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1、【实验】生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定（附实验改进）斐林试剂鉴定可溶性还原糖 斐林试剂由质量浓度为0.1g/mL的氢氧化钠溶液和质量浓度为0.05g/mL的硫酸铜溶液配制而成,二者混合后,立即生成淡蓝色的Cu(OH)2沉淀。Cu(OH)2与加入的葡萄糖在加热的条件下,能够生成砖红色的Cu2O沉淀,而葡萄糖本身氧化成葡萄糖酸。本实验中，用斐林试剂只能检验生物组织中还原糖存在与否，而不能鉴定非还原性糖。现象：溶液的颜色变化过程为:浅蓝色棕色砖红色(沉淀)。 本实验最理想的实验材料是含糖量较高的生物组织(或器官),而且组织的颜色较浅,或近于白色的,
2、如苹果和梨的果实。斐林试剂的配制：甲液—质量浓度为0.1g/mL的氢氧化钠溶液；乙液—质量浓度为0.05g/mL的硫酸铜溶液使用时临时配制,将4～5滴乙液滴入2mL甲液中,配完后立即使用用于鉴定脂肪的实验材料准备：实验材料最好选择富含脂肪的种子,如花生种子(取其子叶)。供实验用的花生种子,必须提前浸泡3～4h。浸泡时间短了,不容易切成片浸泡时间过长,则组织太软,切下的薄片不易成形。现象：苏丹Ⅲ染液遇脂肪的颜色反应为橘黄色,苏丹Ⅳ染液遇脂肪的颜色反应为红色。因苏丹Ⅳ染液与脂肪的亲和力比较强,所以,染色的时间应比较短,一般为1min左右。蛋白质的鉴定原
3、理：鉴定生物组织中是否含有蛋白质时,常用双缩脲法,使用的是双缩脲试剂。双缩脲试剂的成分是质量浓度为0.1g/mL的氢氧化钠溶液和质量浓度为0.01g/mL的硫酸铜溶液。蛋白质可与双缩脲试剂发生紫色反应。用于鉴定蛋白质的实验材料准备：实验材料最好选用富含蛋白质的生物组织(或器官),如大豆,鸡蛋清。如用大豆,必须提前浸泡1～2d,这样容易研磨成浆（也可用现成的豆浆）。如用鸡蛋清，要先稀释。双缩脲试剂的配制：取10g氢氧化钠放入量筒中,加水至100mL,待充分溶解后倒入试剂瓶中,配成质量浓度为0.1g/mL的氢氧化钠溶液,瓶口塞上胶塞,贴上标签,写上试剂
4、A。取1g硫酸铜放入量筒中,加水至100mL,待充分溶解后倒入试剂瓶中,配成质量浓度为0.01g/mL的硫酸铜溶液(蓝色)。瓶口塞上胶塞,贴上标签,写上试剂B。注意：（1）关于鉴定还原糖的实验，在加热试管中的溶液时，应该用试管夹夹住试管上部，并放入盛开水的大烧杯中加热。注意试管底部不要接触烧杯底部，同时试管口不要朝向实验者，以免试管内溶液沸腾时冲出试管，造成烫伤。如果试管内溶液过于沸腾，可以上提试管夹，使试管底部离开大烧杯中的开水。（2）做鉴定还原糖和蛋白质的实验时，在鉴定之前，可以留出一部分样液，以便与鉴定后的样液的颜色变化作对比，这样可以增强说
5、服力。（3）斐林试剂的甲液和乙液混合均匀后方可使用，切勿将甲液和乙液分别加入组织样液中检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质的实验的改进长沙市第十六中学王扬利检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质的实验，是高中老教材中的第一个实验，也是新教材中的第二个实验。初中实验以形态解剖学实验为主，高中实验以生物化学实验为主，这个实验实现了这种内容的转变。由于是第一个生化实验，学生的期望值和积极性极高。一、原实验的不足1、需要水浴加热2分钟。如果教师不提前准备好热水加温过程更长。2、没有对照实验，没有对照怎么能证明水浴加热后的砖红色沉淀就是还原糖还原而成，为什么不可能
6、是Cu(OH)2自身分解产生的呢？3、脂肪鉴定实验中，显微镜的操作、子叶切片都需要很长时间。特别是对于才进高中的学生而言，要求所有的学生都能熟练运用徒手切片技术也不现实。4、在学生对生物染色剂的染色特性了解不深的情况下，很难指出显微镜下哪些黄色或红色的东西就是脂肪。二、实验的改进之处1、选生活中常见且操作起来很方便的液态状的牛奶，替换书上的苹果、花生和鸡蛋三类实验材料，节省实验时间与消耗，2、减少实验器材的使用，从而简化实验过程。如：不使用水浴加热、不使用显微镜等。3、改进实验方法，节省时间与试剂。如：糖的鉴定中，使用两只试管同时直接加热法，实验只
7、需几滴斐林试剂，且反应也只有约30秒，这样既节省了时间与试剂，而且起到了很明显的对照作用。4、改验证实验为探究实验。如：给予食用油与水，用苏丹Ⅲ染色观察现象。三、教学过程1、给予实验任务现有一瓶“牛奶”，请学生用实验来探究牛奶中是否含有说明书中所说的糖、蛋白质、脂肪三类成份。2、还原性糖实验2．1实验原理：牛奶中的乳糖是一种醛糖（由葡萄糖+半乳糖构成），能还原斐林试剂（0.1%NaOH,5%CuSO4）中的Cu2+产生砖红色Cu20沉淀。2．2实验过程①取2块试管，编号水、牛奶；②滴加4滴斐林试剂A液，再滴加4滴斐林试剂B液，摇匀；③再分滴加7滴水
8、、牛奶摇匀；④同时用两个试管夹夹着在酒精灯上均匀加热30秒；⑤观察并记录现象（牛奶显现砖红色）。3、蛋白质实验3．1实验原
