ezrin对小鼠卵母细胞体外成熟的影响

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1、＂１分类号：Ｓ８１４．８：０３６４单位代码２７２０２５４密级：１：公开学号学位论文Ｅｚｒｉｎ对小鼠卵母细胞体外成熟的影响Ｅｆｆｅｃｔｏｆ：ｕｒａｔｉｏｉｉｏｆＯｏｃｔｉＭｓｅＥｚｒｉｎｏｎＩｎＶｉｔｒｏＭａｌｙｅｎｏｕ研究生：童彬彬指导教师：刘亚副教授申请学位口类级别：农学硕壬；临床兽民学专业名称研究方向：兽戾产科疾病及牛殖调控巧术所在学院：动物科技学院答辩委员会主席：讀户＿二零一五年六月AnhuiAgriculturalUniversity

2、MasterDegreeThesisEffectofEzrinonInVitroMaturationofOoctyeinMousePostgraduatecandidate:TongBinbinAcademicsupervisor:AssocrateProf.LiuYaCollegeofAnimalScienceandTechnology，AnhuiAgriculturalUniversity,Hefei,230036Hefei,Anhui,ChinaJune,2015独创性声明本人声明所呈的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知

3、，除了文中特别加标注和致谢的地方夕ｈ，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得安徽农业大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：ｆＭＭ？＾咬丰签字日期：６月日ｙ学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解安徽农业大学有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和电子文件，允许论文被查阅和借阅。本人授权安徽农业大学可将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，收录到《

4、中国学位论文全文数据库》，可Ｗ采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文，向社会公众提供信息服务。（保密的学位论文在解密后适用本授权书）。学位论文作者签名：指导教师签名；争浑ｊ签字／曰期；年曰签字日期：如／／５７１＾；学位论文作者毕业后去向工作单位：电话：？■走也扫ｈ：由：（育Ｐ编本研究受下列项目资助1.安徽省自然科学基金项目（批准号：1408085MKL40）2.安徽省科技攻关项目（批准号：1301032157）3.安徽农业大学“学科骨干培育计划”SUPPOTEDBY1.NaturalScienceFound

5、ationofAnhuiProvice(No.1408085MKL40)2.KeyTechnologiesR&DProgramofAnhuiProvince(No.1301032157)3.FoundationforDisciplineKeyScholarsofAnhuiAgriculturalUniversity摘要Ezrin是ERM蛋白家族一员，在多种细胞中桥接细胞骨架与质膜，参与细胞形态维持、细胞粘附、细胞迁移及信号转导等多种细胞功能。有研究表明该家族蛋白参与了小鼠卵母细胞皮层紧张度的调控及第二次成熟分裂时纺锤体的定位。我们前期的研究发现，小鼠GV期到MII期

6、的卵母细胞均有Ezrin及其磷酸化修饰的活性形式存在，但其在小鼠卵母细胞成熟过程究竟发挥什么作用尚不清楚。本试验以小鼠GV期裸卵为材料，通过显微注射特异性siRNA敲低Ezrin的方法研究了该蛋白在小鼠卵母细胞发育成熟中的作用以及对受精后胚胎发育潜力的影响。研究内容与结果如下：1.显微注射Ezrin-siRNA后不同时间小鼠GV期裸卵内Ezrin的表达水平向小鼠GV期裸卵显微注射Ezrin-siRNA或NC-siRNA（阴性对照），在含Milrinone（抑制细胞核分裂）M2中分别抑制0h、6h、12h、18h、24h、30h和36h后，用Ezrin特异性抗体进行荧

7、光染色并用ImageJ软件分析所获图片的平均荧光值。结果发现：在显微注射后18～30h期间，试验组Ezrin表达量显著低于对照组（P＜0.05）。2.Milrinone阻滞不同时间对小鼠GV期裸卵体外成熟率的影响将小鼠GV期裸卵在Milrinone培养液中分别阻滞0h（对照组）、6h、12h、18h、24h、30h和36h后，统计各组卵母细胞成熟率（以排出PBI计）。结果显示，阻滞时间≤18h，各组卵母细胞成熟率与对照组无显著差异（P＞0.05）；阻滞时间≥24h，则卵母细胞成熟率显著低于对照组及阻滞时间≤18h的各试验组（P＜0.05）。3.敲低Ezrin对小