vitapex直接盖髓术后碱性成纤维细胞生长因子和神经生长因子在牙髓中的表达和意义

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1、中文摘要Vi"t．apex直接盖髓术后碱性成纤维细胞生长因子和神经生长因子在牙髓中的表达和意义摘要目的：通过免疫组织化学技术，观察大鼠磨牙机械穿髓vitapex直接盖髓术后碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和神经生长因子(NGF)在不同时间动态表达及分布特征，探讨它们在牙髓损伤修复过程中的意义，为临床治疗多种牙髓疾病探寻更理想的治疗药物和手段。方法：选用雄性Wistar大鼠35只，无龋病牙周病，体重220～2509，有大鼠均由河北医科大学实验动物中心提供。随机分成7组，分别为正常对照组、盖髓后即刻、3

2、天、5天、7天、14天、28天组。采用1009／L水合氯醛(3ml／Kg)腹腔注射麻醉后，仰卧固定。1％碘酊棉签、75％乙醇消毒双侧磨牙区，随机选取一侧上颌第一磨牙为实验牙，于第一磨牙颌面近中窝用1／4球钻向下钻磨，直到洞底出现粉红色，用预先制备的直径0．5mm尖锐探针将剩余极薄的牙本质穿透。生理盐水冲洗，无菌棉球轻压拭干，vitapex直接盖髓，玻璃离子水门汀充填。分别在规定时间内，将动物麻醉下用4％多聚甲醛灌流固定1h后，立即截取磨牙区组织，去除根尖部骨板，暴露根尖，放于40％多聚甲醛4。C固定4

3、8小时，再置1O％EDTA液4℃脱钙4周，将玻璃离子充填物去除，梯度乙醇脱水，二甲苯透明，浸蜡，石蜡包埋。将标本按平行于牙长轴方向做颊舌向连续切片，制备5lam厚切片。按照sP试剂盒提供的切片染色程序，分别进行bFGF和NGF的染色，公司提供阳性对照片，以PBS代替一抗，作为阴性对照。采用图像分析系统染色结果进行图像分析，记录两种因子的阳性细胞百分比和染色强度的评分，将两数值相乘得出最后结果。用SPSSl3．0统计软件进行统计学分析，多组间比较采用Kruskal．WallisH检验，组间两两比较采用W

4、ilcoxon秩和检验，P≤0．05为差异具有显著性意义，得出统计学结论。结果：1bFGF表达变化在正常对照组中，呈强阳性或阳性表达，主要分布于成牙本质细胞、中文摘要成纤维细胞、血管内皮细胞中。即刻组与正常组相似，无明显组织学差异。3天组中，在成牙本质细胞中表达减弱，5天随后表达开始上调，到7天组时，呈强阳性表达，主要位于牙髓内血管内皮细胞和成纤维细胞中，14天和28天组，为弱阳性或阳性表达。对七组免疫反应强度个数进行总体分析的Kruskal．WallisH检验：H=24．425，P<0．05，有统计

5、学意义，可认为七组免疫反应强度不完全相同。用Wilcoxon秩和检验对七组数据进行多重比较：正常、即刻、14天、28天组间两两比较，3天、14天、28天组间两两比较，统计学结果均为P>0．05，认为正常、即刻、14天、28天组组间，3天、14天、28天组组间差异无统计学意义，表达强度无明显不同。5天与7天组相比，统计学结果均为P>0．05，认为5天与7天组间无统计学意义，表达强度无明显不同。正常组与3天、5天、7天组比较，统计学结果均为P<0．05，认为正常组与3天、5天、7天组间有统计学意义，表达强

6、度不同。即刻组与3天、5天、7天比较，统计学结果均为P<0．05，认为即刻组与3天、5天、7天组间有统计学意义，表达强度不同。3天组与5天、7天组比较，统计学结果均为P<0．05，认为3天组与5天、7天组间有统计学意义，表达强度不同。5天与14天、28天组相比，统计学结果均为P<0．05，认为5天与14天、28天组间有统计学意义，表达强度不同。7天与14天、28天组相比，统计学结果均为P<0．05，认为7天与14天、28天组间有统计学意义，表达强度不同。2NGF表达变化在正常对照组中，呈阴性表达，即刻

7、组牙髓染色呈弱阳性，无明显组织学改变。3天和5天组为强阳性表达，主要分布在成牙本质中，部分牙髓细胞，血管周围、神经纤维中。7天后表达下调，表现为阳性表达，14天与28天组中，多为阴性或弱阳性表达。对七组免疫反应强度个数进行总体分析的Kruskal．WallisH检验：H=26．264，P<0．05，有统计学意义，可认为七组免疫反应强度不完全相同。(Table)用Wilcoxon秩和检验对七组数据进行多重比较，结果为：正常、即刻、14天、28天组间两两比较，正常、即刻、7天组组间两两比较，统计学结果均为

8、P>0．05，认为正常、即刻、14天、28天组组组间，正常、即刻、7天组间差异无统计学意义，表达强度无明显不同。3天与5天，7天与14天组间比较，统计学结果均为P>0．05，认为3天与5天，7天与14天组间差异无统计学意义，中文摘要表达强度无明显不同。正常与3天、5天组比较统计学结果均为P<0．05，认为正常组与3天、5天组组间有统计学意义，表达强度不同。即刻组与3天、5天组比较，统计学结果均为P<0．05，认为即刻组与3天、5天组组间有统计学意义，表达