干细胞微环境对小鼠卵母细胞体外成熟、胚胎发育影响及其生物活性因子分析

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1、目录1.英文缩略表12.中文摘要23.英文摘要54.正文81)前言82)材料和方法123)结果224)讨论275)结论326)参考文献335.附录386.致谢417.综述及参考文献43英文缩略表（abbreviations）英文缩写英文全名中文全名DODenudedoocyte裸卵COCsCumulus-oocytecomplexes卵丘-卵母细胞复合物MSCsMesenchymalstemcells骨髓间充质干细胞IVMInvitromaturation体外成熟CMconditionedmedium条件培养液CGsCorticalgra

2、nules皮质颗粒FDAFluoresceindiacetate二乙酸荧光素LCALentilslectin小扁豆凝集素GVBDGerminalvesiclebreakdown生发泡破裂GVGerminalvesicle生发泡CGFDCorticalgranule-freedomain皮质颗粒缺失区BMP15Bonemorphogeneticprotein15骨形态发生蛋白15EGFEpidermalgrowthfactor表皮生长因子bFGFBasicfibroblastgrowthfactor碱性成纤维生长因子IGFInsulin-l

3、ikegrowthfactor胰岛素样生长因子LIFLeuckemiainbibitoryfactor白血病抑制因子IL-6Interleukin6白细胞介素-6IVFInvitrofertilization体外受精BSABovineserumalbumin牛血清白蛋白hCGHumanchoriongonadotropin人绒毛膜促性腺激素PMSGPregnantmareserumgonadotropin孕马血清促性腺素PIPiopidiumiodine碘化丙啶ARTAssistedreproductivetechnology辅助生殖技术

4、IVF-ETInvitrofertilizationandembryotransfer体外受精-胚胎移植1ICMInnercellmass内细胞团OHSSOvarianhyperstimulationsyndrome卵巢过度刺激综合征PCOSPolycysticovarysyndrome多囊卵巢综合症ICSIIntracytoplasmicsperminjection卵胞浆内单精子注射2干细胞微环境对小鼠卵母细胞体外成熟、胚胎发育的影响及其生物活性因子分析中文摘要研究背景：近三十年来，辅助生殖技术（assistedreproductive

5、technology，ART）的发展迅速。据统计，在西方国家大约有近1%的儿童的出生有赖于ART技术的运用。目前临床常用的ART方法有：体外受精-胚胎移植(invitrofertilizationandembryotransfer，IVF-ET)、卵泡浆内单精子显微注射(intracytoplasmicsperminjection，ICSI)、胚胎植入前遗传学诊断(PGD)、赠卵IVF-ET以及配子和胚胎冷冻技术等。ART中所需的卵母细胞大多数是通过对患者行控制性超排卵获得，在一定程度上提高了ART的妊娠率。但控制性超排卵也存在一些弊端及

6、并发症，如卵巢过度刺激综合征(ovarianhyperstimulationsyndrome，OHSS)、乳腺癌、卵巢癌发病的潜在危险、医疗费用高、就医时间长等。因此，临床上急需一种新的获取成熟卵母细胞的方法。未成熟卵母细胞体外成熟（invitromaturation，IVM）即模拟卵母细胞成熟体内环境，使从卵巢采集的未成熟卵母细胞在体外适宜培养条件下达到最后成熟并具有受精能力，成为解决这些问题的有效途径。未成熟卵IVM技术培养出大量成熟的卵母细胞用于体外受精，支持移植前胚胎的发育，在ART中发挥重要的作用。但IVM技术仍然存在一些弊端，

7、究其原因还是由于尚未建立理想的培养体系。目前体外成熟体系中所用的培养液是向基础培养基中添加血清、白蛋白、各种细胞因子和激素等，在一定程度上提高了体外成熟的效率。但仍然存在卵母细胞成熟率低、核质成熟不同步和卵母细胞质量差等不足，所以必须优化培养体系。骨髓间充质干细胞是一种成体干细胞，存在于动物的骨髓腔中，不仅具有自我更新和多向分化功能，而且可以分泌多种细胞因子，如表皮生长因子（epidermalgrowthfactor,EGF）、胰岛素样生长因子（Insulinlikegrowthfactors，IGF）、白血病抑制因子（Leukemiai

8、nhibitoryfactor，LIF）、转化生长因子（Transforminggrowth3factor，TGF）、成纤维细胞生长因子(FibroblastGrowthFactor，FGF)