胶质瘤干细胞的培养和分化研究

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1、万方数据四川大学学报(医S学ci版)2006；37(1)JSiehuanUniv(MedScEdi)：14l一144_⋯，一⋯-●胶质瘤干细胞的培养和分化研究*杨立业1，汪朝阳1，郑佳坤1，温建成2，李文玉1，黄晓平21．广东省潮州市中心医院神经外科(潮州521021)；2．广东省潮州市中心医院病理科【摘要】目的探讨人类胶质瘤干细胞的体外培养、传代和分化。方法采用机械方法从胶质瘤组织中分离细胞，应用N2培养基进行培养，碱性成纤维细胞生长因子和表皮生长因子刺激细胞扩增；应用免疫组织化学染色对培养的细胞及

2、其分化的细胞进行鉴定。结果从胶质瘤组织当中成功培养出人类的胶质瘤干细胞，培养条件下呈悬浮状态生长，形成神经球，绝大多数的细胞表达波形蛋白和巢蛋白两种神经干细胞的标志物；这种细胞可分化为神经元和星型胶质细胞。结论体外的培养条件下，可从胶质瘤组织中培养出于细胞，能够分化为神经元和星型胶质细胞，为胶质瘤的深入研究奠定基础。【关键词】干细胞胶质瘤细胞培养【中圈分类号】R35，R74Long-termCultureandDifferentiationofHumanGliomaStemCellsYANGLi-ye

3、，WANGChao—yang，ZHENGJia-kun，WENJian-cheng，LIWen-yu，HUANGXiao-ping．DepartmentofNeurosurgery，ChaozhouCentralHospital，Chaozhou521021，China[Abstract]ObjectiveToexplorethecultureandsubcultureconditionsforgliomastemcells(GSCs)andtoinvestigatethedifferentiatio

4、npotentialofGSCs．MethodsThecellsfromhumangliomaweremechanicallydissociated．CellswereculturedinN2orB27mediumwithbasicfibroblastgrowthfactor(bFGF)andepidermalgrowthfactor(EGF)，andtheywereidentifiedbyimmunocytochemistry．ResultsGliomastemcellsfromhumangliom

5、ahavebeensuccessfullycultured．Theyformedtypicalneurospheresinsuspension，andtheycouldbeculturedandpassagedsteadilyinvitro．Themajoritiesofthecellsexpressedvimentinandnestin，whichwerethemarkersforneuralstemcells．Theycoulddifferentiateintoneuronsandastrocyt

6、es，andexpressglialfibrillaryacidicproteinandbetailjtubulinrespectively．ConclusionHumangliomastemceilscouldbeculturedfromgliomasinvitro，andtheycoulddifferentiateintoneuronsandastrocytes，thusprovidingabasisforfurtherstudies．[Keywords]StemcellGliomaCellcul

7、ture胶质瘤是颅内最常见的肿瘤，病因不清，切除后容易复发，放射治疗和化疗效果不理想。近年来从成年动物的脑组织中可以培养出神经于细胞[1]，越来越多的事实支持胶质瘤起源于中枢神经内存在的内生性集落细胞，这种细胞可能就是神经干细胞，但尚未找到直接证据。神经干细胞、正常胶质细胞和胶质瘸细胞三者之间是否可以转化，以及如何转化的机制，这方面的研究对胶质瘤发病机制的阐明和治疗都有明确的理论和实际意义。我们从人类的胶质瘤组织中培养出类似神经干细胞的前体细胞，并能够分化为神经元和星形胶质细胞。现报道如下。1材料和方

8、法1．1材料B27和N2添加剂、DMEM／F12培养基*广东省自然科学基金(编号012452，020001，04007929)资助(Gibco／BRL)；碱性成纤维细胞生长因子(basicfibroblastgrowthfactor，bFGF)、表皮生长因子(epidermalgrowthfactor，EGF)和多聚赖氨酸均为Sigma公司产品；抗波形蛋白单克隆抗体(Dako，1：100)、抗神经微丝200(NF200)单克隆抗体(Dako，1：100)