催产素对大鼠切割疼痛痛觉调制的作用及机制

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1、中南大学博士学位论文催产素对大鼠切割疼痛痛觉调制的作用及机制姓名：魏小洁申请学位级别：博士专业：麻醉学指导教师：郭曲练20120530博士学位论文中文摘要摘要目的观察大鼠后足切割后中枢神经系统内催产素的变化规律，腹腔、鞘内和侧脑室内给予外源性催产素对大鼠后足切割痛的痛觉调制作用，并用催产素受体阻断剂atosiban和阿片类受体阻断剂纳洛酮预先阻断相应受体，研究中枢内催产素痛觉调制作用与这两种受体间的关系，探讨其简单作用机制。方法1．雄性SD大鼠随机分为切割痛组和空白对照组，切割痛组按照Brennanl996年介绍的方法建立大鼠后足切割痛模型，空白对照组不做任何处理。切

2、割痛组大鼠在切割后的30min、lh、3h、6h和24h取脊髓腰膨大和脑进行免疫荧光检测OT、OTR阳性细胞表达，取背角和PVN行Western．blot以及RT-PCR测定，检测OT、OTR转录和蛋白表达变化。2．雄性SD大鼠随机分为3组：腹腔注射组、鞘内注射组、侧脑室注射组；腹腔注射组分为100pl生理盐水、O．5nmol、lnmol和2．5nmol四个剂量组，鞘内注射组和侧脑室注射组分为101．tl(5}t1)生理盐水、0．05nmol、O．1nmol和0．25nmol四个剂量组。腹腔注射组大鼠在注射后的30min、lh、3h、6h、12h、24h，鞘内和侧脑室

3、内注射大鼠在注射后的10min、30min、lh、3h、6h、12h、24h进行机械性痛阈测定。3．雄性SD大鼠随机分为2大组：鞘内注射组、侧脑室注射组。每个大组又分为如下小组：①生理盐水+OT0．05nmol组；②生理盐水+OT0．1nmol组；⑧生理盐水+OT0．25nmol组；@atosiban1．0nmol+OT0．05nmol组；Oatosiban1．0nmol+OT0．1nmol组；(查)atosiban博士学位论文中文摘要1．Onmol+OTO．25nmol组；⑦纳洛酮0．599+OTO．05nmol组；⑧纳洛酮0．599+OT0．1nmol组；⑨纳洛酮

4、O．599+OT0．25nmol组。各组大鼠在切割给药后的10min、30min、lh、3h、6h、12h、24h进行机械性痛阈测定，检测其变化情况。结果1．切割痛大鼠与空白对照组大鼠相比，在切割后的30min开始持续至至少6hPVN内的OT阳性细胞数量明显下降，WB显示在该时间段内PVN内的OT蛋白总量明显下降，而mRNA却在切割后的30min至1h内升高；脊髓腰膨大背角I、II板层内OT阳性细胞数和蛋白表达量在切割后的30min至6h开始上升，而RT-PCR显示在脊髓腰膨大处无OTmRNA出现；无论切割前后PVN内均未见OTR的表达，而脊髓腰膨大背角I、II板层内

5、OTR在切割后30min至至少12h表达上升。2．腹腔注射O．5nmol、lnmol或2．5nmolOT对大鼠切割痛足机械痛阈无影响；侧脑室内注射0．05nmol、O．1nmol或0．．25nmolOT对大鼠切割痛足机械痛阈有剂量依赖性地提高，其持续时间从给药后10min至6h；鞘内给药同样会使切割痛大鼠产生剂量依赖性机械痛阈增强：侧脑室和鞘内注射OT对切割痛的镇痛作用均有封项作用。3．鞘内和侧脑室内预注射atosiban都可以阻断OT对切割痛的镇痛作用，且增加OT剂量并不能逆转该效应；而鞘内和侧脑室内预注射纳洛酮可以部分阻断OT的镇痛作用，OT剂量增加时该阻断作用减

6、弱，在OT剂量达到0．25nmol时其镇痛作用再次出现。结论1．切割痛大鼠PVN内OT转录增加而蛋白表达减少，脊髓内OT虽无转录但蛋白表达增加，表明切割后PVN内合成的OT转运至脊博士学位论文中文摘要髓和(或)其他位置发挥痛觉调制作用。2．无论切割与否大鼠PVN内OTR表达均阴性，而切割后腰膨大背角浅层内的OTR表达增加，表明PVN本身痛觉调制作用不大，而脊髓可能更为重要。3．腹腔注射OT对切割痛无镇痛作用，而鞘内和侧脑室内注射OT均能产生剂量依赖的镇痛作用。4．鞘内和侧脑室内预注射atosiban对能完全阻断OT的镇痛作用，而预注射纳洛酮则不能完全阻断。表明OT的镇

7、痛作用主要通过OTR发挥，同时部分作用于阿片受体。关键词催产素，催产素受体，切割痛，阿片受体，atosiban，纳洛酮III博士学位论文英文摘要AbstractObjectives：Toinvestigatethevariationregularityofoxytocinincentralnervoussysteminratsafterhindpawincision．Intraperitoneal、intrathecalandintracerebralventricularinjectionofoxytocinwereadministeredtoev