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时间:2019-02-16
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1、青岛大学硕士学位论文Wistar大鼠肌肉注射异种脐带间充质细胞的安全性研究姓名:张文祥申请学位级别:硕士专业:儿科学指导教师:李自普20120603Wistar大鼠肌肉注射异种脐带问充质细胞的安全性研究摘要目的观察大鼠肌肉注射异种脐带间充质细胞后生活习性、体内各器官的病理及血生化变化。方法健康雄性SPF级Wistar大鼠60只随机分为6组:正常组(肌肉注射脐带间充质细胞的悬浮液---PBS)、培养液对照组(简称培养液组,肌肉注射脐带间充质细胞的培养液⋯DM雕)、脐带间充质细胞上清液组(简称上清液组,肌肉注射培养脐带间充质细胞的上清液)、脐带间充质细胞肌肉注射低剂
2、量组(简称低剂量组,肌肉注射脐带间充质细胞0.25X105个)、脐带间充质细胞肌肉注射中剂量组(简称中剂量组,肌肉注射脐带间充质细胞1.0X105个)、脐带间充质细胞肌肉注射高剂量组(简称高剂量组,肌肉注射脐带间充质细胞4.0×105个)。每组10只,每只大鼠共注射液体0.8ml,四肢各注射0.2ml,共注射2次。注射前后称重、留取空腹血作生化检查。期间观察大鼠的生活习性有无改变,最后处死,取肝、左心室壁、脾、肺、肾、脑、肌肉做HE染色,取心尖部肌肉行透射电镜,剩余心肌称量干重、湿重。结果1所有大鼠肌注前后的血清生化指标均在正常范围内。肌注前后,各组大鼠血清生化
3、指标差异无统计学意义(p>o.05);与正常组比较,培养液组、上清液组及不同剂量的脐带间充质细胞组的血清生化指标无明显差别(p>o.05)。2所有大鼠肌注后的心肌干湿重以及体重均在正常范围内。肌注后,各组大鼠心肌干湿重以及体重差异无统计学意义(p>o.05)i与正常组比较,培养液组、上清液组及不同剂量的脐带问充质细胞组的心肌干湿重及体重无明显差别。3所有大鼠肌注后的体内各脏器光镜检查、心肌的超微结构均正常。肌注后,各组大鼠体内各脏器光镜检查、心肌的超微结构未见差异。与正常组比较,培养液组、上清液组及不同剂量的脐带间充质细胞组的大鼠体内各脏器光镜检查、心肌的超微结
4、构无明显差别。4实验期间各组大鼠均未出现脱毛、皮肤溃疡、呼吸急促、食欲减退,腹泻等现象,未出现大鼠死亡。结论1肌肉注射脐带间充质细胞对正常Wistar●大鼠肝、心、脾、肺、肾、脑、肌肉的光镜组织结构和心肌的超微组织结构无影响。2肌肉注射脐带间充质细胞对正常Wistar大鼠肝功、肾功和心肌酶无明显暑缃。3肌肉注射脐带间充质细胞对正常Wistsr大鼠体重、生活习性无明显影响。硕士研究生张文祥(儿科学)指导教师李白普教授关键词:异种;脐带间充质细胞;肌肉;注射;安全性SecurityResearchofHeterogeneousUmbilicalCordMesench
5、ymalStemCellsIntramuscularInjectiononWistarRatsAbstractObjectiveToobservethechangesofpathologyandbiochemicaloftheratsafterhumanumbilicalcordmesenchyrr埝]stemcells(HUMSC)byintramuscularinjection.MethodsAtotalof60maleSPFWistarratswgredividedintosixgroupsrandomly:thenormalgroup(PBSasthes
6、uspendliquidofhumanumbilicalcordmesenchymalstemcellswasinjeetedinmuscle);thecontrolgroup、jl,ilhculturesolution(namedtheculturesolutiongroup:DMEMastheculturesolutionofhumanumbilicalcordmesenchymalStelllcellswas蜘ectedinmuscle);thesupernatantgroupofhumanumbilicalcordmesenchymalstemcells
7、(namedsupematantgroup,thesupernatsntofhumanumbilicalcordmesenchymalStemcellsWasinjectedinmuscle);thelowconcentrationgroupofhumanumbilicalcordmesenchymalstemcells(namedlowconcentrationgroup:humanumbilicalcordmcsenchymalstemcellswiththeamountof0.25X105Wasinjectedinmuscle);themoderateco
8、ncentrationg
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