SS31对高龄小鼠未成熟卵母细胞体外成熟的影响

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1、学位论文SS31对高龄小鼠未成熟卵母细胞体外成熟的影响徐红指导教师姓名：刘伟信申请学位级别：硕士专业名称：妇产科学论文提交时间：2018年4月论文答辩时间：2018年5月二○一八年四月成都中医药大学2018级硕士学位论文中文摘要目的：观察SS31（D-Arg-2，6-dimethyltyrosine-Lys-Phe-NH2）在高龄小鼠未成熟卵母细胞体外成熟（Invitromaturation，IVM）中的效果；评价SS31对高龄小鼠未成熟卵母细胞IVM后卵母细胞质量及其发育潜能的影响。方法：选择48-52周的小鼠为研究对象，采用体外培养、体外受精、细胞形态学评价、共聚焦

2、显微技术等方法。比较尿促性素与孕马血清促排卵效果；观察不同浓度SS31（分为0μmol/L、0.5μmol/L、1μmol/L、2μmol/L）对卵母细胞成熟率及成熟时间的影响，计算各个浓度组最佳培养时间；体外成熟卵母细胞进行体外受精胚胎培养，比较各组的受精率、卵裂率、优质胚胎率、囊胚率；分析卵母细胞膜电位分布规律、比较卵母细胞膜电位大小。结果：高龄小鼠采用尿促性素促排卵生发泡（Germinalvesical，GV）期卵母细胞获得率显著高于孕马血清和空白对照组（91.22%vs79.17%、63.77%）（P＜0.05）；高龄小鼠未成熟卵母细胞体外培养，添加SS31浓度

3、为1μmol/L组中卵母细胞成熟率显著高于浓度为0μmol/L组、0.5μmol/L组、2μmol/L组（87.69%vs70.49%、72.91%、73.73%）（P＜0.05）；SS31浓度为1μmol/L组中卵母细胞受精率显著高于浓度为0μmol/L组、0.5μmol/L组、2μmol/L组（68.47%vs54.90%、54.37%、57.02%）（P＜0.05）；SS31浓度为1μmol/L组中优质胚胎率显著高于浓度为0μmol/L组、0.5μmol/L组、2μmol/L组（22.37%vs8.93%、10.71%、8.70%）（P＜0.05）；体内成熟组优质

4、胚胎率37.33%，显著高于所有卵母细胞体外成熟组（P＜0.05）；SS31浓度为1μmol/L组囊胚率显著高于0μmol/L组、0.5μmol/L组、2μmol/L组（21.05%vs5.36%、8.93%、7.25%）（P＜0.05）；体内成熟组囊胚率36.00%，显著高于所有卵母细胞体外成熟组（P＜0.05）；SS31浓度为0μmol/L组卵母细胞线粒体膜电位显著低于SS31浓度为1μmol/L组、体内成熟组（0.199vs0.732、0.821）（P＜0.05）；SS31浓度为0μmol/L组卵母细胞线粒体膜电位周边分布率显著低于SS31浓度为1μmol/L组、

5、体内成熟组（17.65%vs56.36%、58.00%）（P＜0.05）。结论：高龄小鼠采用尿促性激素促排卵效果优于孕马血清；培养液中添加SS31可以显著提高高龄小鼠卵母细胞体外培1成都中医药大学2018级硕士学位论文养成熟率，SS31最佳成熟时间为18h，最佳作用浓度为1μmol/L；培养液中添加1μmol/L的SS31能够提高高龄小鼠卵母细胞体外成熟后的受精率、优质胚胎率、囊胚率；SS31在卵母细胞成熟的作用可能是通过改善卵母细胞线粒体功能提高卵母细胞质量的。本研究结果将为临床高龄女性卵母细胞体外成熟提供实验依据。关键词：高龄小鼠；SS31；卵母细胞；体外成熟；胚胎

6、发育潜力2成都中医药大学2018级硕士学位论文ABSTRACTObjective：ToobservetheeffectofSS31(D-Arg-2,6-dimethyltyrosine-Lys-Phe-NH2)ontheinvitromaturation(IVM)ofimmatureoocytesofagedmiceandevaluatetheinfluenceofSS31totheoccytesqualityandpotentialafterIVMofimmatureoocytesofagedmice.Methods：48-52-week-oldmiceweresel

7、ectedasthestudysubjects.Invitroculture,invitrofertilization,cellmorphologyevaluationandconfocalmicroscopywereusedtocomparetheeffectofovulationinductiontreatedbyUrinarygonadotropinandPregnantMareSerumGonadotropin(PMSG)andtoanalyzetheeffectsofdifferentconcentrations(0μmol/L