以nos为靶点吡咯烷衍生物设计、合成及初步抑制活性的研究

《以nos为靶点吡咯烷衍生物设计、合成及初步抑制活性的研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、of^；博士论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本声明的法律责任由本人承担。论文作者签名：．亟J!旦童二E1期：关于学位论文使用授权的声明本人完全了解山东大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留或向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅；本人授权山东大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存

2、论文和汇编本学位论文。(保密论文在解密后应遵守此规定)论文作者签名：自盈乏蒯签名：缁殛日论文作者签名：自盈乏蒯签名：蕴臣X互日期：of^l博士学位论文以NOS为靶点的吡咯烷衍生物的设计、合成及初步抑制活性研究专业：药物化学研究生：刘凤志导师：徐文方教授中文摘要第一部分No和NOS研究进展NO是一种由一氧化氮合酶(NOS)氧化工．精氨酸伍．Arg)产生的生物第二信使。高浓度时，N0是一种防御肿瘤细胞和病原体的细胞毒素；低浓度时，作为一种信号在各种生理活动中起作用，包括血流的控制、神经传导、学习和记忆。NO的过度产生涉及到炎症、神经退化和血管性疾病，例如中风、阿耳茨海默氏病、败血性休

3、克、炎性关节炎、结肠炎和糖尿病。病理条件下，和疾病相关的NO的产生发生改变，这使一氧化氮合酶成为一个吸引人的药物开发靶点。一氧化氮合酶(NOS)主要有两类：结构型和诱导型。结构型一氧化氮合酶需要Ca2+／钙调蛋白，进一步分为：神经亚型和内皮亚型。内皮亚型主要分布在血管内皮组织，产生低浓度的NO能降低血压和阻止血小板聚集。神经型一氧化氮合酶产生的NO作为神经递质控制神经传导。诱导亚型分布在激活的巨噬细胞和其它类型细胞，产生的NO在宿主防御反应中发挥重要作用。在生理条件下，诱导型一氧化氮合酶不存在哺乳动物的细胞里。许多种细胞包括巨噬细胞和平滑肌细胞被促炎症因子如内毒素(细菌脂多糖，L

4、PS)，肿瘤坏死因子-a(TNF-a)和干扰素q(IFNq)诱导产生诱导型一氧化氮合酶。一氧化氮合酶涉及各种循环休克和炎症的发病机理。诱导型一氧化氮合酶过度产生的NO病理生理学的重要性表明抑制iNOs具有潜在的治疗价值。一氧化氮合酶(NOS)抑制剂分为氨基酸衍生物抑制剂和非氨基酸类抑制剂。迄今报道的多数NOS抑制剂包含脒、胍和异硫脲等功能基。在这些化合物中。氨止f^Z博士学位论文基酸类化合物对iNOS具有好的活性和选择性。第二部分目标化合物的设计亚氨基吡咯烷衍生物对hiNOS(与heNOS相比较)显示了较好的活性和选择性。构象严格限制的含吡咯烷的类肽显示了较好的活性和选择性。因此

5、，吡咯烷环可被用作潜在的先导骨架用以开发新的选择性的NOS抑制剂。用构象限制的吡咯烷环作为骨架开发选择性NOS抑制剂。我们对吡咯烷骨架进行了如下修饰：(i)6．(3．硝基胍)正己酸被连接到吡咯烷的4．位以模拟L-NNA结构；(呦保留吡咯烷1啦自由仲氨基或引入Boc基团；(iii)用具有不同取代基的苯胺和氨基酸甲酯连接到吡咯烷2．位的羧基上。参考鼠的iNOS(PDBID1r35)的三维结构，柔性对接被用来模拟目标化合物与靶酶对接。第三部分目标化合物的合成所有的目标化合物从反式羟脯氨酸经过lO步或11步反应制得。从反式羟脯氨酸经过酯化，Boc保护，甲烷磺酰化，叠氮钠的SN2亲核取代反

6、应，氢化还原得到中间体6，S．甲基异硫脲硫酸盐和6．氨基正己酸反应得到6．胍基正己酸，6-胍基正己酸在发烟硝酸和发烟硫酸中硝化得到中间体9，9和6反应得至lJ(2s,4跏1．叔丁基2一甲基4-[6-0一硝基胍)正己酰胺】吡咯烷一1，2·二羧酸酯，脱掉甲酯后生成相应羧酸中间体11。n、氯甲酸异丁酯和N．甲基吗啡啉生成混合酸酐，然后氨解得到A和c系列目标化合物。A和c脱掉Boc就得到B和D系列目标化合物。所有化合物都未见报道，目标化合物用红外、核磁共振氢谱和电喷雾质谱进行了结构确证。第四部分目标化合物的活性评价对70个目标化合物的iNOS抑制活性进行了评价，初步的测试表明多数化合物都

7、有抑制iN0s的活性。16个化合物A1、A3、All、A18、A19、A21、A26、A27、B1、B5、B14、C1、C2、C3、C6、Cll显示了较好的iNOS抑制活性并且优于阳性对照药L-NNA。化合物C2显示了最好的抑制活性(ICso=0．24pM)。这些化合物将来可被用作研究新的iNOS抑制剂的先导物。24f^；博士学位论文初步活性评价也表明：A系列抑制活性比B系列活性好；c系列抑制活性比D系列好。含苯胺和环己胺的目标化合物都显示了较好的iNOS抑制活性。目标化合物抑制