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《冬虫夏草菌菌丝体提取物对lps诱导炎症反应抑制作用》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、论文题目：冬虫夏草菌菌丝体提取物对LPS诱导的炎症反应的抑制作用学科专业：微生物学学位申请人：何莉指导教师：杨晓彤中文摘要本研究通过建立脂多糖（LPS）刺激小鼠腹腔巨噬细胞RAW264.7的炎症模型，从体外研究冬虫夏草菌丝体——中国被毛孢粗提取物的抗炎作用，并对其抗炎机理做初步探索，为进一步体内研究，临床研究和医药应用提供理论和实践依据。同时也为冬虫夏草菌丝体的市场开拓提供参考。本文采用MTT法测定冬虫夏草菌丝体水提物和乙醇提取物以及乙醇提取物的分级提取物——石油醚提取物，氯仿提取物，乙酸乙酯提取物以及提取物残渣
2、在一定浓度范围内对细胞的毒性作用，并以此样品浓度为依据，用Griess法测定样品对脂多糖刺激下小鼠腹腔巨噬细胞RAW264.7产生的一氧化氮（NO）的影响，采用免疫印迹法（WesternBlot）检测冬虫夏草水提物对脂多糖刺激下细胞产生的一氧化氮合酶（iNOS），环氧化酶（COX-2）作用的时效关系和量效关系。并用免疫印迹法研究冬虫夏草水提物对脂多糖刺激下细胞产生的p38蛋白（MAPK信号通路）和p56蛋白（NF-κB信号通路）的作用的时效关系和量效关系。研究结果表明：冬虫夏草水提物与乙醇提取物的各个浓度（500
3、,250,100,10μg/mL）对巨噬细胞无细胞毒作用，并对于脂多糖刺激下小鼠腹腔巨噬细胞产生的一氧化氮有下调作用，并具有量效关系。乙醇提取物的分级提取物中浓度为100μg/mL时，四种提取物及提取物残留对LPS刺激下的RAW264.7产生的NO有下调作用。其中以氯仿提取物的下调作用为最强。浓度为10μg/mL时，只有氯仿提取物对NO有下调作用。以冬虫夏草水提物为样品研究iNOs蛋白发现浓度为100μg/mL,作用时间为6h时，样品对iNOs的下调作用最强（相对于12h，24h）；在一定浓度范围内（25,50,
4、100μg/mL）,样品均可下调iNOs的产生并呈现量效关系。以冬虫夏草水提物为样品研究COX-2蛋白发现浓度为100μg/mL,作用时间为12h时（相对于6h，24h），为样品对COX-2的下调作用最强；在一定浓度范围内（50,100μg/mL）,样品均可下调COX-2的产生并呈现量效关系。以冬虫夏草水提物为样品研究p38蛋白发现浓度为100μg/mL，样品对p38的量没有影响，处理时间为15min时，p-p38的下调作用最强（相对于30min）；在一定浓度范围内（25，50,100μg/mL）,样品对于p38
5、没有影响，均可下调p-p38的产生并呈现量效关系。综上所述，冬虫夏草菌丝体提取物具有明显的体外抗炎作用。关键词：冬虫夏草菌丝体提取物;LPS炎症模型;小鼠腹腔巨噬细胞;炎症因子AbstractThestudyisbasedontheinflammationmodelinwhichlipopolysaccharide(LPS)isusedtostimulatemouseperitonealmacrophageRAW264.7.Itstudiestheinvitroinflammationeffectsofextra
6、ctsfromOphiocordycepssinensiswhichisprovedtobetherealanamorphofprecioustraditionalChineseherbalmedicine——Cordyceps.Meanwhile,theanti-inflammationmechanismofaqueousextractispilotstudied.Thisresearchprovidetheoreticalandpracticalbasementtofurtherinvivostudy,cli
7、nicalstudy,clinicalmedicamentaswellastheexploitationofOphiocordycepsSinensismarket.Inthisstudythecytotoxiceffectsofsixextracts(ethanolextract,aqueousextractandfractionatedextractsofethanolextract——petroleumetherextract,chloroformextract,aceticetherextract)and
8、theresidualonmouseperitonealmacrophageareexaminedbyMTTinaproperconcentrationrange.ThentheimpactonnitricoxidereleasingisdeterminedbyGriessmethod.WesternBlotisusedtoexaminebothtime-effectan
