基于金包覆磁性纳米粒子电位型免疫传感器的研究

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1、学位论文独创性声明lIII11111IIITIllIIl＼1891006交的学位论文是本人在导师指导下所取得的研究成果。论文中除特别加以标注包含他人和其他机构已经撰写或发表过的研究成果，其他同志的研究成果对本帮助，均已在论文中做了明确的声明并表示谢意。学位论文作者签名：建立也学位论文版权的使用授权书本学位论文作者完全了解辽宁师范大学有关保留、使用学位论文的规定，及学校有权保留并向国家有关部门或机构送交复印件或磁盘，允许论文被查阅和借阅。本文授权辽宁师范大学，可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库并进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文，并且本人电

2、子文档的内容和纸质论文的内容相一致。保密的学位论文在解密后使用本授权书。学位论文作者签名：薹妄圣毖指导教师签名：签名日期：2-Df1年f月冯日-▲U辽宁师范大学硕士学位论文摘要抗体在固体表面的固定化是成功构建免疫传感器的关键步骤，不同的固定化方法对转换器表面上的抗体—抗原反应将产生严重影响。近年来，人们将纳米技术广泛应用于生物传感器的研究，利用贵金属纳米粒子(金、银、铂)．、炭纳米材料、磁性纳米材料、自组装单分子膜构建免疫传感器已成为当今生物传感器研究领域的热点课题。本文主要研究了金包覆普鲁士蓝纳米粒子、蛋白质A在电位型IgG免疫传感器中的应用，并研究了对羧基苯硫酚自组膜表面

3、分子间氢键对免疫传感器性能的影响。(1)金包覆磁性普鲁士蓝纳米粒子的制备及其在电位型免疫传感器中的应用首次利用四氧化三铁纳米粒子(Au@Fe。04)制备了金包覆磁性普鲁士蓝纳米粒子(Au@MPBNPs)。将Au@MPBNPs和Au@Fe。0。共同固定在磁性炭糊电极(MCPE)上，再通过金与Ab分子上氨基的键合作用，将羊抗小鼠IgG(Anti-IgG)固定到MCPE表面，研制了一种性能优良的电位型免疫传感器(Ab／Au@Fe。04／Au@PB／MCPE)。在2×10{～l×104ng／m1浓度范围内，该传感器的响应电位与抗原(小鼠IgG)浓度的对数呈良好的线性关系，其线性方程为

4、y一22．89x一122．9，检测下限为3．1x10‘4ng／ml，响应时间为8min。该传感器的制备方法简单，无需标记过程，成本低廉，响应灵敏，性能稳定，具有潜在的应用前景，对制备其他类型免疫传感器具有重要参考价值。(2)基于抗体定向固定化的电位型免疫传感器的研究利用蛋白质A(PrA)能够定向固定抗体的功能，制备了一种高度灵密的免疫传感器(Ab／PrA／Au@Fes吖Au@肝B／MCPE)。在优化检测条件下，该传感器检测游离小鼠IgG的线性方程为y一39．89x一204．41、响应时间为6min，检测范围为2．OX10。5～1．OX10'ng／ml，检测下限为2．5×10q

5、ng／m1，表明蛋白质A定向固定抗体可大大提高免疫传感器的灵敏度。(3)对羧基苯硫酚自组膜表面分子间氢键对免疫传感器性能的影响首先在金电极(Au)上制备羧基苯硫酚自组膜(4-MBASAM)，进而利用偶联法固定抗体(Ab)，制备了一种免疫传感器(Ab／4一MBASAM／GE)。考查了不同pH下制备的4-MBASAM以及混合硫醇SAM对Ab／4-MBASAM／GE性能的影响。结果表明，在pH3．0的醋酸盐缓冲溶液中制备4-MBASAM所得到的Ab／4-MBASAM／GE性能最好，其线性方程为y=6．04x+6．53，检测范围为4×10q～l×104ng／m1，检测下限为3．3×1

6、0qng／ml，响应时间在8min以内。说明在pH3条件下可有效抑制4-MBA自组膜表面分子间氢键的产生，有利于Ab在Au上的固定化。关键词：免疫传感器j普鲁士蓝纳米粒子；纳米金粒子；蛋白A；对羧基苯硫酚-■，_¨dAntibodyimmobilizationonthesolidsurfaceisthepivotalprocessinthesuccessfulbuildingoftheimmunesensors，andthemethodofimmobilizationwouldseriouslyaffecttheantibody-antigenreactiononthecon

7、vertersurface．Inrecentyears，nanotechnologyiswidelyusedinbiosensorresearch．Theuseofnoblemetalnanoparticles(Au，Ag，Pt)，carbonnanomaterials，magneticnanomaterialsandself-assembledmonolayerimmunosensorshasbecomethehottopicinbiosensorsfield．Thispaperstudiesthea