fgf-2对人骨髓间充质干细胞增殖和向成骨细胞分化的影晌

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1、细胞生物学杂志细胞生物学杂志ChineseJournalofCellBiology2005,27:673-678细胞生物学杂志http://www.cjcb.orgFGF-2对人骨髓间充质干细胞增殖和向成骨细胞分化的影晌唐文洁1，2李玛琳1邱垂源2陈琼玉2李国辉2李凌松3洪岸2*c昆明医学院云南省天然药物药理重点实验室，昆明650031;2暨南大学生物工程研究所，广州510632;细胞生物学杂志细胞生物学杂志3北京大学干细胞研究中心，北京100083)摘要探讨体外培养条件下，成纤维细胞生长因子-2(FGF-2)和地塞米松(Dex)对第7代人骨髓间充质干细胞(MSCs

2、)增殖和向成骨细胞分化的作用以及两者联合使用的效应。MSCs经含FGF-2或/和Dex的培养液作用后，于不同时间采用细胞生物学杂志MTT法测定细胞增殖情况;对硝基苯磷酸(pNPP)法测定碱性磷酸酶(ALP)活性;ELISA法测定骨钙蛋白(OC)含量;茜素红S染色法对沉积的钙盐进行染色。发现:(1)FGF-2组细胞的生长速度为对照组的1.31倍，DexIFGF-2组细胞的生长速度为FGF-2组的1.12倍。(2)Dex组的ALP活性、OC含量和细胞外基质钙盐沉积分别为对照组的17.0倍、2.12倍和10.56倍，并能形成成熟的在基磷灰石(HA)结晶和骨结节;FGF-2

3、组的ALP活性比对照组降低了76.7%，虽然OC含量、钙盐沉积增加，但不能形成成熟的HA结晶和骨结节;FGF-2对Dex诱导的ALP活性增加和HA结晶形成有拮抗作用。由此证明:(1)FGF-2可促进MSCs的增殖，Dex对MSCs的增殖元明显作用;Dex能增强FGF-2对MSCs的促增殖效应。(2)Dex可使MSCs分化为成熟的成骨细胞，是一个有效的成骨细胞分化诱导剂;细胞生物学杂志FGF-2可使MSCs分化为未细胞生物学杂志成熟的成骨细胞;FGF-2拮抗Dex诱导MSCs分化为成熟的成骨细胞。关键词间充质干细胞:成纤维细胞生长因子-2;地塞米松:增殖:成骨细胞细胞

4、生物学杂志组织、器官的丧失或功能障碍是人类健康所面反应[6，7)。因此，骨髓MSCs可用于治疗一些机体无临的主要危害之一，也是人类疾病和死亡的最主要法自然修复的组织细胞损伤，可以作为组织工程的细胞生物学杂志原因。例如由创伤、手术、骨病变和先天性疾病种子细胞。等引起的骨组织缺损，严重影响了病人的生活质骨组织工程需要应用具有一定功能特性的终末量，并给社会和家庭带来了巨大的经济负担[1)。上细胞一一成骨细胞来构建组织工程化人工骨，但由世纪80年代兴起的骨组织工程学为骨缺损修复提供于骨髓MSCs为间充质前体细胞，在体外不会自发了一个全新的思路和方法。一般来说，组织工程的分化

5、，因此必须将MSCs加以诱导使其分化为成熟3个核心因素是:干细胞或前体细胞、合适的生物的成骨细胞。构建组织工程化人工骨的另一个前提支架以及生长因子细胞生物学杂志[2)。间充质干细胞(mesenchyma1条件是要有足够的种子细胞，然而在体外往往难以细胞生物学杂志stemcells,MSCs)是一种多潜能成体干细胞，在人获得大量的MSCs(每1X105_1X106个骨髓单个核体发生、发育过程中存在于许多种组织中。目前，细胞中仅有1个MSC)，而且随着传代次数的增加，不仅可从成人的骨髓、外周血、脂肪、皮肤、骨其增殖、分化能力下降，甚至消失[8)。研究者试细胞生物学杂志膜

6、、滑膜、骨髓肌等组织中分离得到MSCs，而图使用各种生长因子和激素来解决上述问题。本实细胞生物学杂志且也能从脐血、胎盘、脐带等组织中获得。在体验选择了影响MSCs增殖和分化为成骨细胞的两个细胞生物学杂志外特定条件下，骨髓来源的MSCs可以扩增并且可重要因子一一成纤维细胞生长因子-2(FGF-2)和地以分化为骨、软骨、骨髓基质、肌脏、韧带、脂收稿日期:2005-05-13接受日期:2005-06-21肪等多种结缔组织细胞以及骨髓肌细胞、神经细胞国家重点基础研究发展规划项目(973计划~)(No.2∞lCB510106)和神经胶质细胞等[3-6)。而且，不论是自体的还是

7、*通讯作者。Tel:020-85220220,Fax:020-85226616,E-mail:同种异源的骨髓MSCs一般都不会引起宿主的免疫ojds@jnu.edu.cn细胞生物学杂志细胞生物学杂志细胞生物学杂志细胞生物学杂志细胞生物学杂志674细胞生物学杂志·研究论文·塞米松(Dex)作为主要研究因素，进一步深入研究(对照组)换为含10mmol/Lß-甘油磷酸纳、0.25它们对第7代人骨髓MSCs增殖和向成骨细胞分化的mmol/L抗坏血酸的生长培养液，2-4组分别在l组作用以及两者联合使用的效应。液体中添加Dex、FGF-2、Dex/FGF-2，浓度同前。每组