白藜芦醇对小鼠巨噬泡沫细胞胆固醇外流的影响

《白藜芦醇对小鼠巨噬泡沫细胞胆固醇外流的影响》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、自藜芦醇对小鼠巨噬泡沫细胞胆同醇外流的影响中山大学硕士学位论文白藜芦醇对小鼠巨噬泡沫细胞胆固醇外流的影响专业：营养与食品卫生硕士研究生：许雨绚导师：凌文华教授中文摘要动脉粥样硬化(As)是危害人类健康的重要疾病，其发病早期典型的病理改变主要是血管内膜下大量巨噬泡沫细胞的形成、聚积形成脂质条纹。随着病程的发展，泡沫细胞的大量堆积，还可能导致粥样斑块的产生。因此，预防和逆转泡沫细胞的形成是防治As的重要途径。泡沫细胞的形成与细胞胆固醇代谢失衡有关，摄入胆固醇过多或胆固醇外流过少，均可引起细胞内过量脂质聚积而使巨噬细胞转变为泡沫细胞。在泡沫细胞形成过程中，胆固醇流

2、出受阻是关键的环节，促进细胞内胆固醇流出可预防和逆转泡沫细胞的形成。胆固醇流出是一个极其复杂的过程，在生理情况下，巨噬细胞内胆固醇酯被中性胆固醇酯水解酶分解为游离胆固醇后大部分由ATP结合盒转运体AI(ABCAl)和ABCGI介导流出细胞。ABCAI和ABCGI介导的细胞内胆固醇流出途径虽然相近却有所不同。ABCAI可介导细胞内磷脂与无脂载脂蛋白apoAI形成复合物，进而促进细胞内胆固醇的流出。ABCGI则是将细胞内胆固醇转运至成熟HDL及其他含脂的胆固醇接受体。最近研究还发现，ABCGI对ABCAI介导的胆固醇外流具有协同参与作用。ABCAI和ABCGI有

3、着相同的转录调节机制，都是核受体肝脏X受体(LiverXReceptor,LXR)的靶基因。LXRs可与类维生素Ax受／P讯etinoidXReceptor,白藜芦醇对小鼠巨噬泡沫细胞胆同醇外流的影响巾山大学硕士学位论文RXR)构成异源二聚体，上调ABCAI、ABCGI的表达，从而达到促细胞内胆周醇流出的作用。目前，选择合适的干预物，促进细胞内胆固醇的外流，减少巨噬细胞内的胆固醇聚积，预防和逆转泡沫细胞的形成已成为预防与治疗As的新的途径。早期流行病学研究发现，法国人有高脂饮食的习惯，但冠心病发病率却比较低，研究证实这种现象与法国人饮食中经常出现的一种饮料一

4、葡萄酒有关。Siemann等首先发现红葡萄酒中有较高含量的白藜芦醇，其正是红葡萄酒中有益于心脏的主要活性成份之一。白藜芦醇(Resveratrol，RES)又称芪三酚，是非黄酮类的多酚化合物，广泛存在于多种植物中，具有广泛的生物学活性，其抗动脉粥样硬化、保护心血管作用是近几年研究的热点，国内外研究表明，白藜芦醇主要通过抗脂蛋白的氧化、抗炎症反应、调节脂质代谢和预处理作用等起保护心血管和防治As的作用。在调节脂质代谢方面，白藜芦醇可以降低血清总胆固醇和总甘油三酯水平，在民间，早已将富含白藜芦醇的中药如虎杖、首乌用于治疗和预防高脂血症和动脉硬化。研究发现，白藜芦

5、醇在降低高脂血症患者血清总胆固醇和总甘油三酯水平的同时并不降低高密度脂蛋白胆固醇水平；加入白藜芦醇干预后实验性高脂血症大鼠组织中总胆固醇和甘油三酯的沉积减少，粪便中胆汁酸含量增多并提高了血清中胆固醇外流的接受体apoAI含量，推测白藜芦醇可能在促进胆固醇的流出，减少胆固醇在组织中的堆积和促进胆固醇经胆汁酸排泄方面具有一定的作用。进一步体外研究发现，白藜芦醇在调节细胞内胆固醇稳态方面具有一定的作用，可抑制在巨噬细胞上介导脂蛋白及其他脂质吸收的脂蛋白酶(LPL)和清道夫受体(SR-AII)基因的表达，还可在mRNA水平及蛋白水平提高巨噬细胞中对胆固醇外流起促进作

6、用的核受体LXR-a及其靶基因ABCAI、ABCGl的表达，提示白藜芦醇可能对细胞内胆固醇的流入和流出都有调节作用，但仍无确切证据表明白藜芦醇可影响细胞内胆固醇的外流。因此，本次研究采用小鼠腹腔巨噬泡沫细胞模型，研究白藜芦醇对胆固醇外流的影响，并探讨其可能机制。U白藜芦醇对小鼠巨噬泡沫细胞HH同醇外流的影响中山大学硕士学位论文研究目的：1．研究白藜芦醇对小鼠腹腔巨噬泡沫细胞胆固醇外流的影响。2．探讨自藜芦醇促进泡沫细胞胆固醇外流的可能机制。研究方法：’1．小鼠腹腔巨噬细胞的分离、体外培养与巨噬泡沫细胞模型的建立与鉴定将小鼠(209'--'259)脱颈椎处死，

7、消毒后置于实验台上，剥离腹部皮肤。将PBS注入腹腔，轻揉腹部后用无菌的吸管吸取腹腔内PBS液，收集于塑料离心管中，室温下以3，000rpm离心10min。离心后所得细胞重悬于RPM[．1640培养基中，调节细胞浓度达2X106个／ml。用台盼蓝染色法观察细胞存活率，要超过95％。将细胞接种于12孔板，置于37℃、5％C02培养箱中孵育3h后沈去未贴壁细胞，重新于每孔中加入RPMI．1640培养基(含10％FBS)。用密度梯度离心法分离血浆低密度脂蛋白(LDL)，用硫酸铜氧化修饰成为氧化LDL(ox．LDL)。在细胞培养基中加入ox-LDL，使其每孔终浓度为5

8、099／ml，细胞置于C02培养箱中孵育24h，使细