半滑舌鳎多倍体的人工诱导及三倍体生长与发育的研究

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1、学校代码：10264研究生学号：M090101028上海海洋大学硕士学位论文半滑舌鳎多倍体的人工诱导及三倍体生长题目：与发育的研究StudiesontheArtificialInductionofPolyploidyandItsEffectonGrowthand英文题目：DevelopmentofTriploidinHalf-SmoothTongueSole(Cynoglossussemilaevis)专业：水产养殖研究方向：鱼类遗传育种姓名：李文龙指导教师：陈松林研究员二〇一二年五月半滑舌鳎多倍体的人工诱导及三倍体生长与发育的研究StudiesontheArtificialI

2、nductionofPolyploidyandItsEffectonGrowthandDevelopmentofTriploidinHalf-SmoothTongueSole(Cynoglossussemilaevis)学位论文完成时间：指导教师签字：答辩委员会成员签字：上海海洋大学学位论文原创性声明本人郑重声明：我恪守学术道德，崇尚严谨学风。所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经明确注明和引用的内容外，本论文不包括任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品及成果的内容。论文为本人亲自撰写，我对所写的内容负责，并完全意识到本声明的法律结果

3、由本人承担。学位论文作者签名：日期：年月日上海海洋大学学位论文版权使用授权书学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅或借阅。本人授权上海海洋大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。保密□，在年解密后适用本版权书本学位论文属于不保密□学位论文作者签名：指导教师签名：日期：年月日日期：年月日半滑舌鳎多倍体的人工诱导及三倍体生长与发育的研究摘要半滑舌鳎（Cynoglossussemilaevis）隶属于鲽形目（Pleuro

4、nectiformes）舌鳎科（Cynoglossidae），是我国特有的一种名贵经济海水鱼类，属于近海温水性底层鱼类，我国沿海均有分布，以黄海、渤海为多。市场价值极高，养殖前景非常广阔，是目前我国北方沿海海水鱼类养殖的主要品种之一。不过，研究表明，半滑舌鳎雌性个体和雄性个体，在生长速率上存在很大差别，其雌性个体比雄性个体大3-4倍，由于雄性个体生长过慢，降低了半滑舌鳎的养殖产量，增加了养殖成本，严重影响了半滑舌鳎苗种的推广及养殖产业的发展，因此，培育优质、高产、抗逆性强的新品种，对于半滑舌鳎苗种的推广及其养殖业的发展具有重要意义。由于三倍体鱼潜在的不育性，而四倍体与二倍体杂交

5、又可获得大量的三倍体，运用染色体操作技术进行半滑舌鳎多倍体诱导技术的研究无疑是一个有效手段。因此，我们采用静水压休克法对半滑舌鳎四倍体及三倍体的人工诱导技术进行了研究，并以诱导获得的半滑舌鳎三倍体鱼为材料，对其性腺发育、性别比例及生长方面进行了跟踪研究。现将主要研究结果报道如下：开展了人工诱导半滑舌鳎四倍体鱼苗的研究，采用静水压处理抑制半滑舌鳎受精卵卵裂进行染色体加倍，筛选出有效的静水压处理起始时间、处理强度及其持续时间。结果表明在孵化水温23±0.2℃时，受精后21.5min，采用40MPa的静水压压力，持续休克处理4.5min，四倍体诱导效果最好，鱼苗四倍体率达到68.3%

6、。采用流式细胞仪分析了四倍体鱼苗细胞DNA相对含量，表明四倍体鱼苗细胞DNA相对含量为二倍体对照组鱼苗的2倍。通过染色体制作分析表明四倍体鱼苗的染色体数为84条，而二倍体对照组鱼苗的染色体数为42条。本研究采用静水压方法，在国内外首次建立了半滑舌鳎四倍体诱导方法。针对半滑舌鳎雌雄个体生长差异过大、雌性性腺发育成熟后腹部凸起、影响舌鳎生长和商品鱼质量等问题，本文开展了人工诱导半滑舌鳎三倍体的研究。采用静水压处理抑制半滑舌鳎受精卵第二极体排出进行染色体加倍，筛选出有效的静水压处理强度及其持续时间。结果表明在孵化水温23±0.2℃时，受精后5min，采用36MPa的静水压压力，休克处

7、理4min，三倍体率最高，达到100%。采用该诱导条件，大批量获得了半滑舌鳎三倍体鱼苗。采用流式细胞仪分析了三倍体鱼I苗细胞DNA相对含量，表明三倍体鱼苗细胞DNA相对含量为二倍体对照组鱼苗的1.5倍。通过染色体分析表明三倍体鱼苗的染色体数为63条，而二倍体鱼苗的染色体数为42条。本研究采用静水压方法，在国内外首次建立了半滑舌鳎三倍体鱼苗诱导方法，诱导鱼苗的三倍体率最高可达100%。以人工诱导获得的半滑舌鳎三倍体群体为材料，对其性腺发育、性别比例及生长方面进行了跟踪研究。对240日龄的半滑舌