细胞增殖调控与癌细胞

《细胞增殖调控与癌细胞》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、第十四章细胞增殖调控与癌细胞G1期检验点：酵母——Start；动物细胞——RestrictionPoint检验点（checkpoint）在细胞周期中，决定细胞周期能否继续向前运转的某一特定时期，称为检验点。细胞周期检验点是细胞周期调控的一种机制,主要是确保周期每一时相事件的有序、全部完成并与外界环境因素相联系G1/S检验点：启动DNA的复制S期检验点：检验DNA复制是否完毕G2/M检验点：能否开始分裂中-后期检验点：纺锤体组装的检验细胞周期中的主要的检验点1、MPF的发现及其作用成熟促进因子(maturationpromotingfactor，MPF）,又称有丝分裂因子(Mitosis-pr

2、omotingfactor),早期称为M期促进因子(M-phasepromotingfactor,MPF)，是指M期细胞中存在的促进细胞分裂的因子1970年，JohnsonandRao将同化的不同细胞周期的细胞诱导融合早熟染色体凝集（染色体超前凝集）(Prematurechromosomecondensation,PCC)——超前凝集染色体卵细胞细胞质移植实验2、MPF与CDK激酶(周期蛋白依赖性蛋白激酶)(1)MPF的构成1988年，Maller实验室的Lohka将非洲爪蟾的MPF纯化。由两个不同的亚基组成的异质二聚体:p32和p45(非洲爪蟾)，使蛋白质底物磷酸化。1983年TimHun

3、t发现海胆的卵裂过程中两种蛋白质的含量随细胞周期振荡，命名为周期蛋白(cyclinA和B)。后来发现各类动物来源的细胞周期蛋白mRNA均能诱导蛙卵的成熟。MPF：cyclin-Cdk周期蛋白称为调节亚基催化亚基从ATP上转移磷酸到丝氨酸和苏氨酸残基上●催化亚基是丝氨酸/苏氨酸型蛋白激酶其活性有赖于周期蛋白，故该蛋白称为周期蛋白依赖性激酶(cyclin-dependentproteinkinases,Cdks);●调节亚基：周期蛋白(cyclin)1960sLelandHartwell,1970sPaulNurse分别以芽殖酵母和裂殖酵母为实验材料，利用温度敏感突变株，发现许多与细胞分裂有关的

4、基因(celldivisioncyclegene,cdc基因)。–裂殖酵母cdc2、芽殖酵母cdc28突变型在限制温度下无法分裂；–cdc2和cdc28都编码一个34KD的蛋白激酶，促进细胞周期的进行。MPF=p34cdc2(p34cdc28)+p56cdc13(cyclinB)–weel和cdc25分别表现为抑制和促进CDC2的活性。–wee1突变型则提早分裂，cdc25突变型细胞体积增大而不分裂；Cdc25&Wee1mutantLelandH.HartwellR.Timothy(Tim)HuntSirPaulM.Nurse2001年10月8日美国人LelandHartwell、英国人Pa

5、ulNurse、TimothyHunt因对细胞周期调控机理的研究而获诺贝尔生理医学奖。CDK的活性调节及多样性Cdc2与细胞周期蛋白结合才具有激酶的活性，故名细胞周期蛋白依赖性激酶(cyclin-dependentkinase，CDK)。CDK1（哺乳动物中的一种）可将特定蛋白磷酸化，促进细胞周期运行，又称作细胞周期引擎。–如将核纤层蛋白磷酸化导致核纤层解体、核膜消失；–将H1磷酸化导致染色体的凝缩等。在动物中已知7种CDK。均含有一段相似的CDK激酶结构域，这一区域有一段保守序列，即PSTAIRE，与周期蛋白的结合有关,且其活性被周期蛋白调控。细胞内存在多种因子参与CDK激酶活性的调节。含

6、有影响CDK激酶活性的位点，如CKI(CDKI)的结合位点——其活性受CKI调节(2)不同类型的CDK/cyclin复合物及其参与的细胞周期调控CDKinhibitor,CDKI对细胞周期起负调控作用，分为：–①Ink4(Inhibitorofcdk4):P16ink4a,P15ink4b,P18ink4c,P19ink4d。P16ink4a特异性抑制cdk4·cyclinD1,cdk6·cyclinD1。–②Cip/Kip(cyclininhibitionprotein1)(Kinaseinhibitionprotein)：P21cip1/WAF1,P27kip1、P57kip2，抑制大多

7、数CDK的激酶活性。P21cip1/WAF1对G1期CDK起抑制作用，还能与DNA聚合酶δ的辅助因子PCNA（proliferatingcellnuclear或antigen）结合，直接抑制DNA的合成。Cdk活性可因抑制性磷酸化而受到抑制，并被抑制蛋白抑制P27—Cdk抑制蛋白(CKIs)Cdk与不同的周期蛋白结合，引发不同的细胞周期事件.Cdk活性因周期蛋白降解而终止.细胞周期控系统简图cyclin-CD