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时间:2019-02-02
《副溶血性弧菌耐高压菌株耐压机制的研究》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、————竺竺竺L一恻螋Ilf揪II·___●■■●■■●o_o___··-______■■■_·____■■■_●■■■_oooooo●■■■●■■o_●●’I_■o■■■■■■●o_■■■■‘_-___‘_________I-■_■‘___---_--_·____●__■■■o_■●●■■■●■o__o一。一’⋯⋯。o’‘⋯¨⋯l■■”1I■■副溶血性弧菌耐高压菌株耐压机制的研究摘要本文以水产品中常见的致病菌一副溶血性弧菌为研究对象,通过超高压处理筛选获得副溶血性弧菌耐高压菌株,探究微生物耐超高压胁迫的机制。首先筛选分离耐超高压胁迫的副溶血弧菌菌株,研究细菌细胞膜组成成分及细胞中成分在高压胁
2、迫下的应激机制,从而为微生物耐高压胁迫机理的研究提供基础数据。具体结论如下:研究了副溶血性弧菌对超高压处理的耐受能力,发现经250MPa及以上的压力处理,副溶血性弧菌的致死率可达100%。利用80---,250MPa超高压反复处理后分离得到的耐压菌株经250MPa压力胁迫处理,存活量较原始菌株提高了3个数量级。筛选分离获得了耐超高压胁迫的副溶血弧菌,并对耐压菌株和原始菌株细胞膜通透性、细胞膜可溶性蛋白、Na—KATP酶活性、细胞无机盐离子含量的差异进行测定。耐压菌株细胞膜通透性与原始菌株无显著差异,细胞膜可溶性蛋白在分子量为36KDa附近浓度明显增大。耐压菌株Na—KATP酶活性大大提高。耐压
3、菌株细胞钾、钠、钙、镁离子的含量均比原始菌株的低,但锌离子含量比原始菌株高。经过相同的压力处理,耐压菌株胞内抗氧化相关酶的相对酶活降低幅度较小,而原始菌株降低幅度较大。通过GC-MS方法分析耐压菌株与原始菌株细胞膜脂肪酸的组成,结果显示耐压菌株不饱和脂肪酸与饱和脂肪酸的比例(USFA/SFA)增大,浙江IT商大学硕:l:毕业论文不饱和脂肪酸的流动性强,利于细胞处于高压环境中细胞的形变,维持细胞的结构完整。通过实时荧光定量PCR研究基因表达的差异,揭示耐压菌株耐超高压胁迫的内在机制,qRT-PCR结果显示耐压菌株/k9脂肪酸脱饱和酶表达量上调,这与GC-MS脂肪酸分析结果一致。研究表明细菌细胞膜
4、上组成成分的变化特别是脂肪酸组成的变化、可溶性膜蛋白变化、胞内抗氧化相关酶酶活的耐压性变化以及Na—KATP酶活性变化是耐压菌耐受高压的重要原因。关键词:副溶血性弧菌;耐超高压菌株;细胞膜;耐压机制¨浙江_T商大学硕士毕业论文ANTI.PRESSUREMECHANISMoFPRESSURE.RESISTANTS1RAINSOF所BR,DABS瞰CTIf.parahaemolyticusisoneofthemainpathogensinseafood.HighpressurecouldbeusedtocontrolIf.parahaemolyticus.Althougha>250MPapress
5、urecankillthepathogen'itadverselyaffectsseafoodtexture.PressureswhichlowerthanthisIevelhavebeenshowntobeineffectiveineliminatingpressure-resistantV.parahaemolyticusfromseafood.Themechanismofmicrobialresistancetohighhydrostaticpressureby14.parahaemolyticuswasstudiedinthispaper.Thepressure-resistant矿p
6、arahaemolyticusstrainswereseparatedandobtainedbyrepeatlyhighhydrostaticpressurefrom80-250MPa.Thesurvivalrate,thepermeabilityofmembrane,theactivityofATPase,thecomponentsofsolubleproteinincellmembraneandthecontentofionincellbothinpressure-sensitiveandpressure·resistant彰parahaemolyticusweredetected.Thr
7、eeintracellularantioxidantenzymeactivitieswerealsodeterminedatthesamehigh¨I浙江工商大学硕士毕业论文hydrostaticpressures;furthermore,fattyacidcompositionwasanalysedbyGC—MSmethod,thedifferencesingeneexpressionwered
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