积雪草甙诱导人宫颈癌hela细胞凋亡及其机制探讨

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1、学术诚信承诺本人郑重声明：所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写的研究成果，也不包含为获得佳木斯大学或其他教育机构的学位或证书所使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中做了明确的说明并表示了谢意。签名：盈皇且日期：皇翌6：生：兰立关于论文使用授权的说明本人完全了解佳木斯大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留送交论文的复印件，允许论文被查阅和借阅；学校可以公布论文的全部或部分内容

2、，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文。(保密的论文在解密后应遵循此规定)签名：塑必导师签名：高鱼：!羔日期：超6：丝放中太捷要佳本矩大学硕士研究生论文中文摘要目的：研究积雪草甙对体外培养的人宫颈癌Hela细胞的生长抑制和诱导凋亡的作用，并通过检测凋亡相关蛋白Survivin和CaspaSe．3来分析其凋亡的分子机制。方法：应用MTT比色法观察积雪草甙对人宫颈癌Hela细胞生长的抑制作用，应用倒置显微镜和HE染色法观察药物作用后细胞形态结构改变。TuNEL法分析细胞凋亡情况。免疫组化sABc法检测survivi

3、n和caspase-3蛋白在积雪草甙诱导Hela细胞凋亡中的作用。结果：积雪草甙可明显抑制宫颈癌Hela细胞的生长。MTT法显示浓度为3pmol几、6umol／L、12“mol／L、24umol／L、48umol／L和96umo儿的积雪草甙分别作用6h、24h和48h后，细胞的抑制率分别随药物浓度的升高和时间的延长而升高，呈时间剂量依赖性。不同浓度积雪草甙作用后，倒置显微镜及HE染色法证实肿瘤细胞形态呈凋亡特征性改变。n烈EL法可检测到细胞内呈棕黄色颗粒的凋亡细胞。浓度为6pmol／L、12pmol／L、24umo

4、l／L和48u啪l／L的积雪草甙作用6h后，细胞凋亡率分别为(1．60土0．99)％、(2．07士O．16)％、(3．41士O．37)％和(5．70士0．28)％，作用24h后细胞凋亡率分别为(5．40土1．19)％、(14．68士1．41)％、(20．15士1．57)％和(31．01士1．38)％，作用48小时后凋亡率分别为(6．78士1．23)％、(21．77士1．64)％、(30．51士1．19)％和(38．77士1．28)％。积雪草甙作用Hela细胞6h一48h时，随着浓度增大，细胞凋亡率增大，相同浓度下4

5、8h细胞凋亡率高于24h和6h，即呈时间剂量依赖性。48pmol几积雪草甙作用48h后免疫组化sABc检测sllr“vill蛋白表达率为(44．24士3．28)％与对照组(82．15±5．51)％相比有显著性差异(p<0．01)。Caspase-3蛋白表达率为(28．45士2．43)％与对照组(2．17±1．88)％相比有显著性差异(p<0．叭)。结论：积雪草甙对体外培养的人宫颈癌Hela细胞的生长有显著的抑制作用和诱导凋亡作用。关键词：积雪草细胞凋亡SurvivinCasDase．3A8sTRcT佳本斯大学碗士研

6、究生论文ABSTRCTObjective：Toinvestigate锄tipr01iferation鲫di11ducingapoptosisofhumancenrixcancerhelacellsinducedbvasiaticoside．Themecl砌ismsofasiaticoside—reducedapoptosisbymeasuretheexpressionsofSuⅣivinalldCaSpase-3．Methods：Thea芏1tiproliferationactivitiesofasiaticosi

7、dewereeVahlatedonHelacellsbymeallsofMTTassay．ThcmoIphologyicalchaIlgesofaSiaticosideonHelacellswereobseⅣcd11nderlightmicroscopeaI]ldwithHEs诅imng．Apoptosisinducedbyasiaticoside、vaSdetectedbvTUNELmetllod．Theef佟ctofasiaticosideontheexpressionofSurvivina11dCaspase

8、-3proteins、张sdetectedbyuSingSABCmctl】od．Results：Asiaticosidewasef佟ctiveininhibidngt11epmliferationofHelacells．3umol，1、6um01／1、12l上mol，L、24pm01／L、48umol，L、96pmol／Lofasiaticosidecaus