21甾体成分探究'-- 青阳参中c21甾体成分探究

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1、21甾体成分探究’>青阳参中C21甾体成分探究　　[摘要]该文用硅胶，ODS，MCI柱色谱和半制备型HPLC等方法对青阳参的氯仿萃取中含有的C21甾体类成分进行了系统的分离纯化研究，并结合波谱数据对该类成分进行了结构确认。从青阳参氯仿萃取物分离到11个C21甾体类化合物，分别为青阳参苷乙（1），告达亭-3-O-β-D-加拿大麻吡喃糖基-（1→4）-β-D-夹竹桃吡喃糖基-（1→4）-β-D-加拿大麻吡喃糖基-（1→4）-β-D-加拿大麻吡喃糖苷（2），告达亭-3-O-β-D-夹竹桃吡喃糖基-（1→4）-β-D-夹竹桃吡喃糖基-（1→4）-β-D-加拿大麻吡喃糖基-（1→4）-β-D-加拿大

2、麻吡喃糖苷（3），告达亭-3-O-β-D-夹竹桃吡喃糖基-（1→4）-β-D-毛地黄毒吡喃糖基-（1→4）-β-D-加拿大麻吡喃糖苷（4），青阳参苷O（5），加加明-3-O-β-D-夹竹桃吡喃糖基-（1→4）-β-D-加拿大麻吡喃糖基-（1→4）-β-D-加拿大麻吡喃糖苷（6），sinomarinosideB（7），mucronatosidesC（8），wallicosideJ（9），stephanosideH（10），青阳参苷元-3-O-β-D-夹竹桃吡喃糖基-（1→4）-β-D-加拿大麻吡喃糖基-（1→4）-β-D-毛地黄毒吡喃糖苷（11）。26除化合物1，4和5外其他成分均为首次从该

3、植物中分离得到的C21甾体类化合物。[关键词]青阳参；C21甾体；青阳参苷乙[收稿日期]2013-10-23[基金项目]国家自然科学基金项目（31160065）[通信作者]李宝才，教授，博士，研究方向为天然产物开发利用，E-mail：baocaili@hotmail.com；李鹏，助理教授，博士，研究方向中药活性评价及质量控制，E-mail：pli1978@hotmail.com[作者简介]李祥，硕士研究生，E-mail：xiangliam@163.com青阳参Cynanchumotophyllum26Schneid为萝藦科鹅绒藤属植物主要分布于我国西南部，是著名的云南民间药物。其药用部位

4、为根部，具有祛风湿、益肾健脾之功效，主要用于治疗风湿痹疼、肾虚腰疼、腰肌劳损、蛇犬咬伤等[1]。在云南纳西族和白族地区，青阳参主要用于治疗癫痫[2]。目前青阳参的氯仿提取物已开发成为治疗癫痫的上市药物，其主要有效成分为C21甾体类化合物[3-4]。20世纪80年代至今，木全章、赵益斌等人先后从青阳参中分离得到40多个C21甾体类化合物[4-8]。国内有学者研究发现：青阳参有明显的抗癫痫作用，且具有作用时间持久、副作用少，与其他抗惊厥药联用无明显不良反应的特点，对顽固性癫痫大发作不失为一个有前途的新的抗癫痫药，其中青阳参苷甲和青阳参苷乙是青阳参中抗癫痫的活性成分之一[9]。但总的来说，青阳参

5、植物抗癫痫的活性成分研究仍集中在总提取物或有效部位（如总苷）层面。为进一步明确其中单体活性成分，本论文采用多种分离方法从其根部的氯仿萃取物中分离并鉴定出11个C21甾体类化合物。除化合物1，4和5外其他成分均为首次从青阳参植物中分离到。1材料BRUKERDRX-500型核磁共振仪内标物为TMS；柱色谱硅胶（100～200，200～300目）和薄层色谱硅胶GF254均为青岛海洋化工厂产品。显色剂为10%的硫酸-乙醇。半制备HPLC为LC3000液相色谱仪；半制备柱为ZorbaxSB-C18（9.4mm×250mm，0.5μm）。青阳参药材购自昆明市菊花村中药材市场并由云南省中医中药研究所郭世

6、民研究员鉴定为青阳参C.otophyllum的干燥块根。2提取与分离青阳参干燥根9.0kg粉碎后用75%乙醇在80℃水浴中回流提取3次每次4h。滤液浓缩成浸膏加水混悬依次用石油醚脱、氯仿萃取得到氯仿萃取物240.0g。取氯仿萃取物200.0g经硅胶柱色谱（氯仿-甲醇40∶1～10∶1）得到Fr.1（40.0g），Fr.2（55.0g），Fr.3（62.0g）和Fr.4（30.0g）。Fr.1（6.0g）经MCI柱色谱（甲醇-水85∶15～80∶20）得到Fr.1a，Fr.1b，Fr.1c和Fr.1d。26Fr.1a经半制备HPLC（甲醇-水85∶15）得到3（21.4mg，tR=8.5mi

7、n）。Fr.1c经ODS柱色谱（甲醇-水83∶17）得到Fr.1c1，Fr.1c2和Fr.1c3其中Fr.1c2经半制备HPLC（甲醇-水82∶18）得到1（10.5mg，tR=16.4min）和4（14.0mg，tR=25.4min）。Fr.2（6.0g）经MCI柱色谱（甲醇-水83∶17）得到Fr.2a，Fr.2b和Fr.2c。Fr.2a经半制备HPLC（甲醇-水81∶19）得到2（30.4mg，tR=20.8min