动物源食品中四环素类抗生素残留高效液相色谱检测方法的研究

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1、陈蔷河南农业人学2009届兽医硕_i：学位论文摘要摘要四环素类抗生素是由链霉菌产生或经半合成制取的一类广谱抗生素，主要有土霉素(Oxytetracycline，OTC)、四环素(Tetracyline，TC)、金霉素(Chlortetracylcine，CTC)并tl多西环素(Doxycycline，DOTC)，由于其广谱的抗菌活性和药动学特征而被广泛用米治疗畜禽疾病。由于一些养殖户为追求经济利益，违规长期超量使JHj这类抗生素，从而使药物在动物组织中残留，其直接后果是耐药菌株逐年增加，不仅使其疗效降低，也使得其他

2、抗生素的使用受到了限制。另一方面，药物在动物源食品中残留超标，直接危害着人民的身体健康。因此，为了有效地监控四环素类抗生素的残留，必需建立起相应的检测监控手段和方法。本论文针对我国动物源食品中痕量抗生素残留分析方法的不足，以土霉素、四环素、金霉素、多谣环素等4种四环素类抗生素为主要对象，研究了动物组织中4种四环素类抗生素的提取、净化处理技术，建立了准确测定动物源食品(猪肌肉、猪肝脏、猪’肾脏、鸡肌肉、鸡肝脏、鸡肾脏、鸡蛋)中4种四环素类抗生素残留的高效液相色谱法(HPLC)。样品前处理过程采用液固提取和圊相萃取(S

3、PE)净化，以pH4．0的Na2EDTA．Mcllvaine缓冲液为提取液，提取动物源食品中的四环素类抗生素，并用硫酸溶液和钨酸钠溶液沉淀动物组织中蛋白质和脂肪，采用OasisHLB柱来分离和净化动物源食品中的四环素类抗生素。用反相高效液相色谱法在检测波长350llm的条件下，以0．01mol／L三氟乙酸．乙腈为流动相梯度洗脱，测定动物源食品中的土霉素、四环素、金霉素和多西环素。在最佳的实验条件下，4种四环素类抗生素的检测限在猪、鸡肌肉和鸡蛋组织中均为10I_tg／kg，在猪、鸡肝脏和肾脏组织中均为25p．g／kg

4、；4种四环素类抗生素的定量限在猪、鸡肌肉组织中均为20I．tg／kg，在猪、鸡肝脏、肾脏和鸡蛋组织中均为50ktg／kg。在LOQ-2MRL的添加浓度范围内，4种四环素类抗生素的平均同收率均为60％110％，批内、批间变异系数均小于11％。采用本试验所述方法对57批抽检的动物源食品中四环素类抗生素残留进行检测，对阳性样品参照国家规定的检测标准进行方法比较，结果表明本试验方法测得的四环素类抗生素的回收率高于采崩GB／T21317-2007和GB／T5009．116．2003的回收率。研究结果表明本方法稳定可靠，适合动

5、物源食品中土霉素、四环素、金霉素、多西环素多残留的测定。关键词：四环素类抗生素；动物源食品：残留；高效液相色谱DeterminationofTetracyclineAntibioticsResiduesinAnimal．derivedFoodbyHPLCSupervisor：AssociateProf．DuXiang-dangMasterCandidate：ChenQiangABSTRACTTetracyclineswereaclassofbroad．spectrumantibioticsproducedbvstr

6、eptomycesorbysemi—synthesis，includingoxytetracycline，tetracycline，chlortetracyclineanddoxycycline，etc．Theyhadbeenwidelyusedinthepreventionandtreatmentofdiseasesinpoultryandlivestockbecauseoftheirbroad．spectrumantibacterialactivityandpharmacokineticcharacterist

7、ics．Inordertopursuithighprofits，tetracyclineswereillegallyused．Ontheonehand，thiswouldleadtotheemergenceofthemoreandmoreresistancestrainsdirectlv．Consequently,notonlytheeffectivenessoftetracyclineswasreduced．butalsotheuseofotherantibioticswassubjectedtoconstrai

8、nt．Ontheotherhand．thisisaisohazardoustopeople’shealthduetothedrugresiduesinanimalproducts．Therefore，tomonitortheresiduesoftetacyclinesinanimalproducts，themethodfordeterminationofth