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1、白藜芦醇在豚鼠耳蜗中的抗自由基作用论文【关键词】白藜芦醇；,,庆大霉素；,自由基Antifreeradicalactivityofresveratrolinguineapigcochlea3DepartmentofOtorhinolaryngology,XijingHospital,FourthMillitaryMedicalUniversity,Xian710033,China【Abstract】AIM:Tostudythepreventionofgentamicin(GM)ototoxicitybyresvera
2、trol(Res)inguineapig.METHODS:Auditorybrainstemresponse,cochlearpreparationandtransmissionelectronmicroscopeorphologyofhaircell.SerumlevelsofGMlyassignedto3groups(GMtreatedalone,GMandResinbinationandonecontrolgroup).Serumlevelsofsuperoxidedismutase(SOD),malondia
3、ldehyde(MDA)oftheGM+ResgroupuchhigherthanthatintheGMgroup(P0.05).ResdidnotaltertheserumlevelofGM.Morphologicalresultsagesoccurredinthebasalcircles.Damagesinuppercirclesainlyimpairedtheouterhaircells,onaybeapromisingtherapeuticagenttocleanoutfreeradical.【Keyicin
4、s;freeradical【摘要】目的：观察白藜芦醇（Res）的抗自由基作用.方法：将豚鼠随机分为3组：庆大霉素组（GM组）；Res＋GM组；空白对照组,.freelalondialdehyde,MDA）、超氧化物歧化酶（superoxidedismutase,SOD）是检测自由基的重要参数.我们将Res与庆大霉素（gentamicin,GM）用于动物后通过检测动物血清中MDA，SOD的含量以及观察听性脑干反应（auditorybrainstemresponse,ABR）和细胞形态学的变化来研究Res对自由基的作用.
5、1材料和方法1.1材料耳廓反射正常的健康雄性杂色豚鼠30只，体质量250～350g（第四军医大学实验动物中心）；硫酸GM（西安高科陕西金方药业公司）；Res（西安交大保赛生物技术股份有限公司）；MDA，SOD试剂盒（南京建成生物工程研究所）.1.2方法1.2.1动物分组及处理将30只豚鼠随机分为3组，每组10只.①GM组：120mg/kg皮下注射GM，1次/d，连续3g/kg灌胃；GM120mg/kg皮下注射，1次/d，连续3g/kg皮下注射麻醉后，将针型记录电极置前额正中皮下，参考电极置测试耳外耳道口后上皮下，鼻尖
6、接地.用Biologic声刺激器，286计算机自动采样，采用短纯音（toneburst，上升下降时间各2ms，平台时间1ms）1kHz，8kHz刺激，间隔75ms，扫描时间20ms，叠加256次，带通滤波80～1500Hz,在屏蔽隔声室内常规测试.1.2.3耳蜗硬铺片标本制备［4］将动物麻醉致死，取出听泡暴露骨性耳蜗，于显微镜下在冰盒内快速摘除镫骨，刺破圆窗，挑开蜗顶；用5～10g/LAgNO3分别从蜗尖和蜗底圆窗反复灌注，完毕后将标本浸入5～10g/LAgNO3液体中，置4℃冰箱15～20min，用25mL/L戊二
7、醛固定灌注标本，灌注方法同上，放入冰箱内固定2～4h，取出标本在阳光下曝光40～60min使标本由黄色变成黑色，再置于25mL/L戊二醛于4℃冰箱固定24h，解剖显微镜下常规制备，分离各圈基底膜，甘油封片.1.2.4检测血清中MDA，SOD用药后19d于各组动物心肌取血.离心，取血清-20℃冻存.采用MDA，SOD试剂盒，按说明操作检测.2结果实验中GM组2只动物死亡，死前均消瘦、耳廓反射消失、无力.GM+Res组有1只动物死亡.空白对照组无死亡.2.1ABR检测结果用药后各组动物ABR出现阈移.1KHzABR阈移：
8、GM组（28.8±2.9）dB；Res＋GM组（5.2±2.9）dB，两组间差异显著（P0.01，图1）.8kHzABR阈移：GM组（40.3±3.7）dB；Res+GM组（12.4±2.2）dB，两组间差异显著（P0.01）高频听力损失比低频重（图2）.2.2用药后两组动物的耳蜗铺片比较空白对照组耳蜗铺片毛细胞排列整齐，无缺失（图3）.GM组
