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1、白藜芦醇在豚鼠耳蜗中的抗自由基作用【关键词】白藜芦醇；,,庆大霉素；,自由基 Antifreeradicalactivityofresveratrolinguineapigcochlea 3DepartmentofOtorhinolaryngology,XijingHospital,FourthMillitaryMedicalUniversity,Xian710033,China 【Abstract】AIM:Tostudythepreventionofgentamicin(GM)ototoxicitybyresveratrol(Res)inguineapig.METHODS
2、:Auditorybrainstemresponse,cochlearpreparationandtransmissionelectronmicroscopeorphologyofhaircell.SerumlevelsofGMlyassignedto3groups(GMtreatedalone,GMandResinbinationandonecontrolgroup).Serumlevelsofsuperoxidedismutase(SOD),malondialdehyde(MDA)oftheGM+ResgroupuchhigherthanthatintheGMgroup(P0
3、.05).ResdidnotaltertheserumlevelofGM.Morphologicalresultsagesoccurredinthebasalcircles.Damagesinuppercirclesainlyimpairedtheouterhaircells,onaybeapromisingtherapeuticagenttocleanoutfreeradical. 【Keyicins;freeradical 【摘要】目的：观察白藜芦醇（Res）的抗自由基作用.方法：将豚鼠随机分为3组：庆大霉素组（GM组）；Res＋GM组；空白对照组,每组动物10只.测定听
4、性脑干反应（ABR）、耳蜗铺片、动物血清中丙二醛（MDA）和超氧化物歧化酶（SOD）含量及GM血药浓度，观察Res对自由基的影响.结果：GM+Res组血液中MDA较GM组明显减少(P0.05)；GM+Res组SOD活性明显高于GM组(P0.05).Res对GM的血药浓度无影响.耳蜗铺片结果显示空白对照组毛细胞排列整齐，无损伤；GM组底圈毛细胞损伤严重，向上逐渐减轻，与听阈升高的程度相平行.而GM+Res组的毛细胞部分消失，与GM组比较损伤较轻.结论：Res能对豚鼠体内自由基含量产生很明显的影响，对GM引起的耳毒性有保护作用. 【关键词】白藜芦醇；庆大霉素；自由基 0 引言
5、在氨基糖苷类药物的耳毒性机制中，自由基是目前比较完善的学说之一〔1-2〕.在正常机体内会有少量的自由基存在，病理状态下，自由基含量会增加，直接造成细胞各成分损害，引起其代谢和功能障碍.白藜芦醇（resveratrol，Res）属于非黄酮类多酚化合物,广泛存在于种子植物中.结构中有三个酚羟基，在机体中可以竞争性结合自由基，从而减少自由基含量，达到清除自由基的作用.中药虎杖和葡萄皮中含有大量的Res,具有很大的药用价值〔3〕.丙二醛（malondialdehyde,MDA）、超氧化物歧化酶（superoxidedismutase,SOD）是检测自由基的重要参数.我们将Res与庆大霉素
6、（gentamicin,GM）用于动物后通过检测动物血清中MDA，SOD的含量以及观察听性脑干反应（auditorybrainstemresponse,ABR）和细胞形态学的变化来研究Res对自由基的作用. 1 材料和方法 1.1材料 耳廓反射正常的健康雄性杂色豚鼠30只，体质量250～350g（第四军医大学实验动物中心）；硫酸GM（西安高科陕西金方药业公司）；Res（西安交大保赛生物技术股份有限公司）；MDA，SOD试剂盒（南京建成生物工程研究所）. 1.2方法 1.2.1动物分组及处理 将30只豚鼠随机分为3组，每组10只.①GM组：120mg/kg皮下注射GM，
7、1次/d，连续3g/kg灌胃；GM120mg/kg皮下注射，1次/d，连续3g/kg皮下注射麻醉后，将针型记录电极置前额正中皮下，参考电极置测试耳外耳道口后上皮下，鼻尖接地.用Biologic声刺激器，286计算机自动采样，采用短纯音（toneburst，上升下降时间各2ms，平台时间1ms）1kHz，8kHz刺激，间隔75ms，扫描时间20ms，叠加256次，带通滤波80～1500Hz,在屏蔽隔声室内常规测试. 1.2.3耳蜗硬铺片标本制备〔4〕 将动物麻醉致死，取出听泡暴
