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1、白藜芦醇对豚鼠心室肌细胞L易方方,唐其柱,冯斯婷,王腾【关键词】白藜芦醇;全细胞膜片钳;钙电流 EffectsofresveratrolonLtypecalciumcurrentinisolatedventricularmyocytesofguineapig 【Abstract】AIM:ToinvestigatetheeffectsofresveratrolontheLtypecalciumcurrent(ICaL)inisolatedventricularmyocytesofguineapig.METHODS:Singleventricular
2、cellhealthyguineapigheartusingenzymaticdissociationmethods.Thepinistrationofresveratrolat1,50,100μmol/L.RESULTS:①ResveratrolreducedtheICaLinaconcentrationdependentmanner,butithadnoeffectonIVshapeofICaL.②ResveratrolmarkedlyshiftedthesteadystateactivationcurveofICaLtotheright,and
3、V1/2valueincreasedfrom(-18.97±4.08)mVincontrolto(-15.97±4.13)mVinthepresenceofresveratrol(n=7,P=0.02),theκvaluefrom(3.64±0.56)to(3.82±0.60)(n=7,P=0.67).③InactivationcurveofICaLeconstantofreactivationofICaL(98.50±9.00)msto(54.53±4.27)ms(n=6,P=0.000)byresveratrol.CONCLUSION:Resve
4、ratrolinhibitedtheLtypecalciumchannel,mainlyactingontheactivityandrecoveryprocesses. 【Keyp;calciumcurrent 【摘要】目的:研究白藜芦醇对正常豚鼠心室肌细胞L型钙电流(ICaL)的影响.方法:采用全细胞膜片钳技术,记录不同浓度白藜芦醇作用前后对ICaL的影响.结果:①白藜芦醇呈浓度依赖性阻断ICaL,但对激活电位、峰电位、反转电位均没有影响;②白藜芦醇使ICaL稳态激活曲线右移,V1/2由对照的(-18.97±4.08)mV变为(-15.97±4
5、.13)mV(n=7,P=0.02),κ由(3.64±0.56)变为(3.82±0.60)(n=7,P=0.67);③对失活曲线无影响,不改变ICaL失活特性;④白藜芦醇使ICaL失活后再恢复时间常数τ缩短,从(98.50±9.00)ms变为(54.53±4.27)ms(n=6,P=0.000).结论:白藜芦醇对ICaL有阻断作用,主要作用于钙通道激活和恢复过程. 【关键词】白藜芦醇;全细胞膜片钳;钙电流 0引言 白藜芦醇化学名为3,5,4'三羟基反二苯代乙烯(3,5,4'trihydroxyransstilbene),是一种主要存在于葡萄皮、
6、花生中的多酚类植物抗毒素.现认为它是适量饮用葡萄酒有利于心血管健康的主要作用因子〔1〕.大量研究〔2-3〕发现白藜芦醇对心肌缺血-再灌注损伤有保护作用;对血管有广泛的舒张效应〔4〕;能抗动脉粥样硬化,防治冠心病〔5〕.但其对心肌细胞离子通道的作用少见报道,我们采用膜片钳技术研究白藜芦醇对心室肌细胞ICaL的影响. 1材料和方法 1.1材料健康成年豚鼠31只(武汉大学医学院动物中心),体质量250~350g,雌雄不拘;I型胶原酶,蛋白酶E,HEPES(Gibco公司);CSOH,CSCl,Na2ATP(Sigma公司);白藜芦醇(西安赛得高科生物股
7、份有限公司);其余均为国产分析纯.无钙台氏液(mmol/L):NaCl135,KCl5.4,MgCl21,NaH2PO40.33,Glucose20,HEPES10,pH7.38(NaOH调节);KB液(mmol/L):glumaticacid50,KOH85,KCl30,MgSO43,Taurine20,Glucose10,HEPES10,EGTA0.5,pH7.2(KOH调节);电极外液组成(mmol/L):NaCl37,CholineChloride100,CaCl21.8,MgCl20.5,HEPES10,Glucose10,CSCl4.6,
8、pH7.3(CSOH调节);电极内液组成(mmol/L):CSCl120,CaCl21.0,MgCl25,N