型UC大鼠结肠组5、织中徽中医药大学中药制剂室提供制剂;2,4,6一三硝基ERK、p38MAPK蛋白表达的影响,以进一步明确苯磺酸(TNBS,由Sigma公司生产)、RabbitAnti—MAPK信号通路在脾虚湿困型UC大鼠结肠组织中AQP4(H一80):ZS一20812、柳氮磺吡啶肠溶片(批号的变化及参苓白术散的干预作用,为揭示湿病和相20101212,上海中西三维药业有限公司)、通用型二应化湿法的生物学机制奠定实验基础。抗试剂盒(PV一6000)、TrizolReagent(invitrogen公1材料与方法司,货号:15596—026)、引物及探针合成(invitrogen1.1实验动物公司)、TaqDNA6、聚合酶(Fermentas公司,美国)、健康清洁级Wistar大鼠40只,雌雄各半,体质DAB(北京中杉金桥生物技术有限公司,ZLI一9032)、量(200~20)g(南京医科大学实验动物中心提供,合荧光定量试剂(TaKaRa公司)、逆转录试剂盒(Re一基金项目:国家自然科学基金(NO:81173172,81302901),安徽省自然科学基金(NO:1308085QH155),安徽省高等学校自然科学研究重点项目(NO:KJ2011A184)收稿日期:2013—10—31修回日期:2013—11—21作者简介:李姿慧(1982),女,山东维坊人,讲师,主要从事中医治则治法的理论与实验研究。通信作7、者:王键,E-mail:wangjian6301@163.com7云南中医学院学报第36卷vertAidTMfirstStrandcDNASynthesisKit,Fermen—为12#(kg·d),柳氮磺吡啶组灌胃给予SASP0.5g/tas公司,货号:00064525)。(kg·d),正常对照组和模型对照组给予0.9%生理盐1.3实验仪器水10mL/(kg·d)灌胃,连续14d。实验结束后,将
3、K、p38MAPK表达明显增强,参苓白术散治疗可显著降低其ERK、p38MAPK的表达水平。关键词:脾虚湿困证;参苓白术散;ERK;p38MAPK;溃疡性结肠炎中图分类号:R285.5文献标志码:A文章编号:1000—2723(2013)06—0007—04目前,细胞外信号调节激酶(extracellularsig—格证号:SCXK(苏)20080004)。将大鼠随机分为正nal—regulatedproteinkinases,ERK)和p38丝裂原活常对照组、模型对照组、柳氮磺吡啶组、参苓白术散化蛋白激酶(p38mitogen—activatedproteinkinases,组,每组1O只。
4、动物房温度保持l825℃,大鼠适应p38MAPK)是MAPK信号通路中研究较为成熟的两性常规喂养3d。个位点蛋白。现认为,MAPK信号通路与炎症反应1.2药品与试剂的调控密切相关,近年来其在溃疡性结肠炎的研究参苓白术散水煎液组方为:人参15g,茯苓15g,中的重要意义日益引起医学界的广泛关注[1-3]。本实薏苡仁9g,白术15g,桔梗6g,莲子肉9g,缩砂仁验采用免疫组织化学法测定ERK、p38MAPK蛋白6g,陈皮9g,甘草(炒)9g,白扁豆(姜汁浸,去皮)在脾虚湿困型UC大鼠结肠组织中的表达情况,并12g,山药15g;均购自安徽中医药大学门诊部,由安探讨参苓白术散对脾虚湿困型UC大鼠结肠组
5、织中徽中医药大学中药制剂室提供制剂;2,4,6一三硝基ERK、p38MAPK蛋白表达的影响,以进一步明确苯磺酸(TNBS,由Sigma公司生产)、RabbitAnti—MAPK信号通路在脾虚湿困型UC大鼠结肠组织中AQP4(H一80):ZS一20812、柳氮磺吡啶肠溶片(批号的变化及参苓白术散的干预作用,为揭示湿病和相20101212,上海中西三维药业有限公司)、通用型二应化湿法的生物学机制奠定实验基础。抗试剂盒(PV一6000)、TrizolReagent(invitrogen公1材料与方法司,货号:15596—026)、引物及探针合成(invitrogen1.1实验动物公司)、TaqDNA
6、聚合酶(Fermentas公司,美国)、健康清洁级Wistar大鼠40只,雌雄各半,体质DAB(北京中杉金桥生物技术有限公司,ZLI一9032)、量(200~20)g(南京医科大学实验动物中心提供,合荧光定量试剂(TaKaRa公司)、逆转录试剂盒(Re一基金项目:国家自然科学基金(NO:81173172,81302901),安徽省自然科学基金(NO:1308085QH155),安徽省高等学校自然科学研究重点项目(NO:KJ2011A184)收稿日期:2013—10—31修回日期:2013—11—21作者简介:李姿慧(1982),女,山东维坊人,讲师,主要从事中医治则治法的理论与实验研究。通信作
7、者:王键,E-mail:wangjian6301@163.com7云南中医学院学报第36卷vertAidTMfirstStrandcDNASynthesisKit,Fermen—为12#(kg·d),柳氮磺吡啶组灌胃给予SASP0.5g/tas公司,货号:00064525)。(kg·d),正常对照组和模型对照组给予0.9%生理盐1.3实验仪器水10mL/(kg·d)灌胃,连续14d。实验结束后,将
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