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时间:2019-02-03
《akt2通过pkm2调控卵巢癌细胞增殖作用的-研究》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、英文缩略词表缩写英文全称中文全称BCAbicinchoninincacid二喹啉甲酸bpbasepair碱基对BSABovineSerumAlbumin牛血清白蛋白APSAmmoniumpersμlfate过硫酸铵cDNAcomplementarydeoxyribonucleicacid互补脱氧核糖核酸DAB3,3N-DiaminobenzidineTertrahydrochloride辣根过氧化物酶的常用底物ddH2ODoubledistillatedwater双蒸水PCRpolymerasechai
2、nreaction聚合酶链反应dNTPdeoxyribonucleosidetriphosphate三磷酸脱氧核糖核苷gGravitationalacceleration重力加速度DMSODimethylsμlfoxide二甲基亚砜AmpAmmonium氨苄青霉素EBethidiumbromide溴化乙啶EPEppendorf离心管MTT3-(4,5)-dimethylthiahiazo(-z-yl)-3-(4-5二甲基噻唑)-2IHCImmunohistochemistry免疫组化FBSFetalbo
3、vineserum胎牛血清DMEMDμlbecco´smodifiedEagle´smedium改良的Eagle培养基HRPHorseRadishPeroxidase辣根过氧化物酶EGFEpidermalGrowthFactor表皮生长因子kbkilobasepair千碱基对kDKilodalton千道尔顿minminute分ODOpticaldensity光密度DEPCdiethylpyrocarbonate焦碳酸二乙酯-1-福建医科大学2012级硕士研究生毕业论文英文缩略词表缩写英文全称中文全称PA
4、GEPolyacrylamidegelelectrophoresis聚丙烯酞胺凝胶电泳PBSphosphate-bufferedsaline磷酸盐缓冲生理盐水RNARibonucleicAcid核糖核酸siRNASmallinterferingRNA小干涉RNArpmRollsperminute每min转数SDSsodiumdodecylsμlfate十二烷基硫酸钠RNARibonuclease核糖核酸酶ssecond秒TAETris-acidelectrophoresisbufferTris-乙酸盐酸
5、缓冲液TrisTris(hydroxylmethyl)aminomethane三羟甲基氨基甲烷TMEDATetramethylethylenediamine四甲基乙二胺TBSTertiarybutyldimethylsilane叔丁基二甲基硅烷-2-福建医科大学2012级硕士研究生毕业论文摘要卵巢癌是最致命的妇科恶性肿瘤在美国,在2013年约有22240新病例被确诊,其中有14030名女性死于该疾病。卵巢癌是经常被称为“沉默的杀手”,因为大多数情况下,被确诊时已是临床晚期,已经成为威胁妇女生命和健康的主
6、要恶性肿瘤。在查阅大量相关文献的基础上,本课题主要应用免疫组化技术,基因克隆、慢病毒包装和转导,免疫印迹、siRNA敲减、MTT等技术,探讨蛋白激酶B(AKT2)通过PKM2调控卵巢癌细胞增殖的作用,为发现有效的药物治疗作用的靶点奠定重要基础。本课题第一部分首先应用免疫组化技术初步验证人类卵巢癌组织中AKT2与PKM2表达异常是否存在相关性,收集卵巢癌组织病例116例和卵巢良性肿瘤周边正常组织50例,测定癌组织及卵巢良性肿瘤周边的正常组织中AKT2和PKM2的表达,统计学方法分析及判断AKT2在癌及正常
7、组织中的表达是否存在差异,并通过对比PKM2的表达,总结出AKT2和PKM2与卵巢癌发展及恶变的相应关系,在组织样本中验证AKT2在卵巢癌中的表达是否与PKM2的表达存在着关联。结果表明:AKT2在100(100/116)例卵巢癌组织中过表达,过表达率为86.2%,AKT2仅在4例(8%)卵巢良性肿瘤周边正常组织中表达,Fisher’s精确检验检验结果表明:AKT2在卵巢癌和卵巢良性肿瘤周边正常组织中表达差异具有统计学意义(P<0.001),AKT2和PKM2在卵巢癌组织中的表达具有相关性(R=0.50
8、5)(P<0.001)。以第一部分的结果为依据,本课题的第二、三部分重点探讨AKT2通过PKM2调控卵巢癌细胞的生物学行为。本课题第二部分应用本实验室原有的模板扩增AKT2基因cDNA,以XhoI和XbaI酶切位点克隆入慢病毒表达载体(pLVX-Neo-IRES-ZsGreen)中,测序鉴定正确后同慢病毒包装辅助质粒混合物共转染293T细胞,慢病毒包装成功后再用AKT2重组的慢病毒液转导卵巢癌SKOV3细胞,Western-Bolt鉴定并筛
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