副溶血性弧菌耐高压菌株耐压机制的研究

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2、迫下的应激机制，从而为微生物耐高压胁迫机理的研究提供基础数据。具体结论如下：研究了副溶血性弧菌对超高压处理的耐受能力，发现经250MPa及以上的压力处理，副溶血性弧菌的致死率可达100％。利用80---,250MPa超高压反复处理后分离得到的耐压菌株经250MPa压力胁迫处理，存活量较原始菌株提高了3个数量级。筛选分离获得了耐超高压胁迫的副溶血弧菌，并对耐压菌株和原始菌株细胞膜通透性、细胞膜可溶性蛋白、Na—KATP酶活性、细胞无机盐离子含量的差异进行测定。耐压菌株细胞膜通透性与原始菌株无显著差异，细胞膜可溶性蛋白在分子量为36KDa附近浓度明显增大。耐压菌株Na—KATP酶活性大大提高。耐压

3、菌株细胞钾、钠、钙、镁离子的含量均比原始菌株的低，但锌离子含量比原始菌株高。经过相同的压力处理，耐压菌株胞内抗氧化相关酶的相对酶活降低幅度较小，而原始菌株降低幅度较大。通过GC-MS方法分析耐压菌株与原始菌株细胞膜脂肪酸的组成，结果显示耐压菌株不饱和脂肪酸与饱和脂肪酸的比例(USFA／SFA)增大，浙江IT商大学硕：l：毕业论文不饱和脂肪酸的流动性强，利于细胞处于高压环境中细胞的形变，维持细胞的结构完整。通过实时荧光定量PCR研究基因表达的差异，揭示耐压菌株耐超高压胁迫的内在机制，qRT-PCR结果显示耐压菌株／k9脂肪酸脱饱和酶表达量上调，这与GC-MS脂肪酸分析结果一致。研究表明细菌细胞膜

4、上组成成分的变化特别是脂肪酸组成的变化、可溶性膜蛋白变化、胞内抗氧化相关酶酶活的耐压性变化以及Na—KATP酶活性变化是耐压菌耐受高压的重要原因。关键词：副溶血性弧菌；耐超高压菌株；细胞膜；耐压机制¨浙江_T商大学硕士毕业论文ANTI．PRESSUREMECHANISMoFPRESSURE．RESISTANTS1RAINSOF所BR，DABS瞰CTIf．parahaemolyticusisoneofthemainpathogensinseafood．HighpressurecouldbeusedtocontrolIf．parahaemolyticus．Althougha>250MPapress

5、urecankillthepathogen'itadverselyaffectsseafoodtexture．PressureswhichlowerthanthisIevelhavebeenshowntobeineffectiveineliminatingpressure-resistantV．parahaemolyticusfromseafood．Themechanismofmicrobialresistancetohighhydrostaticpressureby14．parahaemolyticuswasstudiedinthispaper．Thepressure-resistant矿p

6、arahaemolyticusstrainswereseparatedandobtainedbyrepeatlyhighhydrostaticpressurefrom80-250MPa．Thesurvivalrate，thepermeabilityofmembrane，theactivityofATPase，thecomponentsofsolubleproteinincellmembraneandthecontentofionincellbothinpressure-sensitiveandpressure·resistant彰parahaemolyticusweredetected．Thr

7、eeintracellularantioxidantenzymeactivitieswerealsodeterminedatthesamehigh¨I浙江工商大学硕士毕业论文hydrostaticpressures；furthermore，fattyacidcompositionwasanalysedbyGC—MSmethod，thedifferencesingeneexpressionwered