akt2通过pkm2调控卵巢癌细胞增殖作用的-研究

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1、英文缩略词表缩写英文全称中文全称BCAbicinchoninincacid二喹啉甲酸bpbasepair碱基对BSABovineSerumAlbumin牛血清白蛋白APSAmmoniumpersμlfate过硫酸铵cDNAcomplementarydeoxyribonucleicacid互补脱氧核糖核酸DAB3,3N-DiaminobenzidineTertrahydrochloride辣根过氧化物酶的常用底物ddH2ODoubledistillatedwater双蒸水PCRpolymerasechai

2、nreaction聚合酶链反应dNTPdeoxyribonucleosidetriphosphate三磷酸脱氧核糖核苷gGravitationalacceleration重力加速度DMSODimethylsμlfoxide二甲基亚砜AmpAmmonium氨苄青霉素EBethidiumbromide溴化乙啶EPEppendorf离心管MTT3-（4,5）-dimethylthiahiazo（-z-yl）-3-（4-5二甲基噻唑）-2IHCImmunohistochemistry免疫组化FBSFetalbo

3、vineserum胎牛血清DMEMDμlbecco´smodifiedEagle´smedium改良的Eagle培养基HRPHorseRadishPeroxidase辣根过氧化物酶EGFEpidermalGrowthFactor表皮生长因子kbkilobasepair千碱基对kDKilodalton千道尔顿minminute分ODOpticaldensity光密度DEPCdiethylpyrocarbonate焦碳酸二乙酯-1-福建医科大学2012级硕士研究生毕业论文英文缩略词表缩写英文全称中文全称PA

4、GEPolyacrylamidegelelectrophoresis聚丙烯酞胺凝胶电泳PBSphosphate-bufferedsaline磷酸盐缓冲生理盐水RNARibonucleicAcid核糖核酸siRNASmallinterferingRNA小干涉RNArpmRollsperminute每min转数SDSsodiumdodecylsμlfate十二烷基硫酸钠RNARibonuclease核糖核酸酶ssecond秒TAETris-acidelectrophoresisbufferTris-乙酸盐酸

5、缓冲液TrisTris(hydroxylmethyl)aminomethane三羟甲基氨基甲烷TMEDATetramethylethylenediamine四甲基乙二胺TBSTertiarybutyldimethylsilane叔丁基二甲基硅烷-2-福建医科大学2012级硕士研究生毕业论文摘要卵巢癌是最致命的妇科恶性肿瘤在美国，在2013年约有22240新病例被确诊，其中有14030名女性死于该疾病。卵巢癌是经常被称为“沉默的杀手”，因为大多数情况下，被确诊时已是临床晚期，已经成为威胁妇女生命和健康的主

6、要恶性肿瘤。在查阅大量相关文献的基础上，本课题主要应用免疫组化技术，基因克隆、慢病毒包装和转导，免疫印迹、siRNA敲减、MTT等技术，探讨蛋白激酶B（AKT2）通过PKM2调控卵巢癌细胞增殖的作用，为发现有效的药物治疗作用的靶点奠定重要基础。本课题第一部分首先应用免疫组化技术初步验证人类卵巢癌组织中AKT2与PKM2表达异常是否存在相关性，收集卵巢癌组织病例116例和卵巢良性肿瘤周边正常组织50例，测定癌组织及卵巢良性肿瘤周边的正常组织中AKT2和PKM2的表达，统计学方法分析及判断AKT2在癌及正常

7、组织中的表达是否存在差异，并通过对比PKM2的表达，总结出AKT2和PKM2与卵巢癌发展及恶变的相应关系，在组织样本中验证AKT2在卵巢癌中的表达是否与PKM2的表达存在着关联。结果表明：AKT2在100（100/116）例卵巢癌组织中过表达，过表达率为86.2%，AKT2仅在4例（8%）卵巢良性肿瘤周边正常组织中表达，Fisher’s精确检验检验结果表明：AKT2在卵巢癌和卵巢良性肿瘤周边正常组织中表达差异具有统计学意义（P<0.001），AKT2和PKM2在卵巢癌组织中的表达具有相关性（R=0.50

8、5）（P<0.001）。以第一部分的结果为依据，本课题的第二、三部分重点探讨AKT2通过PKM2调控卵巢癌细胞的生物学行为。本课题第二部分应用本实验室原有的模板扩增AKT2基因cDNA，以XhoI和XbaI酶切位点克隆入慢病毒表达载体（pLVX-Neo-IRES-ZsGreen）中，测序鉴定正确后同慢病毒包装辅助质粒混合物共转染293T细胞，慢病毒包装成功后再用AKT2重组的慢病毒液转导卵巢癌SKOV3细胞，Western-Bolt鉴定并筛