arhi基因在胰腺肿瘤中的抑癌作用与其可能细胞内信号传导的机制初探

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1、5．Aza．dCAPSBPBSAcDNADEPCDMSOmnPD仃EBEDlAFBSEGFPERKFCMGAPDHG418HEPES～IAPKmRNAMTrNa4P2070DPBSPCRP向PIPMSF英语缩略词5-aza-2’．-deoxyqrtidineAmmoniumPersulfateBasepairBovineSerumAlbumin(Abbreviation)complementarydeoxyribonucleicacidDiethylpyrocarbonateDimethylSdfo

2、】(idedeoxynuelcotidetriphosphateDithiothreitoIEmidiulnBromideEthylenediamineTelraaeetieAcidFetalBovineSerumEnhancedgreenfluorescentproteinExtraeellularsignal·regutatedkinasesFlowcytometryGlyeeraldehyde一3-phosphatedehydrogenaseneomycin418HydroxyethylPip

3、erazineEthanesulfomcAcidMitogen-activatedproteinkinascsmessengerribonucleicacid3-(4,5-dimethylthiazolzyl)-2，5-diphenylSodiumPyrophosphate,AnhydrousOpticalDensityPhosphate-bufferedsalinePolymerasechaHlrl弧2tion1)yrococcusfuriosusPropidiumIodidePhenylmeth

4、ylsulfonylfluoride5．氮-2’．脱氧胞苷过硫酸胺碱基对牛血清白蛋白互补脱氧核糖核酸二乙基焦炭酸盐二甲基亚砜脱氧核耱三磷酸核苷二硫苏糖醇溴化乙啶乙二胺四乙酸胎牛血清增强型绿色荧光蛋白细胞外信号调节蛋白激酶流式细胞仪甘油醛．3．磷酸脱氢酶新霉素二羟乙基哌嗪乙烷磺酸有丝分裂活化蛋白激酶信使核糖核酸四甲基偶氮唑盐焦磷酸钠(无水)光密度磷酸缓冲盐溶液聚合酶链式反应高保真DNA聚合酶碘化丙啶苯甲基磺酰氟眦PⅦFRNArpmRPhⅡRr-PCRS1．ATTBSTCF他FTE^d匝DProU：in

5、tyrosinekinasePolyvinylideneFluorideNibonucleicacidroundperminuteRoswelIParkMemofialInstituteReverasetranscriptasePCRsignalnansduce幅andactivatorsoftranscriptionTrisBuifcw．d，Salme,Tcellfactor／lymphoidenhancerfactorNNNN—TeWamethylethylenediamine4蛋白酪氨酸激酶蛋

6、白吸附膜核糖核苷酸转每分细胞培养基名称逆转录聚合酶链反应信号传导及转录活化因子Tris缓冲盐溶液T细胞因子N，N，N’，Ni四甲基二乙胺ARHI基因对胰腺癌抑癌作用及其可能细胞内信号传导机制的初探(中文摘要)胰腺癌的恶性度程高，预后差，症状隐匿，近些年来全球范围胰腺癌发病率、死亡率均在上升，胰腺癌发病机制仍然不明确，这给早期诊断以及进一步治疗带来很大困难，只有真正揭示胰腺癌发病内在机制，才能寻找到有效的诊断及治疗方法。ARm基因是1999年发现的一个母源印记抑癌基因，本实验室前期工作显示，ARHI蛋

7、白在胰腺癌组织中的表达缺失占48．9％，其基因启动子呈现高甲基化(cpGI45．5％；CpGII27．3％呦改变。本研究构建了野生型ARI-H基因真核表达载体，并将其导入到ARHI基因表达缺失的胰腺肿瘤细胞(Panc-I)中，深入探讨ARHI基因及甲基化在胰腺肿瘤演化中的作用和相关机制。肿瘤的发生、发展是多种基因参与、多阶段的过程，其中细胞信号传导通路与肿瘤的演化密不可分．胰腺癌中ARHI基因、甲基化、细胞信号传导通路的调节三者究竟处于什麽关系呢?本研究着重探讨了ARFU基因与细胞信号传导通路、去甲

8、基化与细胞信号传导通路之间的内在联系，试图揭示抑癌基因及内在调控在肿瘤演化中的作用机制。本研究将分为以下三部分介绍。第一部分．ARHI在胰腺癌中的抑癌作用以及其机制研究采用质粒重组的方法构建了载有野生型ARHI基因的质粒pIRES2-EGFP-ARHI：选取ARHI基因缺失细胞系Panc-I为研究对象，分别将重组质粒plRES2-EGFP-ARHI或空质粒(阴性对照)转染后进行了以下研究：1．Westernblot方法检测Panc．I细胞ARHI蛋白的重新表达以及AR