异丙酚通过pkc途径抑制氯化铵处理的大鼠脑星形胶质细胞aqp4表达上调

《异丙酚通过pkc途径抑制氯化铵处理的大鼠脑星形胶质细胞aqp4表达上调》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、浙江大学硕士学位论文摘要异丙酚通过PKC途径抑制氯化铵处理的大鼠脑星形胶质细胞AQP．4表达上调浙江大学医学院硕士研究生导师麻醉学郭鹏祝胜美中文摘要目的：肝性脑病系严重的肝功能失调或障碍所致、以代谢紊乱为主要特征的中枢神经系统功能失调综合症。除肝移植之外，目前尚无有效的治疗手段。脑水肿是肝性脑病的一个重要病理变化，其中以星形胶质细胞水肿最为明显。氨中毒仍处于HE发病机制的中心地位，但其导致星形胶质细胞水肿的机制尚未完全清楚，有研究显示水通道蛋白-4参与了氨导致的星形胶质细胞水肿。研究表明异丙酚通过活化PKC、磷酸化底物蛋白对缺血再灌注损

2、伤引起的心肌、神经元损伤及脑水肿具有保护作用。为探讨异丙酚对肝性脑病脑水肿的保护作用，本实验拟通过氯化铵处理原代培养的星形胶质细胞建立肝性脑病的离体模型，检测不同时间点AQP．4的表达，观察异丙酚对氯化铵处理的星形胶质形态、细胞活性及AQP．4表达的影响，探讨异丙酚对肝性脑病脑水肿的保护作用及可能的机制。方法：取出生2-3天的Sprague．Dawley大鼠脑皮质分离培养星形胶质细胞。将原代培养的星形胶质细胞随机分成6组，分别为对照组(正常组)，氯化铵处理6h、12h、24h、48h组(NH4Cl组)，O．1％--甲基亚砜预处理组(DM

3、SO组)，PKC激动剂II浙江大学硕士学位论文摘要TPA预处理组(TPA组)，异丙酚预处理组(Pro组)及异丙酚与PKC拮抗剂R031．8220共同预处理组(PR组)。免疫荧光法鉴定星形胶质细胞的纯度，Western．blot法检测各组星形胶质细胞AQP．4的表达情况，MTT法测定细胞活性，光学显微镜观察星形胶质细胞形态学变化。结果：1)与对照组相比，氯化铵处理12h后星形胶质细胞AQP．4的表达明显增加(P<0．05)，在24h达到高峰，到48h开始下降。2)氯化铵处理的星形胶质细胞活性较对照组明显下降(P<0．05)。3)与NH4C

4、l组相比，异丙酚明显降低氯化铵处理后星形胶质细胞AQP-4的表达上调(P<0．05)，减轻细胞水肿，抑制细胞活性的下降(P<0．05)。4)氯化铵处理的星形胶质细经PKC激动剂TPA预处理后，与NH4CL组相比，AQP-4表达明显下调(P<0．05)，细胞活性提高(P<0．05)，细胞水肿减轻。5)氯化铵处理的星形胶质细胞经PKC拮抗剂R031-8220与异丙酚共同预处理后，AQP．4表达呈可逆性上调，与Pro组相比，差异具有统计学意义(P<0．05)，细胞水肿加重。结论：氯化铵处理后星形胶质细胞AQP．4的表达上调，细胞活性下降，细胞

5、水肿，而异丙酚预处理抑制氯化铵处理的星形胶质细胞AQP．4的上调，减轻细胞水肿。异丙酚的此作用部分是通过激活PKC途径实现的。关键词：异丙酚；水通道蛋白．4；蛋白激酶C；氯化铵；星形胶质细胞ⅡI浙江大学硕士学位论文摘要Propofolpretreatmentattenuatesaquaporin一4over-expressioninastrocytesofratinducedbyammoniathroughPKCpathwayMedicalcollegeofZhejiangUniversityDepartmentofanesthesio

6、logyobjective：MasterstudentGuoPeng而forProf．ZhuSheng-meiAbstractHepaticencephalopathy(HE)isaneurologicaldisorderthatoccursinpatientswithsevereliverfailure．Theonlyeffectivetreatmentforthisconditionisanemergencylivertransplantation．Brainedemaistheprincipalneurologicalcompli

7、cationinpatientswiththeacuteformofHE．AstroglialswellingisgenerallybelievedtorepresentamajorcomponentofthebrainedemainHE，ammoniahasbeenstronglyimplicatedasamajortoxininliverfailure．Whiletheprecisemechanismbywhichammoniabringsaboutsuchswellingremainspoorlyunderstood，recent

8、studieshaveinvokedaquaporin一4(AQP-4)inthemechanismofammonia-inducedastrocyteswelling．Previousstudieshav