ho-1对氧化损伤aec-ⅱ凋亡及aqp-1表达的影响

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1、遵义医学院硕士学位论文HO--1对氧化损伤AEC--Ⅱ凋亡及AQP--1表达的影响姓名：王宇辉申请学位级别：硕士专业：麻醉学指导教师：陈淼201205遵义医学院硕士学位论文HO．1对氧化损伤大鼠AEC．II凋亡及AQP-1表达的影响HO．1对氧化损伤AEC．II凋亡及AQP．1表达的影响摘要目的探讨血红素加氧酶．1(HO．1)对过氧化氢诱导的氧化损伤大鼠肺泡II型上皮细胞(AEC—II)凋亡及水通道蛋白．1(AQP．1)表达的影响。方法取雄性健康SD大鼠，均予水合氯醛行腹腔注射麻醉后予以气管插管，手术取出肺组织，分离提纯AEC．II，将细胞以1×106个脚浓度接种于培养板，原代培养

2、24H。将分离提纯并原代培养后的AEC．II的随机分为4组：正常组(加入生理盐水)；损伤组(加入H2020．5mmol／L处理)；对照组(加入HO．10．2umol／L处理)；保护组(同时加入HO．10．2umol／L及H2020．5mmol／L处理)，将处理后的各组细胞继续培养12H，于第OH，1H，3H，6H及12H分别取各组细胞以流式细胞仪检测细胞凋亡率并予以Westernblotting法测定AQP一1含量。结果损伤组AQP一1表达水平在1H，3H，6H及12H较其他组均显著下降(萨O．05)，对照组及保护组AQP．1表达均高于正常组及损伤组(p<0．05)，在约6小时水平

3、达到高峰。其中对照组表达水平最高(pO．05)。结论H202诱导引起氧化损伤的体外培养AEC．II细胞中，不同时间细胞凋亡率随AQP一1下降而增加。HO．1可上调H202诱导的氧化损伤AEC．II的AQP．1表达并降低细胞凋亡率。AQP．1表达上调可能是HO．1抗氧化损伤机制之一。【关键词】血红素加氧酶．1；大鼠：肺泡II型上皮细胞，水通道蛋白．1，凋亡Theaffectofhemeoxygenase一1in

4、hydrogenperoxideinducedapoptosisandexpressionofAquaporin一1inprimaryalveolarepithelialtypeIIofratAbstractObjectiveToaffectivehemeoxygenase-I(HO-1)inhydrogenperoxideinducedapoptosisandexpressionofAquaporin．I(AQP一1)inprimaryalveolarepithelialtypeII(AEC-II)ofrat．MethodsHealthymaleSwagueDawley(SD)r

5、atsweresubjectedtoanesthesia，trachealintubafionandopen．chesttotakeoutlung，purification，theAEC-11wereculturedby1×106／mlincellcultureplate．PrimaryAEC-IIcollectedfromhealthySDratswereculturedfor24hours．thendividedintofourgroups：①group．normal(treatedwithsaline)；②group．damage(treatedwithH2020．2mmol

6、／L)；@group—control(treatedwithHO-10．5umol／L)@group．protectionftreatedwithHO一10．2umol／LandH202o．5mmol／L)．Eachgroupswereculturedfor12hoursaftertreated．TheapoptosisrateweremeasuredbyFlowcytometrybeforetreatedandafter1H，3H，6H，12H．TheexpressionofAQP一1weremeasuredbyWesternblottinginthesametime．Resul

7、texpressionofAQP一1ingroup—damagedeclinedthanothergroupsin1H，3H，6Hand12H(p<0．05)，andgroup-controlwasthehighestinthesametime(p<0．05)．Therewasanupwardtrendandpeakedat6Hingroup-controlandgroup—protection．TheexpressionofAQP-1ofgroup-controla