百尾参止咳活性成分探究

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1、百尾参止咳活性成分探究［摘要］采用小鼠氨水引咳法研究百尾参Disporumcantoniense的止咳作用，利用各种现代色谱技术手段对止咳活性部位进行化学成分分离与纯化，并根据化合物的理化性质和光谱数据鉴定结构。结果表明百尾参水提取物及乙醇提取物均有止咳活性，而乙醇提取物高剂量组的止咳作用高于阳性对照;从乙醇提取物中首次分离并鉴定了8个化合物,分别为豆辎-4-烯-3-酮(1),麦角笛-5,7,22-三烯-3B-醇(2),obtucarbamateA(3),obtucarbamateB(4),neotigogenin(5),偶氮-2,2'-双［Z-(2,3-二懸基-4-甲基-5-甲氧基)

2、苯基乙烯］(6),dimethyl{［carbonylbis(azanediyl)Jbis(2-methyl-5,1-phenylene)}dicarbamate(7),桝皮素-3-0-3-D-毗喃葡萄糖昔(8),活性跟踪显示化合物3,4,6具有止咳作用，其中化合物6的止咳作用与阳性对照相当。［关键词］百尾参；止咳活性；偶氮化合物；化学成分百尾参为百合科L订iaceae万寿竹属植物万寿竹Disporumcantoniense(Lour.)Merr.。其味甘、淡，性平，具有润肺止咳、健脾消积的功效，可用于治疗虚损咳喘、痰中带血、肠风下血、食积胀满等症［1-2］o百尾参是苗族习用药材，是复

3、方制剂咳速停系列药物的主药。目前，关于百尾参的研究主要集中在栽培方面[3-6],对其化学成分及生物活性研究较少[7-10]o为了探究百尾参的止咳活性成分，采用小鼠氨水引咳法首先研究了百尾参的止咳活性部位，其乙醇提取物具有明显的止咳作用；其次对乙醇提取部位的化学成分进行了系统的分离，从中分离鉴定了8个化合物，分别为豆笛-4-烯-3-酮(1),麦角辎-5,7,22-三烯-33-醇(2),obtucarbama.teA(3),obtucarbamateB(4),neotigogenin(5),偶氮-2,2’-双[Z-(2,3-二羟基-4-甲基-5-甲氧基)苯基乙烯](6),dimethyl{

4、[carbonylbis(azanediyl)]bis(2-methyl-5,1-phenylene)}dicarbamate(7),彳斛皮素-3-0-3-D-毗喃葡萄糖昔(8),以上化合物均为首次从该植物中分离得到；最后对分离得到的量大的化合物3,4及6进行了活性测试,结果显示3个化合物均有止咳作用，其中化合物6的止咳活性与阳性对照相当。1材料昆明种小鼠(SPF级)，雌雄对半，体重18〜22g,由长沙东创实验动物科技服务部提供，合格证号SCXK(湘)2009-0012o磷酸可待因口服液III,香港万辉药业有限公司，批号110401。乙醇为食用级，其余试剂均为分析纯试剂，重庆川东化工(

5、集团)有限公司化学试剂厂。X-4型熔点仪，温度未校正，北京泰克仪器有限公司生产；ZF7三用紫外分析仪，购于巩义市予华仪器有限责任公司；INOVO400MHz型核磁共振波谱仪（TMS为内标），美国Varian公司生产，JEOLECX-500MHz型核磁共振波谱仪（TMS为内标），日本电子株式会社生产；HP5973质谱仪，美国安捷伦公司生产；柱色谱硅胶（200〜300目）和薄层用硅胶GF254,青岛海洋化工厂生产；SephadexLH-20,购自Pharmacia公司。药材于2010年8月采自贵州省安顺市，原植物经贵州师范学院朱富寿教授鉴定为百尾参D.cantoniense,标本保存于贵州

6、师范学院药用植物研究所。2方法2.1提取物的制备取上述2份百尾参药材粗粉各40g,精密称定，分别加入8倍量食用乙醇、蒸馆水加热回流提取2次，每次3h,合并2次滤液，减压浓缩至浸膏，精密称定，计算各溶剂提取物得膏率：乙醇5.7%,水25.8%o2.2止咳活性研究[11]取小鼠90只，雌雄各半，随机分成9组，即乙醇提取物高、低剂量组，水提取物高、低剂量组（生药量5.80,1.25g-kg-1）,生理盐水对照组（空白对照组），磷酸可待因口服液阳性对照组（300.0mg•kg-1）,单体化合物3,4,6组(300.0mg•kg-1),每组10只。每天灌胃(ig)给药1次，给药体积按20mL•k

7、g-1,连续给药6do末次给药1h后，利用氨水气雾引咳法，用超生雾化器均匀地雾化浓氨水于倒扣的500mL密闭玻璃钟罩内，然后迅速将小鼠放入钟罩内，喷雾5s,观察记录小鼠的咳嗽潜伏期(从放入开始至咳嗽的时间)和2min内咳嗽的次数。结果以土S表示，实验数据采用SPSS18.0统计软件进行统计学处理，采用单因素方差分析，显著性检验标准为P3结果与分析3.1百尾参提取物及单体化合物对氨水气雾致小鼠咳嗽的影响实验结果表明，阳性药物、水及食用乙醇提取物高