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1、吉林农业大学学报2010,32(6):666~669http://xuebao.jlau.edu.cnJournalofJilinAgriculturalUniversityEmail:jlndxb@vip.sina.com应用RT-PCR方法快速诊断猪繁殖与呼吸综合征的研究1,21**22212王鑫,周铁忠,李菲,段晓波,王开,高慎阳,胡桂学1.辽宁医学院畜牧兽医学院,锦州121001;2.吉林农业大学动物科技学院,长春130118摘要:参照国内外已发表的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的ORF5基因序列设计1对引物,建立检测PRRSV的R
2、T-PCR方法,并对长春周边不同地区10个猪场送检的20份病料进行检测。特异性试验、敏感性试验和重复性试验结果表明,此方法可以用于临床检测PRRSV。应用该方法从3个猪场的4份病料检出PRRSV,证实长春周边地区存在PRRSV感染。关键词:猪繁殖与呼吸综合征病毒;ORF5基因;反转录聚合酶链式反应中图分类号:S85828;S8553文献标识码:A文章编号:10005684(2010)06066604RapidDiagnosisofPorcineReproductiveandRespiratorySyndromewiththeRT-PCR1,
3、212221WANGXin,ZHOUTiezhong,LIFei,DUANXiaobo,WANGKai,GAOShenyang,HU2Guixue1.CollegeofAnimalScienceandVeterinaryMedicine,LiaoningMedicalUniversity,Jinzhou121001,China;2.CollegeofAnimalScienceandTechnology,JilinAgriculturalUniversity,Changchun130118,ChinaAbstract:Thisresearchhasdesig
4、nedapairofprimersbasedontheORF5geneofthePRRSVsequencespublishedtosetupaRT-PCRmethodinordertodetectPRRSV.Wehavedetected20pathologicmaterialsviathismethodfrom10differentpigfarmsaroundChangchun.IthasbeenindicatedthatthedetectingmethodofRT-PCRcanapplytoclinicaldetectionthroughspecificit
5、ytest,sensitivitytestandrepeatabilitytest.Theresultsofthisresearchdetected4pathologicmaterialsPRRSVpositivefrom3farmsconfirmingthatPRRSVinfectiondoesexistaroundChangchun.Keywords:porcinereproductiveandrespiratorysyndromevirus;ORF5gene;RT-PCR猪繁殖与呼吸综合征(Porcinereproductiveand[2]员。该科成员
6、几经变化,曾被列入披膜病毒科,respiratorysyndrome,PRRS)是由猪繁殖与呼吸综因为该病毒粒子外观与猪瘟病毒较相似,但后经合征病毒(PRRSV)引起的猪RNA病毒病,以母猪研究其内涵(基因组结构)与目前分类的黄病毒科发热、厌食与流产、死产、木乃伊胎和产弱仔猪等中的瘟病毒属不同,所以国际病毒分类委员会繁殖障碍以及仔猪的呼吸道症状和高死亡率为特(ICTV)第9届会议的六次报告中将此类病毒特成[1]征。PRRSV为动脉炎病毒科、动脉炎病毒属成立一个独立属,称之为动脉炎病毒属,并且在第基金项目:辽宁省财政厅农业技术推广项目(2008363),辽宁省教育
7、厅科学技术基金项目(L2010265),吉林省科技发展计划项目(20090242)作者简介:王鑫,男,硕士,主要从事动物病毒学研究。收稿日期:20091202修回日期:20100406通讯作者王鑫等:应用RT-PCR方法快速诊断猪繁殖与呼吸综合征的研究66710届国际病毒学会议上正式将该属提升为动脉本三洋公司)、UNICAMUV300型分光光度计、[2]炎病毒科。TC-48/TPCR仪、DY300型低压电泳仪、UVPGDS猪繁殖与呼吸综合征病毒存在2个基因型,-8000凝胶成像系统等。即以Lelystadvirus(LV)为原型毒株的欧洲型(11
8、2方法
