红花多糖的分离、纯化的研究化学结构的研究

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1、fIIII]lllJlIlllllllffllrfllIIflflfflffllJIIII!Y1894910独创性声明◆本人郑重声明:所呈交的学位论文,是本人在导师的指导下,独立进行研究工作所取得的成果。除文中已注明引用的内容以外,本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果,也不包含为获得江苏大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名:却拷扣

2、

3、年6只步I:t学位论文版权使用授权书江苏大学、中国科学技术信息研究所、国家图书馆、中国学术期刊(光盛版)电

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5、年卵店日指导教师签名:修象农妇

6、1年6旯ⅣB江苏大学硕士毕业论文摘要红花系菊科植物红花(CarthamustinctoriusL.)的干燥花,俗

7、名红蓝花、刺红花、草红花。目前红花中已分离鉴定的化学成分有60多种,主要有黄酮类、木脂素类、多炔类等,其中多糖也是红花中主要有效成分之一,现代药理实验研究表明其具有抗肿瘤、提高免疫力等作用,因此,开发红花多糖具有重要的现实意义。本文较为系统地对红花多糖进行分离纯化,预期得到较高分子量的多糖,并利用紫外光谱、红外光谱、气相色谱和高效凝胶渗透色谱等方法,对其理化性质及化学结构进行分析。主要研究内容如下:1.本研究以红花多糖提取率为考察指标,在单因素试验的基础上,采用响应面法优选出最佳提取工艺为:水料比24:1(mL/g),提取温度95℃,提取时间1.7h,提取次数2次,在此工艺条件下红花多糖

8、提取率为4.856%,各因素对红花多糖提取率作用的大小依次为:水料比>提取温度>提取时间。2.通过sevage法、三氯乙酸(TCA)法和酶.sevage法对红花多糖进行脱蛋白研究,结果显示:酶+sevage法效果最好,蛋白去除率为72.34%,多糖保留率为74.56%;其次是TCA法,单独使用sevage法的效果最差,其蛋白去除率较低且多糖保留率最小。3.分别用活性炭和大孔吸附树脂对红花多糖溶液进行脱色。活性炭脱色的较优条件为:温度40℃,吸附时间30min,pH4,活性炭用量1.5%,得到脱色率和多糖保留率分别为81.23%和52.61%;大孔吸附树脂脱色的较优条件为:采用HPD.10

9、0型大孔吸附树脂,在温度为40。C,pH4,多糖浓度5mg/mL,流速为lmL/min,洗脱剂为pH=4的蒸馏水下得到的脱色率和多糖保留率分别为86.71%和72.10%,由此可见,采用HPD.100型大孔吸附树脂对红花多糖进行脱色可得到更好的效果。4.红花多糖经脱蛋白、除色素、流水透析后经DEAE.52纤维素层析柱,得到SDPI、SDP2两种主要组分,再分别过SephadexG.100凝胶柱进一步纯化,SDPI、SDP2两种组分,经高效液相检测,呈单一对称峰,表明达到一定的均一纯度。HPLC法测得两种多糖组分的相对分子量分别为5861和9332。采用气相色谱法测定了多糖组分的单糖组成,

10、结果表明SDPI由L.鼠李糖、L.(+)-5可拉伯糖、D.葡萄糖、D.半乳糖组成,其摩尔比为2.93:11.19:33.68:3.48;SDP2由L.鼠李糖、L。(+)一阿拉伯糖、D.木糖、D.甘露糖、D.葡萄糖、D.半乳糖组成,其摩尔比为4.44-1.46-4.51:5.82,8.23:19.38。红外光谱分析表明两种多糖组分均具有多糖的特征吸收峰,初步推测SDPI为0【-D-吡喃糖,SDP2为B.D.吡喃糖。并运用高碘酸氧化和Smith降解分析了两种多糖组分的糖苷键连红垄玺焦箜坌塞丝垡兰垡堂笙塑婴窒接方式。5.红花多糖体外抗氧化活性的研究表明,红花多糖对羟基自由基、超氧阴离子均有较好

11、的清除作用,具体的作用机理还有待于进一步的药理实验研究。关键词:红花多糖,分离,纯化,结构,抗氧化II江苏大学硕士毕业论文AbstractSafflower,driedfowerofCarthamustinctoriusL.belongingtotheCompositae,iscommonlycalledredandblueflowers,thornssafflowerandfloscarthami.Uptonow,60specie

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