wnt信号通路成员apc抑癌基因在肾上腺皮质腺瘤中的杂合性缺失的研究

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1、华中科技大学硕士学位论文Wnt信号通路成员APC抑癌基因在肾上腺皮质腺瘤中的杂合性缺失(LOH)研究华中科技大学同济医学院附属协和医院泌尿外科硕士研究生：吴清剑导师：赵军教授邢毅飞副教授中文摘要目的：探讨Wnt信号通路成员APC抑癌基因的杂合性缺失在肾上腺皮质腺瘤中的意义。方法：收集我院2007年9月～2009年1月期间行泌尿外科腹腔镜手术治疗的肾上腺皮质腺瘤患者的肾上腺皮质腺瘤组织标本42例，以及我院胃肠外科2009年3月行结肠癌根治术患者的结肠癌组织标本4例，所有标本均经病理检查证实。并于术前采集对应病人的外周血。收集标本后提取肿瘤组织标本及对应的外周血标本

2、的基因组DNA。随后采用聚合酶链反应-限制性酶切片段长度多态性（PCR-RFLP）方法，研究Wnt信号通路成员APC基因11外显子RsaI酶切位点和15外显子MspI酶切位点多态性，分析42例肾上腺皮质腺瘤（实验组）及4例大肠癌（阳性对照组）中APC基因杂合性缺失。结果：经聚合酶链式反应，11外显子扩增出一条133bp的条带，15外显子扩增出一条550bp的条带。限制性酶切片段长度多态性分析提示在42例肾上腺皮质腺瘤（实验组）中杂合子有30例，总的杂合率为71.4%（30/42）,未发现杂合性缺失。4例大1华中科技大学硕士学位论文肠癌（阳性对照组）中发现杂合子2

3、例，2例都发生了杂合性缺失。结论：在42例肾上腺皮质腺瘤中未发现APC基因杂合性缺失现象，据此我们认为APC基因杂合性缺失在肾上腺皮质腺瘤的发生发展过程中可能并非一种常见的现象。关键词：肾上腺皮质腺瘤；Wnt信号通路；APC；杂合性缺失2华中科技大学硕士学位论文Lossofheterozygosity(LOH)ofAPC,thememberofWntsingnalingpathways,inadrenocorticaladenomaDepartmentofUrologySurgery,UnionHospital,TongjiMedicalCollegeHuazh

4、ongUniversityofScienceandTechnologyPostgraduate:WuQingjianTutor:Prof.ZhaoJunProf.XingYifeiAbstractObjective：Toinvestigatethesignificanceofthelossofheterozygosity（LOH）ofAPCgene,thememberofWntsingnalingpathways,inadrenocorticaladenoma.Methods：42adrenocorticaladenomasand4coloncarcinomaw

5、ascollectedbyuswhenthesepatientsweresufferingoperationinourhospital.Andtheperipheralbloodofeachpatientwascollectedbeforetheoperation.Alltumorsampleswereconfirmedbypathology.Afterthat,weextractedthegenomeDNAofeachtumorsampleandeachperipheralbloodsample.Lossofheterozygosity(LOH)ofadeno

6、matouspolyposiscoli(APC)，acomponentoftheWntsignalingpathways，wasinvestigatedbyusingPolymeraseChainReaction/RestrictionFragmentLengthPolymorphism(PCR-RFLP)in42adrenocorticaladenomas(experimentalgroup)and4coloncarcinoma(positivecontrolgroup)bytwogeneticmarkers，RsaIintheexon11andMspIint

7、heexon15ofAPC．3华中科技大学硕士学位论文Results：A133bpfragmentwasamplificatedfromthe11exonanda550bpfragmentwasamplificatedfromthe15exonoftheAPCgenebyPolymeraseChainReaction.In42adrenocorticaladenomasamples(experimentalgroup)，30wereinformative（30/42,71.4%），butnoneofthemshowlossofheterozygosity(LOH

8、)．In4colonca